當前位置:上海谷研實業(yè)有限公司>>生化檢測試劑盒>>氧化與抗氧化系列>> 二胺氧化酶(DAO)微量法檢測試劑盒
貨號 | GOY-01S6429 |
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測定步驟:
1、 酶標儀預熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細閱讀購買說明!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 貨號 |
100管/48樣 | 微量法 | GOY-01S6429 |
商品介紹
測定意義 DAO(EC1.4.3.6)廣泛存在于動物(腸粘膜、肺、肝臟、腎臟等)、植物和微生物中。催化多胺氧化為醛,其活性與核酸和蛋白合成密切相關(guān),能夠反映腸道機械屏障的完整性和受損傷程度。 測定原理: DAO催化尸胺產(chǎn)生醛和過氧化氫,外源添加過量的辣根過氧化物酶,催化過氧化氫氧化鄰聯(lián)茴香胺生成有色物質(zhì),在460nm處有特征吸收峰,通過測定該波長吸光度增加速率,計算DAO活性。 自備實驗用品及儀器: 天平、低溫離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
所需的儀器和用品:
可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗
樣本和試劑浪費!
1、樣本制備
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行
勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。
【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進行提取
② 細菌/細胞樣本:
先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL
提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次);
12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數(shù)量(10
4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。
注意事項:
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于 1,建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用(10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?對照管的范圍是 0.4-1。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;
(2)沒有按順序加試劑;(3)反應時間不夠,可以延長反應時間(反應時間 30min可以延長到 40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應倍數(shù)。
若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般
將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10倍后再測,通??梢允箿y定正常。
染色體及有絲分裂蛋白MIS12抗體Human GDF5(Growth/differentiation factor 5) ELISA Kit唾液彎曲桿探針法熒光定量PCR試劑盒
單羧酸轉(zhuǎn)運蛋白-1抗體Human HSPG2(Basement membrane-specific heparan sulfate proteoglycan core protein) ELISA Kit伊麗莎白巴爾通體探針法熒光定量PCR試劑盒
線粒體核糖體蛋白L11抗體Human TEP1(omerase protein component 1) ELISA Kit飾紋汀蛙虹彩病探針法熒光定量PCR試劑盒
促血管平滑肌分化因子抗體Human CSTA(Cystatin-A) ELISA Kit病探針法熒光定量PCR試劑盒
跨膜結(jié)構(gòu)域4亞家族成員2抗體Human HBA1(Hemoglobin subunit alpha) ELISA Kit牛布魯氏桿探針法熒光定量PCR試劑盒
化致癌基因C-Myc抗體Human SULF2(Extracellular sulfatase Sulf-2) ELISA Kit犬輪狀病探針法熒光定量PCR試劑盒
肌收縮蛋白MYOT抗體Human STEAP1(Metalloreductase STEAP1) ELISA Kit副百日咳波氏桿探針法熒光定量PCR試劑盒
化絲裂原活化蛋白激MAP4K4抗體Human HIF1AN(Hypoxia-inducible factor 1-alpha inhibitor) ELISA Kit牛仰口線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
二胺氧化酶(DAO)微量法檢測試劑盒環(huán)己烷羧 ≥98%, Kosher小鼠超敏C反應蛋白(hs-CRP)免疫試劑盒大腦蛋白2抗體SFRP2/SARP1 分泌凋亡相關(guān)蛋白1抗體
2-乙酰呋喃 99%小鼠腸脂肪結(jié)合蛋白(iFABP)免疫試劑盒B轉(zhuǎn)錄激活因子抗體SFRP1 分泌型卷曲相關(guān)蛋白1抗體
糠 AR小鼠長停滯特異性因產(chǎn)物6(gas-6)免疫試劑盒BCL6B抗體SFR19 剪接因子,精氨/絲氨豐富19
糠 CP小鼠叉頭框蛋白03(FoxP3)免疫試劑盒BAP31蛋白抗體SEZ6L 癲癇樣相關(guān)蛋白6抗體
糠 98%小鼠層連蛋白/板層素(LN)免疫試劑盒支鏈氨轉(zhuǎn)氨2抗體SETBP1 SET結(jié)合蛋白1抗體
呋喃 >99.0%(GC)小鼠草膦乙酰轉(zhuǎn)移(PAT)免疫試劑盒BCL2相關(guān)蛋白A1抗體SET translocation SET易位蛋白抗體(髓系白血病相關(guān)蛋白)
呋喃 CP小鼠不對稱二精氨(ADMA)免疫試劑盒B淋巴瘤蛋白3抗體SET SET結(jié)合蛋白1抗體
呋喃 99.5%小鼠補體因子H(CFH)免疫試劑盒轉(zhuǎn)錄因子MYB相關(guān)蛋白B抗體SESN3 Sestrin3抗體
呋喃 standard for GC,≥99.5% (GC) 小鼠補體片斷5a(C5a)免疫試劑盒防御素β1/Defensin β1抗體SESN2/Hi95 缺氧誘導因95抗體
1-吡咯 99%小鼠補體片斷3a(C3a)免疫試劑盒B活化因子受體抗體SESN1/PA26 p53調(diào)控PA26核蛋白抗體
2-四 99%小鼠補體蛋白5(C5)免疫試劑盒TNF家族B激活因子抗體Sertad1 調(diào)控周期蛋白依賴蛋白激SEI1抗體
2-四 Standard for GC, ≥99.5% (GC)小鼠補體蛋白4(C4)免疫試劑盒蛇巴曲抗體SERPINI2/PI14 蛋白抑制劑14抗體
酮 40%溶液小鼠補體蛋白3(C3)免疫試劑盒大腦蛋白2抗體SERPING1/C1 Inactivator 酯抑制蛋白C1IN抗體
1,3-二 98%小鼠補體1抑制物抗體(C1INH)免疫試劑盒程序性死亡配體1抗體SERPINB3 絲氨蛋白抑制劑B3抗體
吡咯 standard for GC,>99.7%(GC)小鼠波形蛋白(VIM)免疫試劑盒B7-H4抗體SERPINB12 絲氨蛋白抑制劑B12抗體
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