當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>生化檢測試劑盒>>氧化與抗氧化系列>> 銅藍(lán)蛋白(Cp)含量微量法檢測試劑盒
貨號 | GOY-01S6433 |
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商品介紹
測定意義 銅藍(lán)蛋白是血漿的含銅蛋白,有運(yùn)輸銅的功能,同時(shí)具有氧化酶的活性,是細(xì)胞外液重要的抗氧化劑。 測定原理: 銅藍(lán)蛋白催化3,3’,5,5’-四甲基聯(lián)苯胺生成藍(lán)色產(chǎn)物,在645nm處有特征吸收峰,依此可得銅藍(lán)蛋白活性。 自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器: 天平、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細(xì)閱讀購買說明!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 貨號 |
100管/48樣 | 微量法 | GOY-01S6433 |
所需的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)!
1、樣本制備
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行
勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。
【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取
② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本:
先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL
提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);
12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10
4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。
注意事項(xiàng):
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于 1,建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用(10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?對照管的范圍是 0.4-1。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;
(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間 30min可以延長到 40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般
將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10倍后再測,通??梢允箿y定正常。
測定步驟:
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。
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銅藍(lán)蛋白(Cp)含量微量法檢測試劑盒3,4-二酚 98%還原(GR)免疫試劑盒G蛋白偶聯(lián)受體171抗體LIR-6 白免疫球蛋白樣受體6抗體
3,5-二羥,無水 97%S轉(zhuǎn)移(GSTs)免疫試劑盒神經(jīng)膜糖蛋白M6bLipophilin B 親脂性蛋白B抗體
苔黑酚(一水物) 98%睪酮(T)免疫試劑盒鳥苷激GMK抗體LIPK 脂肪家庭成員K抗體
2-乙酰吡 98%分泌型免疫球蛋白A(sIgA)免疫試劑盒半糖腦苷脂抗體Lipin 1 脂酯LPIN1抗體
2-乙酰吡咯 99%單核趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)免疫試劑盒G蛋白偶聯(lián)受體激5抗體LIPG/Endothelial lipase 內(nèi)皮脂肪抗體
芐硫 98%促卵泡素(FSH)免疫試劑盒GTP結(jié)合蛋白REM1抗體Lingo-1 Nogo受體反應(yīng)蛋白抗體
二烯硫 98%雌激素(E)免疫試劑盒化糖原合激-3α抗體Lin-28B RNA結(jié)合蛋白LIN28B抗體
二烯二硫 85%雌二(E2)免疫試劑盒生長分化因子7抗體Lin28 RNA結(jié)合蛋白LIN28抗體
2-乙-3-吡 99%層連蛋白/板層素(LN)免疫試劑盒葡萄糖激調(diào)節(jié)蛋白抗體LIMS1 整合素和生長因子樣蛋白1抗體
4-乙愈創(chuàng)木酚 ≥98%, FCC, FG補(bǔ)體蛋白4(C4)免疫試劑盒γ谷氨酰半胱氨合成抗體(γ-GCSc)LIMK1 單絲氨蛋白激1抗體
1-己硫 96%補(bǔ)體蛋白3(C3)免疫試劑盒GCOM1蛋白抗體LILRB3/CD85a/PirB 白免疫球蛋白樣受體-B抗體
2-硫-3-吡 99%白三烯C4(LTC4)免疫試劑盒葡萄糖果糖還原2抗體Ligamentum Nuchae Elastin 項(xiàng)韌帶彈性蛋白抗體
4-辛 98%白介素8(IL-8/CXCL8)免疫試劑盒膠質(zhì)系源性神經(jīng)營養(yǎng)因子受體α1樣蛋白抗體LIFR/CD118 白血病抑制因子受體抗體
硫 99%白介素2受體(IL-2R)免疫試劑盒GHDC蛋白抗體LIF 白血病抑制因子抗體
2,3,5,6-四吡 98%白介素15(IL-15)免疫試劑盒甘油激5抗體LI-cadherin 肝腸鈣粘連蛋白抗體
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