當(dāng)前位置:上海谷研實業(yè)有限公司>>生化檢測試劑盒>>氧化與抗氧化系列>> 植物類黃酮可見分光光度法檢測試劑盒
貨號 | GOY-01S6444 |
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商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | |
規(guī)格 | 50管/48樣 |
檢測方法 | 可見分光光度法 |
貨號 | GOY-01S6444 |
商品介紹:
測定意義
類黃酮是一類多苯化合物,屬于植物次生代謝物,對人體具有消炎,抗菌,降血脂,清除體內(nèi)羥自由基,預(yù)防癌癥等作用。
測定原理:
在堿性亞硝酸鹽溶液中,類黃酮與鋁離子形成在502nm處有特征吸收峰的紅色絡(luò)合物,測定樣品提取液在502nm處的吸光值,即可計算樣品類黃酮含量。
需自備的儀器和用品:
天平、烘箱、粉碎儀、篩子、超聲破碎儀、60%乙醇、離心機(jī)、可見分光光度計、1mL玻璃比色皿、蒸餾水。
實驗方法學(xué):
一、肝素的配制: 市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?/span>0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液樣本的收集: 全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。 1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。 2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA。 |
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
唾液酸結(jié)合性球蛋白樣凝集素14抗體Anti-PIK3R2 Antibody96 孔板質(zhì)粒 DNAout( 真空法 )1次圖片
分泌素受體抗體Anti-PIK3R1 Antibody一步法質(zhì)粒 DNAout 2.0100 次圖片
肌聚多糖-β抗體Anti-PIN1 Antibody一步法大提質(zhì)粒 DNAout5次品牌
化非受體型蛋白激抗體Anti-PIK3R2 Antibody超純水100mL價格
化非受體型蛋白激抗體Anti-PIM1 Antibody動物 DNAout250mL圖片
分泌型球蛋白A抗體Anti-PINK1 Antibody百萬堿基級血液 DNAout10 次規(guī)格
S期激相關(guān)蛋白2抗體Anti-PKCmu(PRKD1) Antibody百萬堿基級動物 DNAout10 次規(guī)格
蛇蛋白抗體(中華眼鏡蛇)Anti-PINX1 Antibody柱式真 DNAout50 次價格
植物類黃酮可見分光光度法檢測試劑盒鹽呋喃它酮 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.8%化血管擴(kuò)張激蛋白抗體
胭脂紅標(biāo)準(zhǔn)溶液0.50mg/ml,溶劑:水化血管內(nèi)皮生長因子受體2抗體
金標(biāo)準(zhǔn)溶液100.0μg/g,體:0.5mol/l鹽化血管內(nèi)皮生長因子受體2抗體
釓標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000µg/mL,體:10%HCl化血管內(nèi)皮生長因子受體2抗體
三標(biāo)準(zhǔn)溶液0.001g/ml,溶劑:水血管內(nèi)皮粘附分子抗體
三標(biāo)準(zhǔn)溶液0.0001g/ml,溶劑:水纈氨抗體
人參皂苷Rg1純度標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 99.6×10-2血管粘附蛋白1抗體
alpha-六六六標(biāo)準(zhǔn)溶液50μg/ml,體::(4:1)間粘附蛋白Vinexin抗體
噻螨酮標(biāo)準(zhǔn)溶液 1.00mg/ml波形蛋白抗體
六標(biāo)準(zhǔn)溶液 0.103mg/ml,體:異辛烷A抗體
六標(biāo)準(zhǔn)溶液 0.101mg/ml,體:異辛烷蛋白聚糖Versican抗體
鈥標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/mL,體:10%HCLVWCE抗體
β-六六六標(biāo)準(zhǔn)溶液 50.0µg/mL,體::=4:1視神經(jīng)視網(wǎng)膜相關(guān)蛋白VAX1抗體
δ-六六六標(biāo)準(zhǔn)溶液 50µg/mL,體::=4:1視神經(jīng)視網(wǎng)膜相關(guān)蛋白VAX2抗體
水硬度標(biāo)準(zhǔn)溶液 45.0mmol/l(以CaCO3計),體:0.1mol/L HCl3受體抗體
操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時,應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。
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