選擇ELISA試劑盒應(yīng)從靈敏度、特異性、精密度、穩(wěn)定性、簡(jiǎn)便性、安全性及經(jīng)濟(jì)性全面評(píng)價(jià)。
產(chǎn)品名稱：鴨子神經(jīng)肽Y(NP-Y)elisa試劑盒
英文名稱：Duck neuropeptide Y,NP-Y ELISA Kit
規(guī)格：48T/96T
保存： 2-8℃（頻繁使用時(shí)）；-20℃（長(zhǎng)時(shí)間不用時(shí)）。
有效期： 6 個(gè)月(4℃)；12 個(gè)月（-20℃）。
用途： 用于體外定量分析人血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清、細(xì)胞裂解液
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具有如下優(yōu)點(diǎn)：
一、高效、靈敏、特異的抗體；
二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性；
三、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體；
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型；
五、性價(jià)比非常好，節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。
試劑配制：
1、酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔或者48孔）。
2、標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：2瓶（凍干品）。
3、樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
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注意事項(xiàng)：
1加樣：
①實(shí)驗(yàn)樣本過多時(shí)，可分批次操作，以減少實(shí)驗(yàn)時(shí)間延長(zhǎng)造成的誤差；
②加酶試劑后，用吸水紙吸干孔外試劑；
③作定量試驗(yàn)時(shí)，使用加樣器加注試劑，并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性，此外，要做到一份樣本一個(gè)移液頭，防止交叉污染。
2.溫育：
①如有兩種溫度，盡量使用較低的溫育溫度、較長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間的條件；
②用1個(gè)小溫度計(jì)放置在板孔反應(yīng)液中測(cè)量觀察；
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會(huì)造成“邊緣效應(yīng)”，因此盡量采用水??；
3.洗板：
①手工洗板時(shí)，拍板時(shí)要垂直，避免交叉污染，用力不能過猛，防止抗原抗體復(fù)合物脫離；
②洗板機(jī)洗板時(shí)應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢，若被雜物堵塞時(shí)可用注射器針頭挑出；
③為了洗滌效果好，實(shí)驗(yàn)室可采用機(jī)器與人工洗滌相結(jié)合的方法，在機(jī)器洗滌后再進(jìn)行人工洗板1-2次，或適當(dāng)增加洗板的次數(shù)；
4.顯色：
ELISA試劑盒中，如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物，則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液；如以鄰苯二胺(OPD)為底物，則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑，要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光，但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械。
5.判定：
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成，定性測(cè)定用肉眼判讀試驗(yàn)結(jié)果時(shí)，反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm；定量測(cè)定時(shí)用酶標(biāo)儀讀取結(jié)果，酶標(biāo)儀不應(yīng)置于陽光或強(qiáng)光照射下，需先預(yù)熱15-30 min再進(jìn)行測(cè)試。
苊（標(biāo)準(zhǔn)品）Carfilzomib2-巰基-5-并噻唑

二基與基磺酸鈉的聚合物His-Tag (D3I1O) XP® Rabbit mAb (PE Conjuga)并噻唑-2-甲

二胍（標(biāo)準(zhǔn)品）ROS1 (D4D6®) Rabbit mAb (HRP Conjuga)N-甲基吲哚

1?；?9-羥基巴卡丁III（標(biāo)準(zhǔn)品）YAP (D8H1X) XP® Rabbit mAb (HRP Conjuga)5-甲基-6,7-二氫-5H-環(huán)戊并吡

(+)-冰片（標(biāo)準(zhǔn)品）Neurofascin 186 (D6G6O) Rabbit mAb甲氧基甲甲酸酯

酸龍腦酯（標(biāo)準(zhǔn)品）Neurofascin 155 (D7B6O) Rabbit mAb2,2,三溴

二氫丹參酮（標(biāo)準(zhǔn)品）Neurofascin 155 (D7B6O) Rabbit mAb1,雙(2,二氨基氧基)烷

銻標(biāo)準(zhǔn)溶液（1000μg/ml,基體:6.0 mol/L HCl）Cre Recombinase (D7L7L) XP® Rabbit mAb三氟甲氧基酰

銻標(biāo)準(zhǔn)溶液（1000μg/ml,,溶劑：鹽酸）Cre Recombinase (D7L7L) XP® Rabbit mAb7-氮雜并三唑-1-基氧基三(二基)膦六氟酸鹽

銻標(biāo)準(zhǔn)溶液（100mg/L,溶劑:1%鹽酸）Lamin B1 (D9V6H) Rabbit mAb (HRP Conjuga)2-溴-4,5-二氟甲酸甲酯

銻標(biāo)準(zhǔn)溶液（100mg/L(20℃), 基體: 20%HCl）HER3/ErbB3 (D22C5) XP® Rabbit mAb (HRP Conjuga)(R)-1-Boc-氨甲基哌啶

銻標(biāo)準(zhǔn)溶液（分析標(biāo)準(zhǔn)品,1.24±0.26mg/L）His-Tag (D3I1O) XP® Rabbit mAb (Biotinylad)氨基.硫酸鹽

砷標(biāo)準(zhǔn)溶液（1000μg/ml,溶劑:1mol/L硝酸）Bcl-2 (124) Mouse mAb氨基-羧基氧基吡唑

砷標(biāo)準(zhǔn)溶液（100mg/L,溶劑：微量硫酸）Bcl-2 (124) Mouse mAb(甲基哌-1-基)甲

砷標(biāo)準(zhǔn)溶液（100µg/mL,基體：1%HNO3）DDX41 (D3F1Z) Rabbit mAb-2,二氟

砷標(biāo)準(zhǔn)溶液（0.500μg/g,基體:0.2%(v/v)H2SO4,K+2.2mg/L,Na+23mg/L,Cl-37mg/L）PathScan® Total FGF Receptor 4 Sandwich ELISA Kit三氟甲基-2-羥基喹啉

標(biāo)準(zhǔn)溶液（1000μg/ml,溶劑：水）DMT1/SLC11A2 (D3V8G) Rabbit mAb5--2,二甲氧基

標(biāo)準(zhǔn)溶液（100µg/mL,基體：水）HRS (D7T5N) Rabbit mAb2-氟-甲酸酯
鴨子神經(jīng)肽Y(NP-Y)elisa試劑盒6-芐氨基嘌呤 for plant cell culture,≥99.0%小鼠血清白蛋白抗體正基萘胺攝入法細(xì)菌膜損傷熒光檢測(cè)試劑盒2-甲氧基基酸 97%血小板源性生長(zhǎng)因子受體-A抗體流式免疫組化4-溴吲哚 98%黑素皮質(zhì)素4受體抗體正常大鼠（Sprague Dawley）腸組織微粒體組分（5毫克/毫升）N-甲基-N-*基硅烷三胺 GC，≥98.5%L-組氨酸鹽酸鹽一水物3-吲哚丁酸 98%黑素皮質(zhì)素受體5抗體正常大鼠（Sprague Dawley）肺組織微粒體組分（5毫克/毫升）N-甲基-N-*基 95%1-羥基并三氮唑一水物3-吲哚丁酸 分析標(biāo)準(zhǔn)品，99.5%甲狀腺激素轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白/單羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白7/8抗體正常大鼠（Sprague Dawley）肝組織微粒體組分（5 毫克/毫升）炔酸甲酯 97%甘氨酸鎂3-吲哚丁酸 Standard for GC絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶MARK2抗體正常大鼠（Sprague Dawley）腎組織微粒體組分（5毫克/毫升）4-甲基-3-硝基吡啶 97%過氧化物酶（辣根）1-萘乙酸 96%磷酸化絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶MARK2抗體正常男性人體肝組織S9組分（5毫克/毫升）2-甲基-3-丁炔-2- 98%鹽酸克林霉素代異烷 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥99.7% (GC)基質(zhì)金屬蛋白酶9抗體正常男性人體肝組織微粒體組分（5毫克/毫升）3-甲氧基基酸 97%2-甲酸代異烷 CP,97%磷酸化蛋白激酶MST2抗體正常女性人體肝組織S9組分（5毫克/毫升）4-甲氧基基酸 97%丁二酸鈉六水合物
操作流程如下：
（1）僅用于科研待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。