當前位置:上海谷研實業(yè)有限公司>>進口elisa試劑盒>>其它elisa試劑盒>> 48T/96T羊α晶體B鏈(CRYAB)elisa試劑盒
公司采用的全是進口原材料研,發(fā)靈敏性高,高效性,*抗體,吸附均勻、吸附性好,回收利用率高、可靠性強,無效包退包換,公司提供免費代測服務(wù),各種種屬ELISA試劑盒產(chǎn)品齊全,質(zhì)量可靠。
產(chǎn)品名稱 | 羊α晶體B鏈(CRYAB)elisa試劑盒 |
英文名稱 | Sheep Alpha-crystallin B chain,CRYAB ELISA kit |
貨號 | GOY-S74884 |
實驗流程:
1. 實驗前標準品、試劑及樣本的準備;
2. 加樣(標準品及樣本)100µL,37°C孵育1小時;
3. 吸棄,加檢測溶液A100µL,37°C孵育1小時;
4. 洗板3次;
5. 加檢測溶液B100µL,37°C孵育30分鐘;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分鐘;
8. 加終止液50µL,立即450nm讀數(shù)。
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樣品收集、處理及保存:
1).細胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2)細胞:用PBS反復(fù)洗滌細胞3次,調(diào)整細胞濃度達到104-106/ml 左右,通過反復(fù)凍融,使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份,或者細胞超聲粉碎,離心取上清液檢測。
3)血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。
4)血漿:應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
5)體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6.)組織標本:切取組織標本,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進行檢測。
樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
7)保存:如果樣品不能立即檢測,應(yīng)將其分裝,-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。血液標本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul ,將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0分鐘。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37℃暗處反應(yīng)15 分鐘。
8. 每孔加入100ul 終止液混勻。
9. 30分鐘內(nèi)用酶標儀在450 nm處測吸光值。
羊α晶體B鏈(CRYAB)elisa試劑盒操作步驟:
1)運用前,將所有試劑充沛混勻。不要使液體發(fā)生很多的泡沫,防止加樣時參加很多的氣泡,發(fā)生加樣上的差錯。
2)依據(jù)待測樣品數(shù)量加上規(guī)范品的數(shù)量決議所需的板條數(shù)。每個規(guī)范品和空白孔主張做復(fù)孔。每個樣品依據(jù)自個的數(shù)量來定,能運用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后參加50ul于反響孔內(nèi)。
3)參加稀釋好后的規(guī)范品50ul于反響孔、參加待測樣品50ul于反響孔內(nèi)。當即參加50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,悄悄振動混勻,37℃溫育1小時。
4)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗刷液,振動30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機洗刷,洗刷次數(shù)添加一次。
5)每孔參加80ul的親和鏈酶素-HRP,悄悄振動混勻,37℃溫育30分鐘。
6)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗刷液,振動30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機洗刷,洗刷次數(shù)添加一次。
7)每孔參加底物A、B各50ul,悄悄振動混勻,37℃溫育10分鐘。防止光照。
8)取出酶標板,敏捷參加50ul停止液,參加停止液后應(yīng)當即測定成果。
9)在450nm波利益測定各孔的OD值。
Amberli XAD-1180N 非離子型多孔樹脂(粒徑0.350 - 0.600 mm)MTHFD1L (D7O8E) Rabbit mAb基胍碳酸鹽
嘧菌酯(標準品)MTHFD1L (D8T7L) Rabbit mAb氧基酚
雙甲脒標準溶液(10μg/ml,u=4%)AML1 (D33G6) XP® Rabbit mAb (PE Conjuga)DL-泛酰內(nèi)酯
雙甲脒標準溶液(100μg/ml,u=2%)NF-κB2 p100/p52 (18D10) Rabbit mAb (PE Conjuga)3,5-二甲基-氨基酚
涕滅標準溶液(0.100mg/ml)Notch1 (D6F11) XP® Rabbit mAb (PE Conjuga)四基米氏酮
標準溶液(100μg/ml,溶劑:甲)PD-L1 (E1L3N®) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjuga)6-溴-2-巰基并噻唑
標準溶液(100mg/L,溶劑:水)mTOR (7C10) Rabbit mAb (PE Conjuga)2-溴-5-
標準溶液(1000μg/ml,溶劑:甲)DYKDDDDK Tag (D6W5B) Rabbit mAb (Binds to same epitope as Sigma's Anti-FLAG® M2 Antibody) (Alexa Fluor® 488 Conjuga)6-溴-2-甲基-1,并噻唑
標準溶液(0.989 mg/ml,基體:甲)DYKDDDDK Tag (D6W5B) Rabbit mAb (Binds to same epitope as Sigma's Anti-FLAG® M2 Antibody) (Alexa Fluor® 647 Conjuga)Boc-(2-吡啶基)-L-氨酸
氨標準溶液(1000μg/ml,溶劑:水)DYKDDDDK Tag (D6W5B) Rabbit mAb (Binds to same epitope as Sigma's Anti-FLAG® M2 Antibody) (Pacific Blue™ Conjuga)地霉素
酰嘧磺隆(標準品)Atg2A Antibody2,二甲氧基磺酰
莠滅凈(標準品)Phospho-Tau (Ser416) (D7U2P) Rabbit mAb5,5-二甲氧基-1,2,3,四環(huán)戊二
草毒死(標準品)Phospho-Tau (Ser416) (D7U2P) Rabbit mAb2--6-氟酚
正十六烷標準溶液(1000μg/ml,基體:甲)Rad54 (D4W3Z) Rabbit mAb3,二-6-硝基三氟甲
冰酸(標準品)Animal-Free Blocking Solution (5X)2-戊基吡啶
36%酸(標準品)Animal-Free Blocking Solution (5X)2-喹唑啉
冰酸(HPLC,≥99.9%)DAPT二基二硫
Amberli® IRP-69陽離子交換樹脂Actinomycin D二甲基三硫
1,4-二甲氧基 99%珠蛋白2抗體真菌/酵母腺苷酸激酶(Adenylate kinase)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒1--2-*硅基乙炔 97%1-溴代辛烷2,5-二乙氧基胺 97%減數(shù)分裂缺陷蛋白1抗體真菌/酵母氧化應(yīng)激活性氧(ROS)熒光測定試劑盒(次酸離子)甲基*基硅烷 98%金2,5-二甲氧基胺 97%細胞增殖誘導(dǎo)蛋白60(早老素相關(guān)蛋白)真菌/酵母總巰基含量比色法定量檢測試劑盒2-吡啶 97%白花前胡甲素2,4,5-三胺 分析標準品,99%線粒體載體同源蛋白2抗體真菌/酵母總巰基含量熒光定量檢測試劑盒異溴化鎂溶液 0.5 M THF溶液人參皂苷 Rb22,4,5-三胺 97%線粒體裂變調(diào)節(jié)蛋白1抗體真菌NADPH氧化酶活性比色法定量檢測試劑盒2-異氧基-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜烷 98%醋酸乙酯二硫化碳 AR,99.0%線粒體蛋白18抗體真菌格蘭-韋革氏(Gram-Weigert)染色試劑盒雙(*基硅烷基)氨基鋰 95%川續(xù)斷皂苷乙五硫化二磷 99%,P≥27%生長激素誘導(dǎo)跨膜蛋白抗體(源性蛋白2)真菌格莫瑞六亞甲基四胺(Gomori's Methenamine Silver;GMS)銀染試劑盒6-甲基-2-吡啶 98%蜂膠6-芐氨基嘌呤 99%線粒體裂變因子MFF抗體真菌天青曙紅(Azure-eosinate)染色試劑盒三氟磺酸汞 98%腸上皮干細胞蛋白抗體流式免疫組化
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