當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>生化檢測試劑盒>>氧化與抗氧化系列>> 花青素還原酶(ANR)可見分光光度法
貨號 | GOY-01S6467 |
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【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細(xì)閱讀購買說明!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 貨號 |
50管/48樣 | 可見分光光度法 | GOY-01S6467 |
商品介紹
測定意義 花青素還原酶是黃酮合成途徑中的關(guān)鍵酶,在植物體內(nèi)起非常重要的調(diào)控作用,對花青素還原酶的調(diào)控機(jī)制研究有利于從基因水平改變植物的品質(zhì)。 測定原理: 花青素還原酶在NADPH存在的條件下作用于飛燕草色素轉(zhuǎn)變?yōu)楸頉]食子兒茶素和NADP,使反應(yīng)體系在340nm處的吸光值下降,吸光值下降速率反應(yīng)了花青素還原酶的活性。 需自備的儀器和用品: 天平、研缽、低溫離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)、1mL石英比色皿、蒸餾水。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
所需的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)!
1、樣本制備
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行
勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。
【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取
② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本:
先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL
提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);
12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10
4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。
注意事項(xiàng):
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于 1,建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用(10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?對照管的范圍是 0.4-1。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;
(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時間不夠,可以延長反應(yīng)時間(反應(yīng)時間 30min可以延長到 40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般
將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10倍后再測,通??梢允箿y定正常。
甲基磺草酮氧化鋰 99.99% metals basisAnti-Collagen VI /FITC 熒光素標(biāo)記抗Ⅵ型膠原抗體IgG
煙嘧磺隆 分析標(biāo)準(zhǔn)品氫化鋰 97%Anti-Collagen VII /FITC 熒光素標(biāo)記抗Ⅶ膠原抗體(Ⅶ型膠原)抗體IgG
煙嘧磺隆 95%溴化鋰 CP,95%Anti-Collagen X /FITC 熒光素標(biāo)記抗Ⅹ型膠原抗體IgG
草甘膦 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5%溴化鋰溶液 55 wt. % in H2OAnti-COX/FITC 熒光素標(biāo)記色素c氧化抗體IgG
草甘膦溴化鋰 99.9% metals basisAnti-COX-1/FITC 熒光素標(biāo)記前列腺素氧化環(huán)化1抗體IgG
草甘膦標(biāo)準(zhǔn)溶液100μg/ml,u=2%,溶劑:水二異基鋰溶液 2.0 M in heptane/ THF/ ethylbenzeneAnti-COX-2/FITC 熒光素標(biāo)記前列腺素氧化環(huán)化2抗體IgG
草甘膦標(biāo)準(zhǔn)溶液10μg/ml,u=2%,溶劑:水氫化鋁鋰 97%Anti-COX4I1/FITC 熒光素標(biāo)記色素c氧化IV亞型1抗體IgG
草甘膦 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.9%叔丁基苯 99%Anti-COX7A2/FITC 熒光素標(biāo)記色素c氧化COX7A2抗體IgG
花青素還原酶(ANR)可見分光光度法鉍標(biāo)準(zhǔn)溶液 100mg/L,體: 5%HNO3Mouse Beta-catenin, Beta-cat ELISA Kit 小鼠β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白豚鼠半胱氨酰白三烯受體2(CYSLTR2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
芐嘧磺隆 分析標(biāo)準(zhǔn)品Mouse pituitary adenylate cyclase activating polypeptide,PACAP ELISA Kit 小鼠垂體腺苷環(huán)化激活肽豚鼠心肌肌鈣蛋白T(c/TNNT2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
聯(lián)標(biāo)準(zhǔn)溶液 10.8ug/ml,體:Mouse Angiotensin converting enzyme,ACE ELISA Kit 小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化豚鼠胰高血糖素樣肽1(GLP-1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
3,4-并芘標(biāo)準(zhǔn)溶液 5.25μg/mL,體:Mouse angiotension II ,ANG- II ELISA Kit 小鼠血管緊張素Ⅱ豚鼠脂爬行1(PLSCR1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
滅草松標(biāo)準(zhǔn)溶液 0.100mg/mlMouse keratinocyte autocrine factor/Amphiregulin,KAF/AR ELISA Kit 小鼠角化內(nèi)分泌因子/雙調(diào)蛋白豚鼠泛素連接E3A (UBE3A)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
硫標(biāo)準(zhǔn)溶液 0.110mg/mlACV-A (Mouse Activin A) ELISA Kit 小鼠活化素A豚鼠延伸蛋白A(EloA)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
硫標(biāo)準(zhǔn)溶液 100μg/ml,u=4%BDNF(Mouse Brain derived neurotrophic facor) ELISA Kit 小鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子豚鼠嗜性白血球相關(guān)之RNA水解酵素家族成員2(EAR2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
丁草標(biāo)準(zhǔn)溶液 0.100mg/mlBMP-2(Mouse Bone morphogenetic protein 2) ELISA Kit 小鼠骨成型蛋白2豚鼠P糖蛋白/滲透性糖蛋白(P-GP)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
溴螨酯標(biāo)準(zhǔn)溶液 1.00mg/mlBMP-4(Mouse Bone morphogenetic protein 4) ELISA Kit 小鼠骨成型蛋白4豚鼠神經(jīng)元凋亡抑制蛋白(NAIP)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
并[g,h,i]芘標(biāo)準(zhǔn)溶液 10~100μg/mL,體:IGFBP-6(Mouse Insulin-like growth factor binding protein 6) ELISA kit 小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白6豚鼠肌-3-激催化亞σ肽(PIK3Cσ)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
鋇溶液成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 鋇溶液質(zhì)量濃度(20℃):19.532mg/ml,體MIP-1 Delta(Mouse Macrophage Inflammatory Protein 1 Delta) ELISA kit 小鼠巨噬炎性蛋白1δ豚鼠烯式酮羧激1(PCK1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
鋇標(biāo)準(zhǔn)溶液 100mg/L,體: 5%HClPARC(Mouse pulmonary activation regulated chemokine) ELISA Kit 小鼠肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子豚鼠血管生成素(ANG)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
鈹標(biāo)準(zhǔn)溶液 10μg/mlLZM(Mouse Lysozyme) ELISA Kit 小鼠豚鼠低密度脂蛋白(LDL)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
標(biāo)準(zhǔn)溶液0.96mg/ml,溶劑:sCD30(Mouse soluble cluster of differentiation 30) Elisa Kit 小鼠可溶性CD30豚鼠免疫球蛋白G Fc段低親和力受體IIIa(FcγR3A)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
生化需氧量(BOD)標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/mlsMHC-2(Mouse soluble myosin heavy chain 2) ELISA Kit 小鼠可溶性肌球蛋白重鏈豚鼠非紅血影蛋白β4 (SPTβN4)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
測定步驟:
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。
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