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當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>氧化與抗氧化系列>> 多胺氧化酶(PAO)微量法檢測(cè)試劑盒
貨號(hào) | GOY-01S6472 |
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操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | |
規(guī)格 | 100管/96樣 |
檢測(cè)方法 | 微量法 |
貨號(hào) | GOY-01S6472 |
商品介紹:
測(cè)定意義
多胺氧化酶是催化生物體內(nèi)多胺氧化的關(guān)鍵酶,通過(guò)調(diào)節(jié)體內(nèi)多胺水平和生成物的濃度,參與各種植物體對(duì)逆境脅迫的反應(yīng)和生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程。
測(cè)定原理:
PAO催化多胺氧化產(chǎn)生過(guò)氧化氫,在過(guò)氧化氫酶存在的條件下與底物顯色,在550nm下有特征吸收峰,通過(guò)測(cè)定吸光值增加速率來(lái)反映PAO活性。
需自備的儀器和用品:
分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制: 市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?/span>0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液樣本的收集: 全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。 1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。 2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA。 |
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。
鎢酸鈉 CP,99.0%鎢粉 9.95%,<1.1μmAnti-HSA/HRP 辣根過(guò)氧化物標(biāo)記鼠抗人血清白蛋白單克隆抗體IgG
4-甲氧基 99%碳化鈦 99%,2-4μmMouse Anti-YERSINIA PESTIS Monoclonal Anti-body /FITC 熒光素標(biāo)記鼠抗鼠疫F1蛋白/鼠疫耶爾森氏菌莢膜抗原F1單克隆抗體IgG
酪 98%碳化鈦 99%,40nmAnti-Mouse IgA/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗小鼠IgA抗體
鹽酸酪 98%碳化鈦 99.99% metals basisAnti-MPO /FITC 熒光素標(biāo)記髓過(guò)氧化物抗體IgG
2-乙?;?99%氮化鈦 99%,20nmAnti-HAVCR1/KIM1/TIM1/FITC 熒光素標(biāo)記甲型肝炎病受體1IgG
2-乙?;?≥99%,FG,FCC氮化鈦 99.5%,2-10 μmAnti-HSD11B2/HSD2 /FITC 熒光素標(biāo)記羥基類固脫氫11β2抗體IgG
乙酸對(duì)甲氧基芐酯 98%鋱粉 99.9% metals basisAnti-MR/FITC 熒光素標(biāo)記鹽皮質(zhì)受體抗體IgG
乙酸對(duì)甲氧基芐酯 97%,FCC一氧化鈦 99.9% metals basis,粉末,100-200 meshAnti-MRAS/Mras/FITC 熒光素標(biāo)記原癌基因M-ras抗體IgG
多胺氧化酶(PAO)微量法檢測(cè)試劑盒乙二四乙二鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液0.05 M,溶劑:水SCF/MGF(Mouse Stem cell factor/mast cell growth factor) ELISA kit 小鼠干因子/肥大生長(zhǎng)因子豚鼠8-異構(gòu)前列腺素F2α(8-epi-PGF2α)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
吸收峰波長(zhǎng)(nm):400.0~620.0,體:標(biāo)分析儀SDF-1 Beta/CXCL12(Mouse Stromal cell derived factor 1 Beta) ELISA kit 小鼠質(zhì)衍生因子1β豚鼠性T淋巴相關(guān)抗原4(CTLA4)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
吸光度:0.200~1.000A, 體: 標(biāo)分析儀 TGF- Beta1(Mouse Transforming Growth factor Beta1) ELISA kit 小鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1豚鼠三肽肽I(TPP1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
乙標(biāo)準(zhǔn)溶液 0.80mg/mL,體:水TNFsR- I (Mouse Tumor necrosis factor soluble receptor I ) ELISA KIT 小鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ豚鼠TATA框結(jié)合蛋白相關(guān)因子1(TAF1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
銪標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000µg/mL in 10%HCLTNFsR- II (Mouse Tumor necrosis factor soluble receptor II ) ELISA KIT 小鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ豚鼠纖溶-抗纖溶復(fù)合物(PAP)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
乙二四乙(EDTA)二鈉純度標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 99.96%TNF- Alpha(Mouse Tumor necrosis factor Alpha) ELISA KIT 小鼠腫瘤壞死因子α豚鼠神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3(NT-3)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
乙汞標(biāo)準(zhǔn)溶液 75.3×10-6TNF- Beta(Mouse Tumor necrosis factor Beta) ELISA KIT 小鼠腫瘤壞死因子β豚鼠血管生成素樣蛋白2(ANGPTL2)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
環(huán)氧烷標(biāo)準(zhǔn)溶液 997.8mg/L,溶劑:二Col IV (Mouse Collagen Type IV ) ELISA KIT 小鼠Ⅳ型膠原豚鼠腫瘤壞死因子受體超家族成員1B(TNFRSF1B)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
檸檬黃標(biāo)準(zhǔn)溶液0.50mg/mL,溶劑:水HK(Mouse Hexokinase) ELISA KIT 小鼠己糖激豚鼠中性粒堿性(NAP)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
熒蒽標(biāo)準(zhǔn)溶液 10~100μg/mL,體:PDH E1(Mouse pyruvate dehydrogenase-E1) ELISA KIT 小鼠酮脫氫E1豚鼠可溶性間粘附分子1(sICAM-1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
吡氟禾草靈標(biāo)準(zhǔn)溶液 0.101mg/mlPGE2 ELISA Kit(mouse) 小鼠前列腺素E2豚鼠顆粒體蛋白(GRN)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
氟硅唑標(biāo)準(zhǔn)溶液 1.00mg/mlGSK(Mouse glycogen synthase kinase) ELISA KIT 小鼠糖原合成激豚鼠葡萄糖6異構(gòu)(GPI)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
仲丁威標(biāo)準(zhǔn)溶液 1.00mg/mlCXCL16(Mouse CXC-chemokine ligand 16) ELISA KIT 小鼠CXC趨化因子配體16豚鼠乙脫氫1(ADH1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
氟標(biāo)準(zhǔn)溶液 1.00μg/g,體:0.01mol/LH3BO3u-T3(Mouse Ultrasensitivity Tri-iodothyronine) ELISA KIT 小鼠高敏狀腺原氨豚鼠鳥苷激1(GUK1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
標(biāo)準(zhǔn)溶液 10.8mg/ml,體:純水Bcl-2(Mouse B-cell leukemia/lymphoma 2) ELISA KIT 小鼠B淋巴瘤因子2豚鼠瘦素受體(LEPR)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒x
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