當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>生化檢測試劑盒>>氧化與抗氧化系列>> 50次多胺氧化酶(PAO)可見分光光度法檢測試劑盒
貨號 | GOY-01S6473 |
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【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細(xì)閱讀購買說明!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 貨號 |
50管/48樣 | 可見分光光度法 | GOY-01S6473 |
商品介紹
測定意義 多胺氧化酶是催化生物體內(nèi)多胺氧化的關(guān)鍵酶,通過調(diào)節(jié)體內(nèi)多胺水平和生成物的濃度,參與各種植物體對逆境脅迫的反應(yīng)和生長發(fā)育過程。 測定原理: PAO催化多胺氧化產(chǎn)生過氧化氫,在過氧化氫酶存在的條件下與底物顯色,在550nm下有特征吸收峰,通過測定吸光值增加速率來反映PAO活性。 需自備的儀器和用品: 分光光度計(jì)、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
所需的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)!
1、樣本制備
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行
勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。
【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取
② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本:
先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL
提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);
12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10
4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。
注意事項(xiàng):
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于 1,建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用(10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?對照管的范圍是 0.4-1。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;
(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間 30min可以延長到 40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般
將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10倍后再測,通??梢允箿y定正常。
N-乙酰-3,5-二-L- 98%2,4-二氯 CP,98%Anti-Batroxobin/FITC 熒光素標(biāo)記蛇******巴***曲******抗***體IgG
D-甲酯鹽酸鹽 98%3,4-二氯 98%Anti-Bax protein/FITC 熒光素標(biāo)記 Bax 蛋白抗體IgG
N-乙酰-L-亮 98%間苯二甲酰氯 99%Anti-Bax/FITC 熒光素標(biāo)記Bax抗體IgG
N-乙酰-D-亮 99%對苯二甲酰氯 99%Anti-Bax(phospho Ser184) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠等化Bax抗體IgG
DL-天冬酰,一水 99%磺酰氯 97%Anti-BBC3/PUMA /FITC 熒光素標(biāo)記p53正向凋亡調(diào)控因子抗體IgG
DL-天冬 98%愈創(chuàng)木酚 >99.0%(GC)Anti-BCHE/FITC 熒光素標(biāo)記丁酰脂抗體(N端)IgG
L-天門冬 99%愈創(chuàng)木酚 CP,98.0%Anti-BCHE/FITC 熒光素標(biāo)記丁酰脂抗體(C端)IgG
L-叔丁酯鹽酸鹽 97%對溴苯 99%Anti-Bcl-2 protein/FITC 熒光素標(biāo)記 Bcl-2 蛋白抗體IgG
多胺氧化酶(PAO)可見分光光度法檢測試劑盒氟化,無水 GR,粉末人雙氫睪酮(DHT)免疫試劑盒化熱休克蛋白β5/α晶狀體球蛋白B/αB-crystallin抗體PIK3CA 脂酰肌激催化亞單位A抗體
鈉 GR,99.5%人衰變加速因子(DAF/CD55)免疫試劑盒1號染色體開放閱讀框167抗體PIK3C3/PI3 kinase type 3 脂酰肌激3催化亞單位3抗體
氟化鈉 99.99% metals basis人輸血傳播病/辛型肝炎病抗原免疫試劑盒1號染色體開放閱讀框168抗體PIH1D1/NOP17 核仁同源蛋白17抗體
氟化鈉 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.93%人輸血傳播病(TTV)/辛型肝炎病抗體免疫試劑盒1號染色體開放閱讀框170抗體PIGR 多聚免疫球蛋白受體抗體
氟化鈉 SP人輸卵管特異性糖蛋白(OVGP1)免疫試劑盒1號染色體開放閱讀框172抗體PIGA 紅脂酰肌聚糖A抗體
氟化鈉 PT人瘦素(LEP)免疫試劑盒1號染色體開放閱讀框173抗體PIG3/TP53I3 p53誘導(dǎo)蛋白3抗體
氟化鈉 ACS, ≥99%人受體型酪氨蛋白樣N(PTPRN)免疫試劑盒1號染色體開放閱讀框174抗體pig cholerae salmonella 豬霍亂沙門氏菌抗體
氟化鈉 AR,98%人受體TNFRSF結(jié)合絲氨蘇氨激2(RIPK2)免疫試劑盒1號染色體開放閱讀框177抗體PID1 相互作用結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體
氟化鈉 昆蟲培養(yǎng)級, ≥99%人嗜伊紅顆粒主要堿性蛋白(EMBP/MBP)免疫試劑盒1號染色體開放閱讀框180抗體PICK1 蛋白激Cα相互作用蛋白1抗體
縮節(jié) 分析標(biāo)準(zhǔn)品人嗜性粒陽離子蛋白(ECP)免疫試劑盒1號染色體開放閱讀框182抗體PIBF1/C13orf24 孕酮誘導(dǎo)阻斷因子1抗體
縮節(jié) 98%人嗜粒趨化蛋白Eotaxin 2(Eotaxin 2/CCL24)免疫試劑盒1號染色體開放閱讀框183抗體PIBF 孕激素誘導(dǎo)阻斷因子抗體
阿斯巴甜 98%人嗜肺軍團(tuán)菌抗原(LP Ag)免疫試劑盒1號染色體開放閱讀框187抗體PI3K/PI3 kinase p85 alpha subunit 脂酰肌激抗體
1,2,3,4-丁烷四羧 99%人視黃免疫試劑盒1號染色體開放閱讀框189抗體PI3 Kinase p110 delta 脂酰肌激催化亞單位D抗體
DL-蘋果 CP,99%人食欲素受體(OXR)免疫試劑盒1號染色體開放閱讀框190抗體PI3 Kinase p110 beta 脂酰肌激(PI3Kβ)抗體
DL-蘋果 AR,99.5%人食欲素/阿立新B(OX-B)免疫試劑盒1號染色體開放閱讀框192抗體PI 3 Kinase p85 beta 脂酰肌激p85β抗體
測定步驟:
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。
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