操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測樣品含量，如樣品濃度過高時，應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計(jì)算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.        棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4.        每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。

商品屬性：

商品介紹：

測定意義

糖原磷酸化酶（Glycogen phosphorylase，GP，EC 2.4.1.1)）是糖原分解代謝的關(guān)鍵酶，使糖原分子從非還原端逐個斷開α-1，4-糖苷鍵移去葡萄糖基，釋放1-磷酸葡萄糖，直至臨近糖原分子α-1，6-糖苷鍵分支點(diǎn)前4個葡萄糖基處。GP分為有活性的糖原磷酸化酶a（GPa）和無活性的糖原磷酸化酶b（GPb）兩種形式。GPb在一定濃度的腺苷酸（5，-AMP）存在下可被激活。

測定原理：

GP催化糖原和無機(jī)磷產(chǎn)生葡萄糖殘基生成糖原和1-磷酸葡萄糖，磷酸葡萄糖變位酶和6-磷酸葡萄糖脫氫酶進(jìn)一步依次催化NADP還原生成NADPH，在340nm下測定NADPH上升速率，即可反映GP活性。添加一定濃度的腺苷酸（5，-AMP）時測定GP（GPa和GPb）活性，未添加腺苷酸（5，-AMP）時測定GPa活性，GP活性－GPa活性得到GPb活性。

需自備的儀器和用品：

紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

實(shí)驗(yàn)方法學(xué)：

選擇抗凝的注意點(diǎn)：

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

L-天冬雙芐酯對甲苯磺酸鹽 98%氟甲基-1,1,1,3,3,3-六氟異基 98%Anti-PTPN4/MEG1/FITC  熒光素標(biāo)記蛋白非受體型4抗體IgG

N-乙酰甘乙酯 98%N,N`-二苯基硫脲 CP,98%Anti-PPAR-delta /FITC  熒光素標(biāo)記D型-過氧化活化增生受體抗體IgG

L- 98%基乙酸 99%Anti-PPAR alpha/FITC  熒光素標(biāo)記α型-過氧化活化增生受體抗體IgG

(3H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡-3-氧基)三-1-吡咯烷基六氟鹽  0.98Anti-PPAR Gamma /FITC  熒光素標(biāo)記過氧化活化增生受體γ抗體IgG

N-乙酰-L-脯 98%0.99Anti-PPIG/FITC  熒光素標(biāo)記親環(huán)蛋白（親環(huán)素）PPIG抗體IgG

S-乙酰半胱鹽酸 99%乙酸異烯酯 99%Anti-PR/FITC  熒光素標(biāo)記孕受體抗體IgG

L-2-丁酸 99%硫化鋅 99.99% metals basis,3.8-4.2μm,powderanti-pRb/p105-Rb /FITC  熒光素標(biāo)記化成視網(wǎng)膜瘤抑癌蛋白抗體IgG

7--4-甲基 98% 二溴 99%Anti-PRCP/FITC  熒光素標(biāo)記脯氨酰羧肽抗體IgG

糖原磷酸化酶b（GPb）微量法檢測試劑盒皮動蛋白(CTTN)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

溴脫氧核苷(BrdU)免疫試劑盒*直銷

大鼠血栓素A2(TXA2)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

Trenbolone(侖諾)免疫試劑盒*直銷

受體型酪蛋白樣N(PTPRN)免疫試劑盒*直銷

小鼠抗小核糖核蛋白/Sm(snRNP/Sm)抗體免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

抗外切體復(fù)合物成分RRP45(EXOSC9)抗體免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

小鼠Wnt-10b蛋白(WNT10B)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

小鼠血管緊張素原(aGT)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

大鼠血紅素氧合2(HO-2)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝