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貨號 | BJ-0161193-2 |
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特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。
產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
NO含量測試盒可見分光光度法 | 可見分光光度法 | 50管/48樣 | BJ-0161193-2 |
商品介紹:
測定意義: NO(Nitric Oxide,NO)廣泛分布于生物體內(nèi)神經(jīng)、循環(huán)、呼吸、消化、泌尿生殖等系統(tǒng)中,特別是神經(jīng)組織中較豐富。它作為細胞間及細胞內(nèi)的信息物質(zhì),發(fā)揮信號傳遞的作用,是一種新型的生物信使分子,在機體的生理、病理過程中起著重要的作用。 測定原理: NO在體內(nèi)或水溶液中極易氧化生成NO2—,在酸性條件下,NO2—與重氮鹽磺酸胺生成重氮化合物,進一步與萘基乙烯基二胺偶合,產(chǎn)物在550nm處有特征吸收峰,測定其吸光值,可以計算NO含量。為了排除樣品色素等的影響,每個樣品需做對照管。 自備實驗用品及儀器: 天平、研缽或勻漿器、可見分光光度計、1mL玻璃比色皿、蒸餾水。 |
優(yōu)點如下:
1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗: X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復(fù)性強。
8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
測定步驟:
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)充分混勻,室溫靜置30min后,450nm處測定各管吸光值A(chǔ)。
注意事項:
待測樣品-70℃可保存1個月。需注意反復(fù)凍融會導(dǎo)致SOD部分失活。
一個試劑盒如果不能在3次內(nèi)使用完畢,其中的WST-8需要在使用時適當(dāng)分裝,以避免反復(fù)凍融導(dǎo)致的檢測效果下降。
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋時所用的稀釋液應(yīng)盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時,標(biāo)準(zhǔn)品也宜使用SOD樣品制備液進行稀釋;當(dāng)樣品為血液等無需處理的樣品時,宜使用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。
抗氧化物會對本試劑盒的檢測產(chǎn)生干擾,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都會使測定出來的吸光度顯著升高。此時盡管樣品沒有顏色,如果設(shè)置了使用說明中的空白對照3,就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。
PE-Cy3標(biāo)記的兔抗羊IgG歧異假絲酵母單寧酸1401-55-4
Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗羊IgG黑曲霉fu酶Q10303-98-0
Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗羊IgG旋毛殼丹參酮IIA磺酸鈉69659-80-9
Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗羊IgG黃暗青霉育亨賓146-48-5
Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗羊IgG雅致小克銀漢霉glycyrrhizic酸銨53956-04-0規(guī)格
PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗羊IgG固氮菌人參皂苷Rh4174721-08-5
PE-Cy7標(biāo)記的兔抗羊IgG繩狀青霉nepetin-7-glucoside569-90-4
Cy3標(biāo)記的兔抗羊IgG大腸埃希氏菌銀杏黃酮481-46-9
Cy5標(biāo)記的兔抗羊IgG黑曲霉6,7-dihydroxycoumarin305-01-1
Cy5.5標(biāo)記的兔抗羊IgG褐囊蜜環(huán)菌香葉木su520-34-3
Cy7標(biāo)記的兔抗羊IgG堆形艾美耳球蟲鬧羊花suIII26342-66-5
生物su標(biāo)記的兔抗羊IgG小鵝瘟陽性血清參考品(檢驗用)柴胡皂甙b258316-41-9
羅丹明標(biāo)記的兔抗羊IgG嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌竹節(jié)參皂苷IVa19895-95-5規(guī)格
性磷酸酶(AP)標(biāo)記的兔抗羊IgG枯草芽孢桿菌水合氧化前胡su2643-85-8
FITC標(biāo)記的兔抗羊IgG蠟狀芽孢桿菌靈芝B104700-96-1
NO含量測試盒可見分光光度法胰島su樣蛋白3(INSL3)試劑盒Anti-HSPA5 Antibody腫瘤相關(guān)蛋白抗原L6
胰腺再生蛋白3γ(REG3γ)試劑盒Anti-HSPA8 Antibody轉(zhuǎn)錄增強因子TEF4
GTP酶活化蛋白(GAP)試劑盒 Anti-HSPA8 Antibody缺氧誘導(dǎo)蛋白HIG1
鈣非依賴性磷脂酶A2(iPLA2)試劑盒Anti-HSPB1 AntibodyThimet內(nèi)肽酶
成纖維生長因子4(FGF4)試劑盒 Anti-HSPA9 Antibody腫瘤壞死因子誘導(dǎo)蛋白3相互作用蛋白1
組織蛋白meiD(CTSD)試劑盒 Anti-HSPB1 Antibody四連接suTN
天門冬an酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)試劑盒 Anti-HSPA9 AntibodyToll樣受體1
實驗方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
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