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貨號 | BJ-016115-1 |
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產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品名稱:NADP蘋果酸脫氫酶(NADPMDH)測試盒微量法
規(guī)格:100管/96樣
貨號:BJ-016115-1
檢測方法:微量法
產(chǎn)品分類:輔酶Ⅰ系列
貯存溫度:2~8℃。
本試劑盒保質(zhì)期:6個月
商品介紹:
測定意義: MDH (EC 1.1.1.37)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,線粒體中MDH是TCA循環(huán)的關(guān)鍵酶之一,催化蘋果酸形成草酰乙酸;相反,胞漿中MDH催化草酰乙酸形成蘋果酸。草酰乙酸是重要的中間產(chǎn)物, 連接多條重要的代謝途徑。因此,MDH在細胞多種生理活動中扮演著重要的角色,包括線粒體的能量代謝、 蘋果酸-天冬氨酸穿梭系統(tǒng)、活性氧代謝和抗病性等。根據(jù)不同的輔酶特異性,MDH分為NAD-依賴的MDH和NADP-依賴的MDH, NADP-MDH主要存在于真核細胞中。 測定原理: NADP-MDH催化NADPH還原草酰乙酸生成蘋果酸,導(dǎo)致340nm處光吸收下降。 需自備的儀器和用品: 紫外分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。 |
操作步驟:
本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。實驗開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時,應(yīng)對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。
端粒酶相關(guān)蛋白1抗體多主葡萄殼菌Hs 746T(人胃癌)
谷氨酰轉(zhuǎn)酶3抗體鞘氨單胞菌P19(小鼠畸胎瘤)
環(huán)指蛋白92抗體康寧木霉NCI-H292(人肺癌)
環(huán)指蛋白調(diào)節(jié)蛋白激酶C蛋白抗體構(gòu)巢曲霉MFC(小鼠胃癌)
TRIM50蛋白抗體米根霉LS-174T(人結(jié)腸腺癌)
環(huán)指蛋白88抗體沉積物鹽坑微菌HFL1(人肺成纖維)
鋅指蛋白抑制NFκB蛋白抗體紫麥角菌NR8383(大鼠肺泡巨噬)
環(huán)指蛋白98抗體大豆慢生根瘤菌MG-63(人骨肉瘤)
環(huán)指蛋白16抗體食物芽孢桿菌Eca-109(人食管癌)
環(huán)指蛋白105抗體大腸埃希菌P815(小鼠肥大瘤)
環(huán)指蛋白125抗體嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌HSC-T6(大鼠肝星形)
因子II)重鏈抗體蘇云金芽孢桿菌HMy2.CIR(人B淋巴母)
轉(zhuǎn)移生長因子β受體3抗體(TGF-βRⅢ,TGFβRⅢ)黑曲霉HL-7702(人肝正常)
辣椒素受體抗體大腸埃希氏菌DLD-1(人結(jié)腸腺癌)
腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白1抗體產(chǎn)氣莢膜梭菌 素C型JeKo-1(人套淋巴瘤)
NADP蘋果酸脫氫酶(NADPMDH)測試盒微量法鐵調(diào)素(Hepc)試劑盒Anti-CINP Antibody麻瘋病和帕金森氏病共同調(diào)節(jié)蛋白
子XIII B多肽(F13B)試劑盒 Anti-CIITA Antibody環(huán)指蛋白131
肌營養(yǎng)不良蛋白關(guān)聯(lián)糖蛋白1(DAG1)試劑盒 Anti-CHUK Antibody(PB0148)磷脂酶A2激活蛋白
甘氨酰tRNA合成酶(GARS)試劑盒 Anti-CIP2A Antibody胸苷磷酸化酶
視黃結(jié)合蛋白4(RBP4)試劑盒Anti-CISD2 Antibodypiwi樣2蛋白
大腦脂肪酸結(jié)合蛋白7(FABP7)試劑盒Anti-CISH Antibody早老素蛋白-2
窖蛋白(Cav-1)試劑盒 Anti-CKAP4 Antibody組蛋白賴氨酸去甲基化酶PHF8
特點:
(1)應(yīng)用廣泛
由于各種各樣的無機物和有機物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機顯色劑的合成和研究取得可喜的進展,從而對元素測定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來的幾萬提高到幾十萬。相對于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準確度一致*是比較高的。不但在實際工作中光度法被廣泛采用,在標準參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標準方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當?shù)娘@色條件就可直接進行光度法測定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測定,已有比較滿意的方法了。
(4)準確度高
對于一般的分光光度法來說,其濃度測量的相對誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。
(6)分析成本低、操作簡便、快速
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