當(dāng)前位置:上海邦景實(shí)業(yè)有限公司>>生化檢測試劑盒>>氮代謝系列>> 亞硝酸還原酶(NiR)測試盒可見分光光度法
貨號 | BJ-0161189-2 |
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優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細(xì)胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗: X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復(fù)性強(qiáng)。
8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。
產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
亞硝酸還原酶(NiR)測試盒可見分光光度法 | 可見分光光度法 | 50管/24樣 | BJ-0161189-2 |
商品介紹:
測定意義: 硝酸還原酶(NiR)是一類能催化亞硝酸鹽還原的酶,廣泛存在于微生物及植物體內(nèi),是自然界氮循環(huán)過程中的關(guān)鍵酶,可以將亞硝酸鹽降解為NO或NH3,從而減少環(huán)境中亞硝態(tài)氮的積累,降低因亞硝酸鹽累積而造成的對生物體的毒害作用。 測定原理: 亞硝酸還原酶可將NO2—還原為NO,使樣品中參與重氮化反應(yīng)生成紫紅色化合物的NO2—減少,即540nm處吸光值的變化可反應(yīng)亞硝酸還原酶的活性。 需自備的儀器和用品: 天平、研缽、可見分光光度計、水浴鍋、低溫離心機(jī)、1mL玻璃比色皿。 |
測定步驟:
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)充分混勻,室溫靜置30min后,450nm處測定各管吸光值A(chǔ)。
注意事項:
待測樣品-70℃可保存1個月。需注意反復(fù)凍融會導(dǎo)致SOD部分失活。
一個試劑盒如果不能在3次內(nèi)使用完畢,其中的WST-8需要在使用時適當(dāng)分裝,以避免反復(fù)凍融導(dǎo)致的檢測效果下降。
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋時所用的稀釋液應(yīng)盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時,標(biāo)準(zhǔn)品也宜使用SOD樣品制備液進(jìn)行稀釋;當(dāng)樣品為血液等無需處理的樣品時,宜使用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。
抗氧化物會對本試劑盒的檢測產(chǎn)生干擾,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都會使測定出來的吸光度顯著升高。此時盡管樣品沒有顏色,如果設(shè)置了使用說明中的空白對照3,就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。
實(shí)驗方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
Cy5.5標(biāo)記的兔抗親和su交鏈孢大蒜su539-86-6
Cy7標(biāo)記的兔抗親和su白腐墊殼孢鄰苯二甲酸二甲酯131-11-3
PE標(biāo)記的兔抗親和su淤泥假單胞菌1,2 -苯二酚120-80-9
Cy3標(biāo)記的兔抗親和su異常漢遜酵母二(2乙基己基)鄰苯二甲酸117-81-7
Cy5標(biāo)記的兔抗親和su貝倫格葡萄座腔菌梨生專化型108-46-3
生物su標(biāo)記的兔抗親和su棉子糖腸球菌藜蘆醛120-14-9
PE-CY5標(biāo)記的兔抗親和su黃曲霉2,5 -二羥基1194-98-5
APC標(biāo)記的兔抗親和su胡椒枯萎病原蘇木B102036-29-3
Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗親和su短波單胞菌屬heterophyllin B145459-19-4
Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗親和su傘枝犁頭霉allomatrine641-39-4規(guī)格
Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗親和su黃褐紋白蟻傘新綠原酸906-33-2
Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗親和su乳明串珠菌原阿片130-86-9
PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗親和su串珠鐮孢*藤黃酸2752-65-0
PE-Cy7標(biāo)記的兔抗親和su白僵菌華蟾su1108-68-5
Cy3標(biāo)記的兔抗生物su抗體IgG新疆斯克爾曼氏菌異甘草su961-29-5
亞硝酸還原酶(NiR)測試盒可見分光光度法基質(zhì)金屬蛋白mei抑制因子3(TIMP-3)試劑盒Anti-HOXA10 Antibody血小板反應(yīng)蛋白2/敏感蛋白2
腫瘤相關(guān)抗原(TAA)試劑盒 Anti-HOXA11 Antibody四分子交聯(lián)體17(四旋蛋白)
β2微球蛋白(BMG/β2-MG)試劑盒Anti-HOOK2 Antibody髓系觸發(fā)受體1
血小板因子4(PF4)試劑盒Anti-HOOK3 Antibody緊密連接蛋白2
α谷胱S轉(zhuǎn)移酶(α-GST)試劑盒Anti-HOXA3 Antibody磷酸化埃茲蛋白
色suP450家族成員1A2(CYP1A2)試劑盒 Anti-HOXA4 Antibody單克隆
低分子量角蛋白(CK-LMW)試劑盒Anti-HOXA5 Antibody微管相關(guān)蛋白α6
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