當前位置:上海邦景實業(yè)有限公司>>生化檢測試劑盒>>輔酶Ⅰ系列>> NAD激酶(NADK)測試盒可見分光光度法
貨號 | BJ-016112-2 |
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優(yōu)點如下:
1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。
5、再現性好:變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗: X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復性強。
8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等,效果均佳。
特別提醒:本產品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。
產品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
NAD激酶(NADK)測試盒可見分光光度法 | 可見分光光度法 | 50管/24樣 | BJ-016112-2 |
商品介紹:
測定意義: NADK(EC 2.7.1.23)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,是目前所發(fā)現的生物體內惟一能夠催化NAD+磷酸化生成NADP+的酶,可催化NAD(H)以ATP或無機多聚磷酸[poly(P)]作為磷?;w進行磷酸化反應,生成NADP(H)。因此,NAD激酶在合成NADP(H)以及調節(jié)NAD(H)與NADP(H)的平衡上具有重要作用。 測定原理: NADK催化NAD+磷酸化,生成NADP+;NADP+可被6-磷酸葡萄糖脫氫酶還原為NADPH;NADPH通過PMS的遞氫作用,還原氧化型噻唑藍(MTT),通過在600 nm下測定MTT的還原速度(吸光值的變化)可反映出NADK活性的大小。 需自備的儀器和用品: 可見分光光度計/酶標儀、恒溫水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。 |
測定步驟:
1、 酶標儀預熱30min以上,調節(jié)波長至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內用完)。
5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)充分混勻,室溫靜置30min后,450nm處測定各管吸光值A。
注意事項:
待測樣品-70℃可保存1個月。需注意反復凍融會導致SOD部分失活。
一個試劑盒如果不能在3次內使用完畢,其中的WST-8需要在使用時適當分裝,以避免反復凍融導致的檢測效果下降。
標準品稀釋時所用的稀釋液應盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時,標準品也宜使用SOD樣品制備液進行稀釋;當樣品為血液等無需處理的樣品時,宜使用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液稀釋標準品。
抗氧化物會對本試劑盒的檢測產生干擾,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都會使測定出來的吸光度顯著升高。此時盡管樣品沒有顏色,如果設置了使用說明中的空白對照3,就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。
實驗方法學:
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉動,每隔5~10分鐘轉動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
熱休克蛋白75抗體布魯氏菌 生物Ⅱ型EJ(人膀胱癌)
腫瘤血管內皮標志物8抗體盤長孢狀盤孢U-87 MG(人神經膠質瘤)
四分子交聯(lián)體15抗體(四旋蛋白)副豬嗜血桿菌HKC(人胚腎上皮)
腱調蛋白抗體(軟骨調節(jié)素樣1蛋白)粉紅單端孢霉Hce-8693(人盲腸腺癌(未分化))
血栓素A2受體抗體Oerskovia enterophilaH4-II-E-C3(大鼠肝癌 )
Toll樣受體11抗體意大利酵母RSC96(大鼠雪旺)
血小板反應蛋白抗體布魯氏菌 生物Ⅴ型MS751(人頸表皮癌)
端粒酶相關蛋白2/端粒酶逆轉錄酶抗體金鏈霉菌(生金色鏈霉菌)INS-1(大鼠胰島瘤)
血小板反應蛋白2/酶敏感蛋白2抗體無FO(小鼠骨髓瘤)
四分子交聯(lián)體17抗體(四旋蛋白)圓酵母屬CEM/C1(人急性淋巴白血?。?/span>
髓系觸發(fā)受體1抗體白色彎曲嗜酸菌Beta-TC-6(小鼠胰島素瘤胰島β)
緊密連接蛋白2抗體赤霉屬A7r5(大鼠胸大動脈平滑?。?/span>
磷酸化埃茲蛋白抗體大腸埃希氏菌SW480(人結腸癌)
單克隆抗體枝狀枝孢RKO(人結腸腺癌)
微管相關蛋白α6抗體節(jié)桿菌QGY-7701(人肝癌)
NAD激酶(NADK)測試盒可見分光光度法組織轉谷氨酰酶(TGM2)試劑盒Anti-CFLAR Antibody前列腺特異性G蛋白偶聯(lián)受體/嗅覺受體51E2
表面活性物質關聯(lián)蛋白J(SPJ)試劑盒Anti-CFL2 AntibodyG蛋白偶聯(lián)嘌呤受體p2y11
Smad同源物4 (Smad4/MADH4)試劑盒 Anti-CFP AntibodyG蛋白偶聯(lián)嘌呤受體p2y12
表皮生長因子受體2(EGFR2)試劑盒Anti-CHAT AntibodyG蛋白偶聯(lián)嘌呤受體p2y8
骨骼肌快肌肌鈣蛋白I(TNNI2)試劑盒Anti-CGRPR(CALCRL) AntibodyG蛋白偶聯(lián)嘌呤受體p2y9
肽酰脯氨酰異構酶/親環(huán)素樣蛋白1(PPIL1)試劑盒Anti-CHAT Antibody蛋白氨酸磷酸酶相互作用蛋白51
骨成型蛋白4 (BMP-4)試劑盒 Anti-CHAT Antibody內皮纖溶酶原激活抑制蛋白1
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