當前位置:上海邦景實業(yè)有限公司>>生化檢測試劑盒>>輔酶Ⅰ系列>> NADH氧化酶(NOX)測試盒微量法
貨號 | BJ-016117-1 |
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優(yōu)點如下:
1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗: X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復性強。
8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。
產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
NADH氧化酶(NOX)測試盒微量法 | 微量法 | 100管/96樣 | BJ-016117-1 |
商品介紹:
測定意義: NOX(EC 1.6.99.3)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,可在氧氣存在下,直接將NADH氧化為NAD。該酶不僅參與NAD的再生,而且與免疫反應密切相關。 測定原理: NOX能夠?qū)ADH氧化為NAD,NADH的氧化與2,6二氯酚靛藍(DCPIP)的還原相偶聯(lián),藍色的DCPIP被還原為無色的DCPIP,在600nm下測定藍色DCPIP的還原速率計算出NADH氧化酶活性的大小。 需自備的儀器和用品: 可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰、蒸餾水 |
測定步驟:
1、 酶標儀預熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)充分混勻,室溫靜置30min后,450nm處測定各管吸光值A。
注意事項:
待測樣品-70℃可保存1個月。需注意反復凍融會導致SOD部分失活。
一個試劑盒如果不能在3次內(nèi)使用完畢,其中的WST-8需要在使用時適當分裝,以避免反復凍融導致的檢測效果下降。
標準品稀釋時所用的稀釋液應盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時,標準品也宜使用SOD樣品制備液進行稀釋;當樣品為血液等無需處理的樣品時,宜使用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液稀釋標準品。
抗氧化物會對本試劑盒的檢測產(chǎn)生干擾,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都會使測定出來的吸光度顯著升高。此時盡管樣品沒有顏色,如果設置了使用說明中的空白對照3,就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。
實驗方法學:
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
肽α1抗體膜醭畢赤酵母PA317(小鼠成纖維)
金屬蛋白酶組織抑制因子-4抗體松口蘑Li-7(人肝癌)
金屬蛋白酶組織抑制因子-1抗體(N端)少根根霉HO-8910(人卵巢癌)
金屬蛋白酶組織抑制因子-2抗體歧異假絲酵母HCCC-9810(人肝內(nèi)膽管癌)
甲狀腺素T4抗體香菇F9(小鼠畸胎瘤)
TIGAR蛋白抗體粘金黃桿菌LM/TK(小鼠胸腺激酶缺陷)
CD90抗體金菌Hacat(人永生化角質(zhì)形成)
線粒體DNA拓普西異構(gòu)酶Ⅰ抗體節(jié)桿菌WB-F344(大鼠肝上皮樣干)
突觸融合蛋白結(jié)合蛋白5抗體片球菌屬NRK(大鼠腎)
UNC80蛋白抗體小孢盤多毛孢KLE(人內(nèi)膜癌)
四分子交聯(lián)體4抗體(四旋蛋白)枯草芽孢桿菌OS-RC-2(人腎癌)
轉(zhuǎn)錄因子Tbx18抗體中國考克娃酵母Lncap clone FGC(人前列腺癌)
干燥綜合征相關蛋白2抗體黃曲霉HCT-8(人盲腸腺癌)
甲狀腺激素受體相互作用蛋白4抗體芽胞桿菌EAC(小鼠艾氏腹水癌)
β-taxilin蛋白抗體天白鏈霉菌HCT-15(人結(jié)腸癌)
NADH氧化酶(NOX)測試盒微量法CCAAT增強子結(jié)合蛋白γ(C/EBPγ)試劑盒 Anti-CKAP5 Antibody腫瘤壞死因子受體相關蛋白2
周期素依賴性激酶4(CDK4)試劑盒 Anti-CKB Antibody蛋白酶調(diào)解因子7
熱休克蛋白20(HSPβ6/HSP-20)試劑盒 Anti-Clathrin heavy chain/CLTC Antibody磷酸化增殖核抗原
血管緊張素II受體1(ANGⅡR1-Ab)試劑盒 Anti-CKM Antibody磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1
Nesfatin 1蛋白 (NES1)試劑盒 Anti-Claudin 1/CLDN1 Antibody酮酸脫氫酶E1β亞單位
ras同源物基因家族成員b(RHOB)試劑盒Anti-Claudin 5/CLDN5 Antibody磷酸化酶β
泛素羧基端酯酶L1(UCHL1)試劑盒Anti-Claudin 3/CLDN3 Antibody胰
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