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當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>PCR相關(guān)試劑>>克隆相關(guān)>> Taq DNA連接酶
RTS BL21(DE3)Chaprone助溶表達(dá)感受態(tài)
貨號(hào) | A-PJ1091 | 分類(lèi) | 克隆相關(guān) |
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規(guī)格 | 1000U、10KU | 品牌 | 撫生 |
公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷!
產(chǎn)品介紹:
Taq DNA連接酶
描述:Taq DNA 連接酶是一種熱穩(wěn)定性連接酶,能夠催化 磷酸二酯鍵的形成,使與同一互補(bǔ)靶 DNA 鏈雜交的兩條相 鄰寡核苷酸鏈的 5′-磷酸末端和 3′-羥基末端通過(guò)磷酸二酯 鍵相連。該連接反應(yīng)只有當(dāng)兩條寡核苷酸鏈與互補(bǔ)靶 DNA 配對(duì),并且兩條寡核苷酸鏈之間沒(méi)有空隙的條件下才可 發(fā)生。因此,可以用它來(lái)檢測(cè)單堿基替換。在 45℃-65℃ 范 圍內(nèi),Taq DNA 連接酶均有活性。該酶在 1XHiFi Taq Ligase Buffer 中具有的保真性連接。
組分
應(yīng)用
雙鏈 DNA 切刻的修復(fù)
儲(chǔ)存:-20℃可保存半年,長(zhǎng)期儲(chǔ)存請(qǐng)置于 -70℃。
活性定義:1 單位指 50μl 反應(yīng)體系中,45℃ 條件下,15 分鐘內(nèi)能使 50% 的 1μg 經(jīng) BstEII 消化的 λDNA 片段(12bp 粘性末端)發(fā)生連接所需要的酶量。該酶也可以使用 1×Taq DNA Ligase Buffer20 mM Tris-HCl(pH 7.6),25 mM KAc,10 mM Mg(Ac)2,10 mM DTT,1 mM NAD 和 0.1% Triton X-100,45℃ 溫育。 該酶需 NAD+ 作輔因子,在 10×Taq DNA 連接酶緩沖液中已添加 NAD+;為了延長(zhǎng) NAD+ 的半衰期,緩沖液應(yīng)于 -70℃ 貯存。
使用方法
1、配制如下反應(yīng)體系
DNA up to 1 µg
10×HiFi Taq Ligase Buffer 5 µl
Taq DNA Ligase 2 µl
滅菌水 up to 50 µl
2、45℃孵育 15min。
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