PBCV DNA連接酶-上海撫生實(shí)業(yè)有限公司

貨號(hào)	A-PJ1093	分類	克隆相關(guān)
規(guī)格	1250U、5KU	品牌	撫生

公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷！

產(chǎn)品介紹：

PBCV DNA連接酶描述： PBCV DNA 連接酶也稱為 SplintR 連接酶或 Chorella 病毒 DNA 連接酶，它能夠高效催化相鄰的 DNA 核苷酸的連接，這個(gè)連接過程需要一條互補(bǔ)的 RNA 在兩條 DNA 單鏈間起“夾板"或“橋梁"的固定作用。PBCV DNA 連接酶的這種活性遠(yuǎn)遠(yuǎn)優(yōu)于傳統(tǒng)的 T4 DNA 連接酶，有助于 miRNAs 和 mRNAs，包括 SNPs 在內(nèi)的研究方法的創(chuàng)新。另外，在二代測(cè)序和分子診斷等眾多領(lǐng)域中，PBCV DNA 連接酶是富集目的基因的理想選擇。它具有穩(wěn)定的生物活性，對(duì) RNA 介導(dǎo)固定的 DNA 底物親和性強(qiáng)（米氏常數(shù) Km = 1 nM），能夠在復(fù)雜的混合物中檢測(cè)到亞納摩爾級(jí)的特定 RNA。因此，在 RNA 檢測(cè)技術(shù)中，PBCV DNA 連接酶不失為選擇用酶。
儲(chǔ)存：-20℃可保存 2 年。
10×PBCV Ligase Buffer：500 mM Tris-HCl, pH 7.5, 50 mM

MgCl2, 25 mM DTT, 5 mM ATP.
活性定義：25°C 反應(yīng) 30 分鐘條件下，使 1pmol 的
DNA:RNA 雜交底物連接所需要的酶量定義為 1Unit。
反應(yīng)溫度及失活該酶的最佳反應(yīng)溫度為 25°C，可在 16-37°C 之間優(yōu)化，37℃可明顯提高反應(yīng)的特異性；該酶在 65°C 加熱 20min 即可失活。
使用方法
1. 連接反應(yīng)
連接底物（1 μM） 2 μl
10×PBCV Ligase Buffer 2 μl
PBCV DNA Ligase(25 U/μl) 1 μl
滅菌水 up to 20 μl
25°C 反應(yīng) 15-60min。
2. 65°C 加熱 20min，使酶失活。
注意事項(xiàng)
1.該酶對(duì)一價(jià)陽離子非常敏感，如 NaCl 或 KCl 的濃度應(yīng)低于 50 mM。
2. 該酶的反應(yīng)溫度為16~37°C，最佳溫度為25℃。
3. 連接效率隨著夾板 RNA 長(zhǎng)度的減少而降低，當(dāng)長(zhǎng)度小于等于 10nt 時(shí)，連接效率為零。

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