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貨號 | A-PJ1081 | 分類 | miRNA檢測系列 |
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規(guī)格 | 25T 、100TX20μl | 品牌 | 撫生 |
公司產品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷!
產品介紹:
HG TaqMan miRNA反轉錄試劑盒
描述: TaqMan miRNA 反轉錄試劑盒采用加 A 法進行反轉錄,加 A 法的反轉錄效率遠高于莖環(huán)法,因 此,采用該方法可極大的提高檢測靈敏度(原理見圖 1)。 該試劑盒操作簡單,僅需要兩步即可輕松完成 miRNA 的 cDNA 合成,合成的 cDNA 可用于所有 miRNA 的后續(xù)定 量檢測。反轉錄完畢后采用特異性的上游引物和接頭引物 進行 PCR 擴增,FAM 標記 TaqMan 探針作為熒光報告基 團進行定量檢測(原理見圖 1)。 TaqMan miRNA 反轉錄試劑盒專用于 miRNAs 分子的反轉錄試驗,轉錄獲得的 cDNA 產物用于 TaqMan 定量 PCR 方法檢測 miRNAs 分子
儲存:請置于-20°C,可保存 2 年;避免反復凍融
操作方法
1 按以下組分在 0.2 ml EP 管中配制應液
miRNA (5~100 ng/μl) 4 μl
5×TaqMan miRNA RT Solution A 1 μl
注意:不建議使用 Total RNA,Total RNA 試驗結果通常差
于 miRNA。
2 在 PCR 儀上按以下條件進行加 A 反應:
37°C 30min
85°C 5min
3 反應完畢后,在上述 5μl 反應體系中加入如下試劑,并
混合均勻。
10×TaqMan miRNA RT Primer 2 μl
10×TaqMan miRNA RT Solution B 2 μl
H2O 11 μl
4 在 PCR 儀上按以下條件進行反轉錄反應:
30°C 5min
55°C 60min
95°C 5min
獲得的 cDNA 產物可用于多個目標 miRNA 的檢測。反轉錄完畢后獲得的 miRNA cDNA,可加入 20~80μl ddH20 稀釋2~5 倍,通常取 2μl 即可用于 HG TaqMan miRNA 定量 PCR試劑盒檢測。
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