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細胞凋亡DNA Ladder提取試劑盒(柱式吸附)

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具體成交價以合同協(xié)議為準

產(chǎn)品型號

品       牌其他品牌

廠商性質經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-05-09 09:30:17瀏覽次數(shù):385次

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貨號 FS-X9526
細胞凋亡DNA Ladder提取試劑盒(柱式吸附)公司正在出售的產(chǎn)品:木質素過氧化物酶(LiP)測試盒 規(guī)格:100管/96樣 測試方法:微量法
N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(NAG)測試盒 規(guī)格:50管/24樣 測試方法:可見分光光度法
抗壞血酸(AsA)/維生素含量測試盒 規(guī)格:50管/48樣 測試方法:滴定法
甘油三酯(TG)含量測試盒 規(guī)格:100管/96樣 測試方法:微量法

產(chǎn)品介紹:

本試劑盒是目前先進的DNA Ladder抽提試劑盒之一。本試劑盒是針對細胞凋亡過程中產(chǎn)生的核小體間DNA鏈斷裂而設計的??梢苑浅S行У爻樘嵝∑螢?80-200bp的DNA ladder,同時又可以抽提到大50kb左右的基因組DNA。本試劑盒可以抽提50個樣品。

DNA ladder也稱DNA fragmentation,是細胞凋亡的一個重要指標。通常觀察到DNA ladder,就可以判定細胞發(fā)生了凋亡。

樣品首先被蛋白酶K消化,隨后加入適合DNA結合到純化柱上的緩沖液,然后加入到純化柱內。通過高速離心,使DNA在穿過純化柱的瞬間,結合到純化柱上,隨后通過兩次洗滌去除各種雜質,后通過洗脫液把DNA洗脫下來。整個過程無需酚抽提,無需酒精沉淀,樣品裂解后僅需約15分鐘即可完成。

通過DNA純化柱方式抽提DNA ladder比用傳統(tǒng)的酚抽提酒精沉淀方法更加便捷,小片段DNA不容易損失。試劑盒提供了RNase A,可以獲得不含RNA的高純度總DNA,排除了RNA對DNA ladder觀察造成的干擾。

本試劑盒每次多可以抽提20mg組織或200-350萬個培養(yǎng)細胞。樣品用量過多,反而會影響抽提效果。純化柱對于DNA的大容量約為30微克。通常每200萬Hela細胞或500萬淋巴細胞可以抽提得到15-25微克總DNA,每25mg肝、腦、腎組織可以抽提得到10-30微克總DNA,每25毫克心、肺組織可以抽提得到5-10微克總DNA,每10mg脾組織可以抽提得到5-30微克總DNA。樣品的用量請勿超過純化柱的容量,樣品用量好能保持在純化柱容量的70%或以下。當然過少的樣品也不利于檢測到DNA ladder。

對于培養(yǎng)細胞的凋亡檢測,通常6孔板一個孔的細胞就足夠用于DNA ladder的抽提和檢測。

試劑盒組份:

樣品裂解液A——————10ml

樣品裂解液B——————11ml

洗滌液I——————21ml(第一次使用前加入7ml無水乙醇)

洗滌液II——————16ml (第一次使用前加入24ml無水乙醇)

洗脫液——————22ml

蛋白酶K——————1.1ml

RNase A——————220μl

DNA純化柱及廢液收集管——————50套

儲存條件:室溫,有效期一年。( 蛋白酶K需-20℃保存)

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

英文名稱

產(chǎn)品規(guī)格

產(chǎn)品貨號

細胞凋亡DNA Ladder提取試劑盒(柱式吸附)

DNA Ladder Extraction Kit with Spin Column

50次

FS-X9526


注意事項:

1、本試劑盒僅供科學研究使用,不可用于診斷或治療。

2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。

3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。

4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。

5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。

6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。

8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進行檢測。

9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。

10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可,白細胞需要培養(yǎng)較長時間。

11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應等比例增加即可。

操作步驟:

1、貼壁細胞的消化

①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。

②加入少量Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。

③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變

化;或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的  *細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。

④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。

⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。

2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。

氨酸脫氫酶2(PRODH2)檢測試劑盒  forProlineDehydrogenase2(PRODH2)    

鱷失調蛋白(ATCAY)檢測試劑盒  forCaymanAtaxia(ATCAY)    

基質金屬蛋白酶8(MMP8)檢測試劑盒  forMatrixMetalloproteinase8(MMP8)    

纖維蛋白肽A(FPA)檢測試劑盒  forFibrinopeptideA(FPA)    

纖維蛋白原相關蛋白1(FGL1)檢測試劑盒  forFibrinogenLikeProtein1(FGL1)    

生長分化因子2(GDF2)檢測試劑盒  forGrowthDifferentiationFactor2(GDF2)    

泛醌蛋白4(UBQLN4)檢測試劑盒  forUbiquilin4(UBQLN4)    

蛋白激酶Cε(PKCε)檢測試劑盒  forProteinKinaseCEpsilon(PKCe)    

矢車菊苷β6(CENTβ6)檢測試劑盒  forCentaurinBeta6(CENTb6)    

Calicin蛋白(CCIN)檢測試劑盒  forCalicin(CCIN)    

TGFβ誘導早期應答基因1(TIEG1)檢測試劑盒  forTGFBetaInducibleEarlyResponseGene1(TIEG1)    

組織金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP2)檢測試劑盒  forTissueInhibitorsOfMetalloproteinase2(TIMP2)    

白介素31(IL31)檢測試劑盒  forInterleukin31(IL31)    

線粒體甘油-3-磷酸?;D移酶(GPAM)檢測試劑盒  forGlycerol-3-PhosphateAcyltransferase,Mitochondrial(GPAM)    

甘胺酸-N-甲基轉移酶(GNMT)檢測試劑盒  forGlycine-N-Methyltransferase(GNMT)    

胱天蛋白酶8(P8)檢測試劑盒  forCaspase8(P8)    

和肽素(CPP)檢測試劑盒  forCopeptin(CPP)    
細胞凋亡DNA Ladder提取試劑盒(柱式吸附)來酸溴苯那敏標準品  規(guī)格:125mg  英文名稱:Brompheniramine Maleate

S-腺苷-L-高半氨酸標準品  規(guī)格:50mg  英文名稱:S-Adenosyl-L-Homocysteine

托拉唑相關物質C標準品  規(guī)格:20mg  英文名稱:

戊酸雌二醇標準品  規(guī)格:100mg  英文名稱:Estradiol Valerate

二硫化四乙基秋蘭姆標準品  規(guī)格:200mg  英文名稱:Disulfiram

內酯相關物質A標準品  規(guī)格:100mg  英文名稱:

囊素標準品  規(guī)格:200mg  英文名稱:Allantoin

芐星頭孢匹林標準品  規(guī)格:100mg  英文名稱:Cephapirin Benzathine

蒼白松果菊標準品  規(guī)格:1g  英文名稱:

吡酯標準品  規(guī)格:150mg  英文名稱:Topiramate



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