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活細(xì)胞染色液(Hoechst 33342)(100×)
細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒(WST-1法)
貨號(hào) | FS-X9532 |
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產(chǎn)品介紹:
本試劑盒提供了一種經(jīng)典而又快速簡(jiǎn)便的細(xì)胞凋亡與細(xì)胞壞死檢測(cè)方法。染色快速方便,兩種染料的染色僅需20-30分鐘,一步染色即可完成。使用方便,使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),無需稀釋等配制過程,也無需再準(zhǔn)備其它任何溶液。本試劑盒足夠檢測(cè)100個(gè)樣品,每個(gè)樣品的細(xì)胞數(shù)量可以為10-100萬。 試劑盒組份: 細(xì)胞染色緩沖液———100ml Hoechst染色液———0.5ml PI染色液——————0.5ml 本試劑盒采用Hoechst 33342和碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)雙染的方法。細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí),染色質(zhì)會(huì)固縮。 Hoechst 33342可以穿透細(xì)胞膜,染色后凋亡細(xì)胞熒光會(huì)比正常細(xì)胞明顯增強(qiáng)。碘化丙啶(PI)不能穿透細(xì)胞膜,對(duì)于具有完整細(xì)胞膜的正常細(xì)胞或凋亡細(xì)胞不能染色。而對(duì)于壞死細(xì)胞,其細(xì)胞膜的完整性喪失,碘化丙啶(PI)可以染色壞死細(xì)胞。上述兩種染料雙染后,使用流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡檢測(cè)時(shí),正常細(xì)胞為弱紅色熒光+弱藍(lán)色熒光,凋亡細(xì)胞為弱紅色熒光+強(qiáng)藍(lán)色熒光,壞死細(xì)胞為強(qiáng)紅色熒光+強(qiáng)藍(lán)色熒光。參考下圖,左圖為誘導(dǎo)凋亡前的正常細(xì)胞,右圖為誘導(dǎo)凋亡后的細(xì)胞。 儲(chǔ)存條件:-20℃避光,有效期一年。 |
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品貨號(hào) |
Apoptosis and Necrosis Assay Kit | 100次 | FS-X9532 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
干擾素γ(IFNγ)檢測(cè)試劑盒 forInterferonGamma(IFNg)
蛋白O-巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶2(POFUT2)檢測(cè)試劑盒 forProteinO-Fucosyltransferase2(POFUT2)
核因子κB(NFκB)檢測(cè)試劑盒 forNuclearFactorKappaB(NFkB)
胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白6(IGFBP6)檢測(cè)試劑盒 forInsulinLikeGrowthFactorBindingProtein6(IGFBP6)
金屬硫蛋白1E(MT1E)檢測(cè)試劑盒 forMetallothionein1E(MT1E)
細(xì)胞周期素A1(CCNA1)檢測(cè)試劑盒 forCyclinA1(CCNA1)
蛋白激酶Cη(PKCη)檢測(cè)試劑盒 forProteinKinaseCEta(PKCh)
鈷胺傳遞蛋白Ⅱ(TCN2)檢測(cè)試劑盒 forTranscobalaminII,MacrocyticAnemia(TCN2)
尿酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(URAT1)檢測(cè)試劑盒 forUrateTransporter1(URAT1)
轉(zhuǎn)錄激活因子6(ATF6)檢測(cè)試劑盒 forActivatingTranscriptionFactor6(ATF6)
單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP4)檢測(cè)試劑盒 forMonocyteChemotacticProtein4(MCP4)
巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α(MIP3α)檢測(cè)試劑盒 forMacrophageInflammatoryProtein3Alpha(MIP3a)
FK506結(jié)合蛋白樣蛋白(FKBPL)檢測(cè)試劑盒 forFK506BindingProteinLikeProtein(FKBPL)
環(huán)前列腺素受體(PTGIR)檢測(cè)試劑盒 forProstacyclinReceptor(PTGIR)
N-型電壓依賴鈣離子通道α1B亞基(CACNα1B)檢測(cè)試劑盒 forCalciumChannel,VoltageDependent,N-Type,Alpha1BSubunit(CACNa1B)
八聚體結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子2(OCT2)檢測(cè)試劑盒 forOctamerBindingTranscriptionFactor2(OCT2)
肌球蛋白ⅩⅧA(MYO18A)檢測(cè)試劑盒 forMyosinXVIIIA(MYO18A)
細(xì)胞凋亡與壞死檢測(cè)試劑盒羧甲基淀粉鈉標(biāo)準(zhǔn)品(B型) 規(guī)格:400mg 英文名稱:Sodium Starch Glycolate Type B
霉素-N-氧化物標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:15mg 英文名稱:Azithromycin N-Oxide
鄰苯二甲酸羥丙甲纖維素酯標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:100mg 英文名稱:Hypromellose Phthalate
占噸酮標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:100mg 英文名稱:Xanthone
標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Bicalutamide
鹽酸萊克多巴胺標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Ractopamine Hydrochloride
酮相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:20mg 英文名稱:
提取物標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:500mg 英文名稱:Powdered Andrographis Extract
聚二甲基硅氧烷標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:500mg 英文名稱:Polydimethylsiloxane
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