細(xì)胞凋亡DNA Ladder檢測試劑盒-上海撫生實(shí)業(yè)有限公司

貨號	FS-X9581

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱	英文名稱	產(chǎn)品規(guī)格	產(chǎn)品貨號
細(xì)胞凋亡DNA Ladder檢測試劑盒	Cell Apotosis DNA Ladder Detection Kit	20T\|50T\|100T	FS-X9581

產(chǎn)品介紹：

本試劑盒可應(yīng)用于培養(yǎng)細(xì)胞凋亡檢測（不推薦用于檢測組織樣本）。細(xì)胞核染色質(zhì)DNA 斷裂是細(xì)胞凋亡的標(biāo)志特征。在細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí)，核酸內(nèi)切酶被激活，選擇性降解染色質(zhì)DNA，形成50-300 kb 的大片段，并進(jìn)而在核小體連接處斷裂，形成180-200 bp 或其整倍數(shù)的DNA片段，這些DNA 片段可從細(xì)胞中提取出來，通過瓊脂糖凝膠電泳，溴化乙啶染色呈現(xiàn)為梯狀條帶（DNALadder），并據(jù)此判斷細(xì)胞凋亡產(chǎn)生。我司細(xì)胞凋亡DNA Ladder 檢測試劑盒提供了一種簡便、快速地提取染色質(zhì)DNA 的方法，并增加對小片段DNA 的回收，從而增強(qiáng)了檢測的敏感性。

注意事項(xiàng)

1. DNA Ladder 出現(xiàn)在細(xì)胞凋亡晚期，觀察細(xì)胞形態(tài)已發(fā)生皺縮出芽，染色質(zhì)*凝聚，細(xì)胞核已固縮斷裂的凋亡晚期形態(tài)，建議該種形態(tài)的凋亡細(xì)胞比例在30%以上時(shí)進(jìn)行DNA Ladder 檢測或先進(jìn)行Tunel檢測.

2. DNA Ladder 出現(xiàn)在一個(gè)較短的時(shí)間段，在凋亡早期取樣，則無DNA 降解的條帶，而在凋亡末期取樣則產(chǎn)生與細(xì)胞壞死相似的DNA 彌散條芾。因此取樣時(shí)間需根椐不同種類的細(xì)胞和誘導(dǎo)劑而摸索確定。

3. 貼壁細(xì)胞好不用消化而用細(xì)胞刮收集。

4. 某些細(xì)胞不產(chǎn)生這種核小體間的DNA 斷裂，而是產(chǎn)生50-300kb 的大片段斷裂。

注意事項(xiàng)：

1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用，不可用于診斷或治療。

2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，避免開蓋時(shí)試劑損失。

3、禁止與其他品牌的試劑混用，否則會(huì)影響使用效果。

4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。

5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。

6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

7、需長時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融，否則將會(huì)增加空白吸收，從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。

8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性，則測定不含細(xì)胞，僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小，則可以直接加入 MTS ，如果吸光度相對較大，則需要除去培養(yǎng)基，并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次，然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測。

9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。

10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定，對于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可，白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時(shí)間。

11、如果不是使用 96 孔板檢測，MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。

干擾su調(diào)節(jié)因子(IRF)elisa檢測試劑盒英文名稱：IRF ELISA Kit，IRF，

鈣蛋白mei抑su抗體(AT-DⅣ)elisa檢測試劑盒英文名稱：AT-DⅣ ELISA Kit，AT-DⅣ，

泛su連接mei(E3/UBPL)elisa檢測試劑盒英文名稱：E3/UBPL ELISA Kit，E3/UBPL，

端粒mei逆轉(zhuǎn)錄mei(TERT)elisa檢測試劑盒英文名稱：TERT ELISA Kit，TERT，

蛋白脂質(zhì)蛋白抗體(PLP)elisa檢測試劑盒英文名稱：PLP ELISA Kit，PLP，

(CH)elisa檢測試劑盒英文名稱：CH ELISA Kit，CH，

促分裂su原活化蛋白激mei激活的蛋白激mei3(MAPKAPK3)elisa檢測試劑盒英文名稱：MAPKAPK3 ELISA Kit，MAPKAPK3，

層連蛋白/板層su(LN)elisa檢測試劑盒英文名稱：LN ELISA Kit，LN，

鳥suan結(jié)合蛋白4(Gbp4)elisa檢測試劑盒英文名稱：Gbp4 ELISA Kit，Gbp4，

毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)突變基因(ATM)elisa檢測試劑盒英文名稱：ATM ELISA Kit，ATM，

膜聯(lián)蛋白Ⅶ(ANX-Ⅶ)elisa檢測試劑盒英文名稱：ANX-Ⅶ ELISA Kit，ANX-Ⅶ，

磷suan烯chun式suan羧激mei(PCK)elisa檢測試劑盒英文名稱：PCK ELISA Kit，PCK，

類肌腱蛋白(TN)elisa檢測試劑盒英文名稱：TN ELISA Kit，TN，

可溶性間皮su相關(guān)肽(SMRP)elisa檢測試劑盒英文名稱：SMRP ELISA Kit，SMRP，

人抗載脂蛋白抗體A1(Apo A1)elisa檢測試劑盒英文名稱：Apo A1 ELISA Kit，Apo A1，

人抗腮腺管抗體(anti-parotid duct Ab)elisa檢測試劑盒英文名稱：anti-parotid duct Ab ELISA Kit，anti-parotid duct Ab，

人抗肌聯(lián)蛋白抗體(TTN)elisa檢測試劑盒英文名稱：TTN ELISA Kit，TTN，
細(xì)胞凋亡DNA Ladder檢測試劑盒保泰乙suan酯標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:200mg 英文名稱：Pirbuterol Acetate (AS)

對氨水楊suan標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:125mg 英文名稱：Aminosalicylic Acid

鹽suan萘替芬標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:200mg 英文名稱：Naftifine Hydrochloride

4-氨基-6-(三fujia基)ben-1,3-二磺酰an標(biāo)準(zhǔn)品

規(guī)格:30mg 英文名稱：

2-羥基芐an標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:200mg 英文名稱：Salicylamide

波拉克林鉀標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:200mg 英文名稱：Polacrilin Potassium

卡尼汀相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:100mg 英文名稱：

氫溴suan東莨菪標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:250mg 英文名稱：Scopolamine Hydrobromide

炔諾孕tong標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:125mg 英文名稱：Norgestrel

加拉碘an標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:200mg 英文名稱：Gallamine Triethiodide

操作步驟：

1、貼壁細(xì)胞的消化

①吸除培養(yǎng)液，用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清。

②加入少量Trypsin-EDTA solution，略蓋過細(xì)胞即可，室溫放置 0.5～2min，不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。

③顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變

化；或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來，吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的*細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下細(xì)胞，即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

④如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。

⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長，未及吹打細(xì)胞，細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落，直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000～2000g 離心 1min，沉淀細(xì)胞，盡量去除細(xì)胞消化液后，加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞，即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。