CCK-8細(xì)胞增殖與毒性檢測(cè)試劑盒(WST-8法)-上海撫生實(shí)業(yè)有限公司

貨號(hào)	FS-X9530

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱	英文名稱	產(chǎn)品規(guī)格	產(chǎn)品貨號(hào)
CCK-8細(xì)胞增殖與毒性檢測(cè)試劑盒(WST-8法)	Cell Counting Kit-8	100次\|500次\|2500次\|10000次	FS-X9530

產(chǎn)品介紹：

本試劑盒是一種基于WST-8而廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的快速、高靈敏度檢測(cè)的試劑盒。

WST-8是一種類似于MTT的化合物，在電子耦合試劑存在的情況下，可以被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成橙黃色的formazan(參考下圖)。細(xì)胞增殖越多越快，則顏色越深；細(xì)胞毒性越大，則顏色越淺。對(duì)于同樣的細(xì)胞，顏色的深淺和細(xì)胞數(shù)目呈線性關(guān) 系。

WST-8是MTT的一種升級(jí)替代產(chǎn)品，和MTT或其它MTT類似產(chǎn)品如XTT、MTS等相比有明顯的優(yōu)點(diǎn)。首先，MTT 被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成的formazan不是水溶性的，需要有特定的溶解液來(lái)溶解；而WST-8和XTT、MTS產(chǎn)生的formazan都是水溶性的，可以省去后續(xù)的溶解步驟。其次，WST-8產(chǎn)生的formazan比XTT和MTS產(chǎn)生的formazan更易溶解。再次，WST-8比XTT和MTS更加穩(wěn)定，使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更加穩(wěn) 定。另外，WST-8和MTT、XTT等相比線性范圍更寬，靈敏度更高。

WST-8和WST-1相比，檢測(cè)靈敏度更高，更易溶解，并且更加穩(wěn)定。

本試劑盒可以用于細(xì)胞因子等誘導(dǎo)的細(xì)胞增殖檢測(cè)，也可以用于抗癌藥物等對(duì)細(xì)胞有毒試劑誘導(dǎo)的細(xì)胞毒性檢測(cè)，或一些藥物誘導(dǎo)的細(xì)胞生長(zhǎng)抑制檢測(cè)。

本試劑盒檢測(cè)非常便捷。試劑盒僅一管已經(jīng)配制好的含有WST-8的CCK-8溶液，無(wú)須再進(jìn)行任何配制等操作。無(wú)須使用同位素，所有的檢測(cè)步驟僅在同一塊96孔板內(nèi)完成。不必洗滌細(xì)胞，不必收集細(xì)胞，也不必采用額外的步驟去溶解formazan。可以用于大批量樣品的檢測(cè)。酚紅和血清對(duì)本試劑盒的測(cè)定無(wú)明顯影響。

WST-8對(duì)細(xì)胞無(wú)明顯毒性。加入CCK-8溶液顯色后，可以在不同時(shí)間反復(fù)用酶標(biāo)儀讀板，使檢測(cè)時(shí)間更加靈活，便于找到佳測(cè)定時(shí)間。

注意事項(xiàng)：

1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用，不可用于診斷或治療。

2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。

3、禁止與其他品牌的試劑混用，否則會(huì)影響使用效果。

4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。

5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。

6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融，否則將會(huì)增加空白吸收，從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。

8、用培養(yǎng)基或 PBS 來(lái)配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性，則測(cè)定不含細(xì)胞，僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小，則可以直接加入 MTS ，如果吸光度相對(duì)較大，則需要除去培養(yǎng)基，并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次，然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。

9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。

10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定，對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可，白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。

11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè)，MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。

蛋白酶激活受體1(PAR1)檢測(cè)試劑盒 forProteaseActivatedReceptor1(PAR1)

腺苷脫氨酶(ADA)檢測(cè)試劑盒 forAdenosineDeaminase(ADA)

尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)檢測(cè)試劑盒 forNicotinamideAdenineDinucleotidePhosphateOxidase4(NOX4)

鈣離子轉(zhuǎn)運(yùn)ATP酶A2(ATP2A2)檢測(cè)試劑盒 forATPase,Ca++Transporting,CardiacMuscle,SlowTwitch2(ATP2A2)

Dachsous1蛋白(DCHS1)檢測(cè)試劑盒 forDachsous1(DCHS1)

金屬硫蛋白1L(MT1L)檢測(cè)試劑盒 forMetallothionein1L(MT1L)

小核糖核蛋白多肽D1(SNRPD1)檢測(cè)試劑盒 forSmallNuclearRibonucleoproteinPolypeptideD1(SNRPD1)

內(nèi)分泌腺來(lái)源血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(EG-VEGF)檢測(cè)試劑盒 forEndocrineGlandDerivedVascularEndothelialGrowthFactor(EG-VEGF)

補(bǔ)體受體4(CR4)檢測(cè)試劑盒 forComplementReceptor4(CR4)

AMPA離子能谷氨受體3(GRIA3)檢測(cè)試劑盒 forGlutamateReceptor,Ionotropic,AMPA3(GRIA3)

Toll樣受體2(TLR2)檢測(cè)試劑盒 forTollLikeReceptor2(TLR2)

X-框結(jié)合蛋白1(XBP1)檢測(cè)試劑盒 forX-BoxBindingProtein1(XBP1)

Heterotaxy1蛋白(HTX1)檢測(cè)試劑盒 forHeterotaxy1(HTX1)

Ets變異體3(ETV3)檢測(cè)試劑盒 forEtsVariant3(ETV3)

白細(xì)胞激活黏附因子(ALCAM)檢測(cè)試劑盒 forActivatedLeukocyteCellAdhesionMolecule(ALCAM)

Salusinβ蛋白(Salusinβ)檢測(cè)試劑盒 forSalusinBeta

絲蛋白Bβ(FLNβ)檢測(cè)試劑盒 forFilaminBBeta(FLNb)
CCK-8細(xì)胞增殖與毒性檢測(cè)試劑盒(WST-8法)釓噴酸單葡胺標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:500mg 英文名稱：Gadopentetate Monomeglumine

吩噻嗪標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:500mg 英文名稱：Phenothiazine

依莰舒三乙醇胺標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:200mg 英文名稱：Ecamsule Triethanolamine

依莰舒溶液標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:0．5ml 英文名稱：Ecamsule Solution

丙烯（E）-異構(gòu)體標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:50mg 英文名稱：Cefprozil (E)-Isomer

東莨菪內(nèi)酯標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:20mg 英文名稱：Scopoletin

5-硝基糠醛二乙酸酯標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:100mg 英文名稱：Nitrofurfural Diacetate

二環(huán)己基標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:2ml×2amplues 英文名稱：Dicyclohexyl

沙醇標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:200mg 英文名稱：Iodixanol

毛果蕓香堿標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:300mg 英文名稱：Pilocarpine

操作步驟：

1、貼壁細(xì)胞的消化

①吸除培養(yǎng)液，用無(wú)菌 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清。

②加入少量Trypsin-EDTA solution，略蓋過(guò)細(xì)胞即可，室溫放置 0.5～2min，不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。

③顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變

化；或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái)，吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下細(xì)胞，即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

④如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。

⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，未及吹打細(xì)胞，細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落，直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000～2000g 離心 1min，沉淀細(xì)胞，盡量去除細(xì)胞消化液后，加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞，即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。