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活細(xì)胞染色液(Hoechst 33342)(100×)
細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒(WST-1法)
貨號 | FS-X9670 |
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產(chǎn)品介紹:
本試劑盒為MTT法的替代方法,是一種基于WST(水溶性四唑鹽,化學(xué)名:2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽)的廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒??捎糜谒幬锖Y選、細(xì)胞增殖測定、細(xì)胞毒性測定、腫瘤藥敏等試驗。 使用說明: 一、制作標(biāo)準(zhǔn)曲線(測定細(xì)胞具體數(shù)量時) 1、先用細(xì)胞計數(shù)板計數(shù)所制備的細(xì)胞懸液中的細(xì)胞數(shù)量,然后接種細(xì)胞。 2、按比例依次用培養(yǎng)基等比稀釋成一個細(xì)胞濃度梯度,一般要做3-5個細(xì)胞濃度梯度,每組3-6個復(fù)孔。 3、接種后培養(yǎng)至細(xì)胞貼壁,然后加CCK-8試劑培養(yǎng)一定時間后測定OD 值,制作出一條以細(xì)胞數(shù)量為橫坐標(biāo)(X 軸),OD 值為縱坐標(biāo)(Y 軸)的標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線可以測定出未知樣品的細(xì)胞數(shù)量(試用此標(biāo)準(zhǔn)曲線的前提是實驗的條件要一致,便于確定細(xì)胞的接種數(shù)量以及加入CCK-8后的培養(yǎng)時間。) 二、細(xì)胞活性檢測 1、在96孔板中接種細(xì)胞懸液(100μL/孔)。將培養(yǎng)板放在培養(yǎng)箱中預(yù)培養(yǎng)(在37℃,5% CO2的條件下)。 2、向每孔加入10μL CCK-8溶液(注意不要在孔中生成氣泡,它們會影響OD值的讀數(shù))。 3、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱內(nèi)孵育1-4小時。 4、用酶標(biāo)儀測定在450nm處的吸光度。 5、如果暫時不測定OD值,打算以后測定的話,可以向每孔中加入10μL 0.1M的HCl或者1%SDS(W/V)溶液,并遮蓋培養(yǎng)板避光保存在室溫條件下。在24小時內(nèi)吸光度不會發(fā)生變化。 |
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品貨號 |
Cell counting KIT-8 | 100T|500T|500T*10 | FS-X9670 |
注意事項:
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進行檢測。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實驗情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時間過長,未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
解整合su樣金屬蛋白mei10(ADAM10)elisa檢測試劑盒 英文名稱:ADAM10 ELISA Kit,ADAM10,
jia狀腺激su受體β(THRb)elisa檢測試劑盒 英文名稱:THRb ELISA Kit,THRb,
基質(zhì)金屬蛋白mei抑制因子4(TIMP-4)elisa檢測試劑盒 英文名稱:TIMP-4 ELISA Kit,TIMP-4,
硒結(jié)合蛋白1(SELENBP1)elisa檢測試劑盒 英文名稱:SELENBP1 ELISA Kit,SELENBP1,
鐵蛋白(FE)elisa檢測試劑盒 英文名稱:FE ELISA Kit,F(xiàn)E,
維生suA(VA)elisa檢測試劑盒 英文名稱:VA ELISA Kit,VA,
肽酰脯氨酰異構(gòu)mei(親環(huán)蛋白)樣1(PPIL1)elisa檢測試劑盒 英文名稱:PPIL1 ELISA Kit,PPIL1,
四連接su(CLEC3B)elisa檢測試劑盒 英文名稱:CLEC3B ELISA Kit,CLEC3B,
嗜環(huán)蛋白/親環(huán)suA(CyPA)elisa檢測試劑盒 英文名稱:CyPA ELISA Kit,CyPA,
神經(jīng)調(diào)節(jié)su1亞型HRGβ1(NRG1)elisa檢測試劑盒 英文名稱:NRG1 ELISA Kit,NRG1,
三角形四肽重復(fù)蛋白1(TTC1/TPR1)elisa檢測試劑盒 英文名稱:TTC1/TPR1 ELISA Kit,TTC1/TPR1,
熱休克蛋白20(HSP-20)elisa檢測試劑盒 英文名稱:HSP-20 ELISA Kit,HSP-20,
橋粒芯糖蛋白-1(DGS-E1)elisa檢測試劑盒 英文名稱:DGS-E1 ELISA Kit,DGS-E1,
脯氨suan肽mei(PEPD)elisa檢測試劑盒 英文名稱:PEPD ELISA Kit,PEPD,
70kDa熱休克蛋白5(HSPA5)elisa檢測試劑盒 英文名稱:HSPA5 ELISA Kit,HSPA5,
組蛋白H3.3(H3F3A/H3.3A/H3F3/PP781H3F3B/H3.3B)elisa檢測試劑盒 英文名稱:H3F3A/H3.3A/H3F3/PP781H3F3B/H3.3B ELISA Kit,H3F3A/H3.3A/H3F3/PP781H3F3B/H3.3B,
17-β-羥基類固chun脫氫mei3(HSD17β3)elisa檢測試劑盒 英文名稱:HSD17β3 ELISA Kit,HSD17β3,
CCK-8試劑盒匹那韋標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:350mg 英文名稱:Lopinavir
鹽suan哌zuo嗪標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:500mg 英文名稱:Prazosin Hydrochloride
三氨喋啶相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:50mg 英文名稱:
普拉克索鹽suan鹽標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:
維拉帕mi相關(guān)物質(zhì)D標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:50mg 英文名稱:Verapamil Related Compound D
水楊suan鎂標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Magnesium Salicylate
左沙丁anchun鹽suan鹽相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:30mg 英文名稱:
左沙丁anchun鹽suan鹽相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:20mg 英文名稱:
沙丁anchun相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:25mg 英文名稱:Albuterol Related Compound A
異fu烷相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:0.1ml 英文名稱:
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