當前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>細胞生物學試劑>>細胞凋亡與增殖>> 細胞凋亡檢測試劑盒V(POD)
貨號 | FS-X9663 |
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操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
產品屬性:
產品名稱 | 英文名稱 | 產品規(guī)格 | 產品貨號 |
100T | FS-X9663 |
產品介紹:
保存條件:-20℃冰凍保存一年。 工作原理: 在機體內部隨時都在發(fā)生著細胞的死亡。傳統(tǒng)上用顯微鏡來觀察細胞的死亡,其特征為核染色質的濃縮及碎片的形成。但是這種現(xiàn)象出現(xiàn)的很晚,時間也很短暫。凋亡的特征是內源性核酸內切酶被激活 ,細胞自身的染色質或DNA 被切割,出現(xiàn)單鏈或雙鏈缺口,并產生與 DNA 斷點數目相同的3’-OH 末端。末端脫氧核糖核酸轉移酶(Terminal deoxynucleotidyl Transferase)可以將標記的 dUTP(DIG-dUTP)標記至 3’-OH 末端,DIG-dUTP 結合在 DNA 斷點部位,可以通過生物標記的抗抗體(Anti-DIG-Biotin)反應后,再結合鏈酶親和素-過氧化物酶(SABC),然后加入顯色底物 DAB 予以顯示。凋亡的細包核呈黃色,從而可以在顯微鏡下觀察到著色的凋亡細胞。 試劑盒內容: 1.標記緩沖液(Labeling Buffer)5ml 2.末端脫氧核糖核酸轉移酶(TdT,×20)100μl 3.DIG-dUTP(×20)100μl 4.封閉液(Blocking Reagent)20ml 5.生物su化抗抗體(×100)100μl 6.SABC(×100)100μl 7.Proteinase K(×200)250μl 8.抗體稀釋液 20ml |
注意事項:
1、本試劑盒僅供科學研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進行檢測。
9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定,對于大多數情況孵育 1 小時即可,白細胞需要培養(yǎng)較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應等比例增加即可。
輸入蛋白13(IPO13)檢測試劑盒 forImportin13(IPO13)
基質金屬蛋白mei3(MMP3)檢測試劑盒 forMatrixMetalloproteinase3(MMP3)
尿激mei型纖溶mei原激活因子(uPA)檢測試劑盒 forPlasminogenActivator,Urokinase(uPA)
ATP結合盒轉運蛋白A3(ABCA3)檢測試劑盒 forATPBindingCassetteTransporterA3(ABCA3)
組織蛋白meiW(CTSW)檢測試劑盒 forCathepsinW(CTSW)
白介su1受體拮抗劑(IL1RA)檢測試劑盒 forInterleukin1ReceptorAntagonist(IL1RA)
黏病毒耐藥蛋白1(MX1)檢測試劑盒 forMyxovirusResistance1(MX1)
激肽釋放mei13(KLK13)檢測試劑盒 forKallikrein13(KLK13)
白介su18結合蛋白(IL18BP)檢測試劑盒 forInterleukin18BindingProtein(IL18BP)
肝su結合性表皮生長因子(HBEGF)檢測試劑盒 forHeparinBindingEpidermalGrowthFactorLikeGrowthFactor(HBEGF)
肝脂mei(LIPC)檢測試劑盒 forLipase,Hepatic(LIPC)
S100鈣結合蛋白A4(S100A4)檢測試劑盒 forS100CalciumBindingProteinA4(S100A4)
鹽皮質激su受體(MR)檢測試劑盒 forMineralocorticoidReceptor(MR)
錨定蛋白重復域蛋白1(ANKRD1)檢測試劑盒 forAnkyrinRepeatDomainProtein1(ANKRD1)
胸腺因子(TF)檢測試劑盒 forThymicFactor(TF)
細胞周期suE2(CCNE2)檢測試劑盒 forCyclinE2(CCNE2)
AMPA離子能谷氨suan受體2(GRIA2)檢測試劑盒 forGlutamateReceptor,Ionotropic,AMPA2(GRIA2)
細胞凋亡檢測試劑盒V(POD)阿斯巴甜標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Aspartame
5-氨基-3-羧基-2,4,6-三碘-N-jia基benjia酰an標準品
規(guī)格:50mg 英文名稱:
丙二chun二月桂suan酯標準品 規(guī)格:500mg 英文名稱:Propylene Glycol Dilaurate
碘他拉suan標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Iothalamic Acid
莰烯lv噻嗪標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Cyclothiazide (AS)
凱迪恩標準品 規(guī)格:100mg 英文名稱:KDN
巴lv芬相關物質A標準品 規(guī)格:50mg 英文名稱:Baclofen Related Compound A
二fu尼柳標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Diflunisal
別嘌chun相關物質B標準品 規(guī)格:25mg 英文名稱:
戊suan相關物質A標準品 規(guī)格:50mg 英文名稱:
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