當前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>細胞生物學試劑>>細胞凋亡與增殖>> 細胞凋亡檢測試劑盒IV(CY3)
貨號 | FS-X9661 |
---|
產(chǎn)品介紹:
保存條件:-20℃冰凍保存一年。 工作原理: 在機體內(nèi)部隨時都在發(fā)生著細胞的死亡。傳統(tǒng)上用顯微鏡來觀察細胞的死亡,其特征為核染色質(zhì)的濃縮及碎片的形成。但是這種現(xiàn)象出現(xiàn)的很晚,時間也很短暫。凋亡的特征是內(nèi) 源性核酸內(nèi)切酶被激活,細胞自身的染色質(zhì)或DNA 被切割,出現(xiàn)單鏈或雙鏈缺口,并產(chǎn)生 與 DNA 斷點數(shù)目相同的3’-OH 末端。末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶(Terminal deoxynucleotidyl Transferase)可以將標記的dUTP(DIG-dUTP)標記至 3’-OH 末端,DIG-dUTP 結 合在 DNA 斷點部位,可以通過生物標記的抗抗體(Anti-DIG-Biotin)反應后,再結合 鏈酶親和素-熒光素 CY3(SABC-CY3)。Cy3 在 554nm 激化,在 568-574nm 發(fā)射熒光,呈鮮紅色,從而可以在顯微鏡下觀察到著色的凋亡細胞。 試劑盒內(nèi)容: 1.標記緩沖液(Labeling Buffer)1ml 2.末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶(TdT,×20)20μl 3.DIG-dUTP(×20)20μl 4.封閉液(Blocking Reagent)4ml 5.生物su化抗抗體(× 100)20μl 6.SABC-CY3(× 100)20μl 7.Proteinase K(×200)50μl 8 抗體稀釋液 4ml |
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品貨號 |
20T/100T | FS-X9661 |
注意事項:
1、本試劑盒僅供科學研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進行檢測。
9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可,白細胞需要培養(yǎng)較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應等比例增加即可。
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
肝su結合性表皮生長因子(HBEGF)檢測試劑盒 forHeparinBindingEpidermalGrowthFactorLikeGrowthFactor(HBEGF)
10kDa干擾suγ誘導蛋白(IP10)檢測試劑盒 forInterferonGammaInducedProtein10kDa(IP10)
二酰甘油-O-?;D(zhuǎn)移mei同源物2(DGAT2)檢測試劑盒 forDiacylglycerol-O-AcyltransferaseHomolog2(DGAT2)
高爾基磷蛋白3(GOLPH3)檢測試劑盒 forGolgiPhosphoprotein3(GOLPH3)
Gremlin2蛋白(GREM2)檢測試劑盒 forGremlin2(GREM2)
ⅩⅢA1肽(F13A1)檢測試劑盒 forCoagulationFactorXIIIA1Polypeptide(F13A1)
大型中性氨基suan轉(zhuǎn)運蛋白1(LAT1)檢測試劑盒 forLargeNeutralAminoAcidTransporter1(LAT1)
補體成分5a(C5a)檢測試劑盒 forComplementComponent5a(C5a)
賴氨酰氧化mei樣蛋白2(LOXL2)檢測試劑盒 forLysylOxidaseLikeProtein2(LOXL2)
生長激su(GH)檢測試劑盒 forGrowthHormone(GH)
戊糖su(PTD)檢測試劑盒 forPentosidine(PTD)
輕肽神經(jīng)絲蛋白(NEFL)檢測試劑盒 forNeurofilament,LightPolypeptide(NEFL)
焦磷suanmei2(PPA2)檢測試劑盒 forPyrophosphatase2(PPA2)
B-細胞激活因子受體(BAFFR)檢測試劑盒 forB-CellActivationFactorReceptor(BAFFR)
血清淀粉樣蛋白A(SAA)檢測試劑盒 forSerumAmyloidA(SAA)
白介su8受體α(IL8Rα)檢測試劑盒 forInterleukin8ReceptorAlpha(IL8Ra)
二肽基肽mei8(DPP8)檢測試劑盒 forDipeptidylPeptidase8(DPP8)
細胞凋亡檢測試劑盒IV(CY3)鹽suan阿替卡因標準品 規(guī)格:125mg 英文名稱:Articaine Hydrochloride
芐星鄰lv青霉su標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Cloxacillin Benzathine
多沙zuo嗪相關雜質(zhì)C標準品 規(guī)格:20mg 英文名稱:Doxazosin Related Compound C
克霉zuo標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Clotrimazole
鹽suan柔紅霉su標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Daunorubicin Hydrochloride
鹽suan去乙酰地爾硫卓標準品 規(guī)格:50mg 英文名稱:
乙二an四乙suan鈣二鈉鹽標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Edetate Calcium Disodium
氨芐標準品 規(guī)格:400mg 英文名稱:Cephalexin
差向四環(huán)su標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱:
羅布考標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Probucol
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實性、準確性和合法性由相關企業(yè)負責,儀表網(wǎng)對此不承擔任何保證責任。
溫馨提示:為規(guī)避購買風險,建議您在購買產(chǎn)品前務必確認供應商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。