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貨號(hào)	FS-01S63501

公司產(chǎn)品僅用于科研提供的生化試劑盒，質(zhì)量信得過產(chǎn)品，售后完善。服務(wù)于高校及免疫學(xué)科研單位，竭誠為您提供更周到的服務(wù)更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品。

產(chǎn)品名稱：TPI磷酸丙糖異構(gòu)酶檢測(cè)試劑盒微量法

規(guī)格：100管/96樣

檢測(cè)方法：微量法

貨號(hào)：FS-01S63501
商品介紹：

測(cè)定意義

磷酸丙糖異構(gòu)酶是重要的糖酵解酶，廣泛存在于動(dòng)植物及微生物體內(nèi)，在機(jī)體內(nèi)參與葡萄糖代謝，在糖酵解，糖異生、脂肪酸生物合成及磷酸戊糖代謝中都發(fā)揮著重要作用。

測(cè)定原理

磷酸丙糖異構(gòu)酶將磷酸二羥丙酮轉(zhuǎn)化為3-磷酸甘油醛，3-磷酸甘油醛與NAD在3-磷酸甘油醛脫氫酶的作用下生成3-磷酸甘油酸和NADH，340nm處的吸光度變化反映了磷酸丙糖異構(gòu)酶的活性的高低。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

天平、低溫離心機(jī)、研缽、紫外分光光度計(jì)、1 mL石英比色皿。

試劑的組成和配制：

提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存；

試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；

試劑二：液體 200μL×1 支，4℃保存；

試劑三：液體 4mL×1 瓶，4℃保存；

試劑四：粉劑×2 瓶，4℃保存。
QQ截圖20220307153604.png

粗酶液提?。?/span>

1、細(xì)胞或組織樣品的制備：

培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)胞加入1ml提取液），超聲波破碎細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。

2、血清（漿）樣品：直接檢測(cè)。

操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過高時(shí)，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液（同檢測(cè)A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測(cè)量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后立即進(jìn)行檢測(cè)。

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綿羊保護(hù)(CD59)聯(lián)免疫試劑盒細(xì)交鏈孢霉Mouse α-Glu (Alpha Glucosidase) ELISA Kit

綿羊心鈉肽(ANP)聯(lián)免疫試劑盒拜城擬諾卡氏Mouse α-GST (α-glutathione S-transferases) ELISA Kit

綿羊碳酐IX (CA9)聯(lián)免疫試劑盒蠟樣芽胞桿Mouse IDUA (Alpha-L-iduronidase) ELISA Kit

綿羊金屬硫蛋白2 (MT2)聯(lián)免疫試劑盒長雙歧桿Mouse αNAG (αN-acetylglucosaminidase) ELISA Kit

綿羊肝配蛋白A1 (EFNA1)聯(lián)免疫試劑盒巨大芽孢桿Mouse β Manase (β mannosidase) ELISA Kit

綿羊果糖二磷縮A(ALDOA)聯(lián)免疫試劑盒斑污擬盤多孔孢M(jìn)ouse β2-GP1 IgA/G/M (β2-glycoprotein 1 antibody IgA/G/M) ELISA Kit

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綿羊腺苷環(huán)化3(ADCY3)聯(lián)免疫試劑盒枯草芽孢桿Mouse βGAL (β-Galactosidase) ELISA Kit

綿羊無孢蛋白(ASPN)聯(lián)免疫試劑盒斯達(dá)亨利拿遜酵母Mouse β-Glu (Beta Glucosidase) ELISA Kit

綿羊性/通透性增加蛋白(BPI)聯(lián)免疫試劑盒果生鏈核盤Mouse βGD (β-glucuronidase) ELISA Kit

綿羊趨化樣因子超家族成員4(CKLFSF4)聯(lián)免疫試劑盒擴(kuò)展青霉Mouse β-Hex A (β-hexosaminidase A) ELISA Kit

綿羊視網(wǎng)膜母瘤抑制蛋白(PRB)聯(lián)免疫試劑盒金黃色葡萄球（不提供）Mouse βLI (β-Lactamase inhibitors) ELISA Kit
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