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貨號	FS-01S63495

公司產(chǎn)品僅用于科研提供的生化試劑盒，質(zhì)量信得過產(chǎn)品，售后完善。服務于高校及免疫學科研單位，竭誠為您提供更周到的服務更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品。

產(chǎn)品名稱：GAPDH3磷酸甘油醛脫氫酶檢測試劑盒微量法

規(guī)格：100管/96樣

檢測方法：微量法

貨號：FS-01S63495
商品介紹：

測定意義

GAPDH催化3-磷酸甘油醛氧化生成1,3-二磷酸甘油酸，是糖酵解途徑的關(guān)鍵酶，與糖異生途徑、體內(nèi)血糖濃度的維持和糖尿病的發(fā)生密切相關(guān)，在機體糖、脂、蛋白代謝紊亂疾病中發(fā)揮重要作用。

測定原理

3-磷酸甘油酸激酶催化三磷酸甘油酸和ATP生成1,3二磷酸甘油酸。GAPDH逆向催化1,3二磷酸甘油酸和NADH生成3磷酸甘油醛、無機磷和NAD，340nm處測定NADH的減少量可反映GADPH活性的高低。

需自備的儀器和用品

分光光度計、恒溫水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

試劑的組成和配制：

提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存；

試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；

試劑二：液體 200μL×1 支，4℃保存；

試劑三：液體 4mL×1 瓶，4℃保存；

試劑四：粉劑×2 瓶，4℃保存。
QQ截圖20220307153604.png

粗酶液提?。?/span>

1、細胞或組織樣品的制備：

培養(yǎng)細胞：先收集細胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細胞數(shù)量（104個）：提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細胞加入1ml提取液），超聲波破碎細胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml提取液），進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

2、血清（漿）樣品：直接檢測。

操作步驟:

實驗開始前，各試劑均應平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量，如樣品濃度過高時，應對樣品進行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應的稀釋倍數(shù)。

1. 加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。

2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內(nèi)配制），酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。

3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4. 每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。

5. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應，此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。

8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后立即進行檢測。

綿羊唾液淀粉α1(AMY1)試劑盒 Anti-FOXI1 Antibody白介10（白介-10）(抗原)

綿羊白介13(IL-13)試劑盒Anti-FOXH1 Antibody白介8（白介-8）(抗原)

綿羊核糖核III(RNASEN)試劑盒 Anti-FOXJ1 Antibody胰島受體（抗原）

綿羊血管緊張II受體1抗體(ANGⅡR1-Ab)試劑盒 Anti-FOXJ3 Antibody整合-α（抗原）

綿羊激肽原1(KNG1)試劑盒 Anti-FOXK1 Antibody低密度脂蛋白受體(抗原)

綿羊死亡相關(guān)蛋白6(DAP6)試劑盒Anti-FOXN4 Antibody腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因（抗原)

綿羊心肌營養(yǎng)1(CT-1)試劑盒 Anti-FPR1 Antibody蛇蛋白

綿羊腺苷三磷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體G1(ABCG1)試劑盒 Anti-FRA2 Antibody蛇蛋白

綿羊BCL2修飾因子(BMF)試劑盒Anti-FOXR1 Antibody瘦（抗原)

綿羊性神經(jīng)鞘磷脂(ASM)試劑盒 Anti-FRK Antibody瘦受體（抗原）

綿羊N端外顯肽(Ext-N)試劑盒Anti-FSHB AntibodyLpin1 protein(抗原)

綿羊球蛋白E Fc段受體II(FcεR II)試劑盒 Anti-FRS3 Antibody蚯蚓纖溶(蚓激抗原)

綿羊髓系觸發(fā)受體-1(TREM-1)試劑盒Anti-FUBP3 Antibody一種新的凋亡抑制蛋白(抗原)

綿羊孕烷受體(PXR)試劑盒Anti-FYB1 Antibody絲裂原活化蛋白激p38(抗原)

綿羊膽調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白(SREBP)試劑盒Anti-FUT3 Antibody擬南介金屬離子轉(zhuǎn)運蛋白(抗原)
GAPDH3磷酸甘油醛脫氫酶檢測試劑盒微量法信號轉(zhuǎn)導和轉(zhuǎn)錄激活因子5(STAT5)抗原Anti-EIF3D Antibody猴腸三葉肽因子3（TFF3）elisa定量檢測試劑盒

信號轉(zhuǎn)導和轉(zhuǎn)錄激活因子6抗原Anti-EIF2B3 Antibody猴碳酐II（CA2）elisa定量檢測試劑盒

雌硫轉(zhuǎn)移抗原Anti-EIF2S1 Antibody猴破骨激因子1 （OSF）elisa定量檢測試劑盒

類泛蛋白Anti-EIF3D Antibody猴I型前膠原羧基端原肽（PICP）elisa定量檢測試劑盒

磷化微管相關(guān)蛋白多肽Anti-EIF3E Antibody兔色C（Cyt-C）elisa定量檢測試劑盒

微管相關(guān)蛋白2抗原Anti-EIF3F Antibody猴干因子（SCF）elisa定量檢測試劑盒

微管相關(guān)蛋白1A抗原Anti-EIF3J Antibody猴角質(zhì)轉(zhuǎn)谷酰（TGM1）elisa定量檢測試劑盒

新型抑癌基因(多肽)Anti-EIF3K Antibody猴色酰tRNA合成（WARS）elisa定量檢測試劑盒