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貨號	FS-X9659

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱	英文名稱	產(chǎn)品規(guī)格	產(chǎn)品貨號
臺盼藍染色法細胞活力檢測試劑盒	Typan Blue Staining Cell Viability Assay Kit	100T	FS-X9659

產(chǎn)品介紹：

本試劑盒各組分均以無菌形式提供，可直接用于細胞實驗。臺盼藍（Trypan Blue），一種偶氮、親水性酸性藍色染料，可透過死亡細胞和垂死細胞的細胞膜，將其染成藍色，而活細胞由于其細胞膜的完整性，可將臺盼藍排斥在外，因此，通過顏色的變化即可將活細胞（活細胞呈透明無色）和死細胞鑒別開來，基于此原理，本品廣泛用于細胞活性水平的常規(guī)評估。臺盼藍還可染色膠原和淀粉樣蛋白。臺盼藍與蛋白結(jié)合形成的復(fù)合物可發(fā)出紅色熒光。另外，臺盼藍（合適濃度）還常用來淬滅細胞表面的自熒光或者其他熒光信號。

使用方法

1）對于懸浮細胞，離心收集細胞，對其充分清洗后，加入適量細胞重懸液重懸細胞制成單細胞懸液；對于貼壁細胞，先用消化細胞，再按照懸浮細胞的方法制備單細胞懸液。

2）取0.1ml單細胞懸液，按照1:1比例與0.1ml 0.4%臺盼藍染色液充分混勻，室溫染色3~10min。

【注】：因臺盼藍具有細胞毒性，染色時間過久會導(dǎo)致部分死細胞染色，干擾計數(shù)。通常染色3min即可。

3）取少量上述染色細胞加入血細胞計數(shù)板，于顯微鏡低倍鏡下計數(shù)，分別計算著色細胞（即損傷細胞和死細胞）和總細胞。

【注1】：用移液槍加染色細胞時，沿著蓋玻片的邊緣輕輕加液使其*覆蓋住整個小室。不可過量加液或者不足量。

【注2】：1mm2方格內(nèi)細胞數(shù)通?？刂圃?0-50 cells，當(dāng)細胞數(shù)超過200個，需重新調(diào)整稀釋倍數(shù)。

4）按照以下公式來計算細胞數(shù)目和活細胞百分比，

a，計算每ml細胞數(shù)目：Cells/ml=1mm2大方格內(nèi)的平均細胞數(shù)×稀釋倍數(shù)×104；【注】：此時的稀釋倍數(shù)為：步驟2所取的單細胞懸液與臺盼藍染色液混合后的稀釋倍數(shù)

b，總細胞數(shù)目：Total cells=（Cells/ml）×初制備單細胞懸液的總體積

c，細胞活力值：Viability（%）=（總細胞數(shù)-總著色細胞數(shù)）/總細胞數(shù)×100

【注】：通常情況，健康的對數(shù)期培養(yǎng)細胞，活細胞至少占到95%。

儲存條件：室溫，有效期2年

注意事項：

1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用，不可用于診斷或治療。

2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，避免開蓋時試劑損失。

3、禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。

4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。

5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。

6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融，否則將會增加空白吸收，從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。

8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性，則測定不含細胞，僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小，則可以直接加入 MTS ，如果吸光度相對較大，則需要除去培養(yǎng)基，并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細胞兩次，然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進行檢測。

9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。

10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定，對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可，白細胞需要培養(yǎng)較長時間。

11、如果不是使用 96 孔板檢測，MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。

細胞周期suK(CCNK)檢測試劑盒 forCyclinK(CCNK)

分泌粒蛋白Ⅱ(SCG2)檢測試劑盒 forSecretograninII(SCG2)

生長調(diào)節(jié)致癌基因β(GROβ)檢測試劑盒 forGrowthRegulatedOncogeneBeta(GROb)

輸出蛋白7(XPO7)檢測試劑盒 forExportin7(XPO7)

糖蛋白130(gp130)檢測試劑盒 forGlucoprotein130(gp130)

V-Fos-FBJ骨肉瘤病毒癌基因同源物(FOS)檢測試劑盒 forV-FosFBJMurineOsteosarcomaViralOncogeneHomolog(FOS)

白介su17(IL17)檢測試劑盒 forInterleukin17(IL17)

失調(diào)蛋白3(ATXN3)檢測試劑盒 forAtaxin3(ATXN3)

半胱氨suan蛋白mei抑制劑6(CST6)檢測試劑盒 forCystatin6(CST6)

腫瘤壞死因子配體超家族成員9(TNFSF9)檢測試劑盒 forTumorNecrosisFactorLigandSuperfamily,Member9(TNFSF9)

IgE-Fc受體Ⅰ(FcεRⅠ)檢測試劑盒 forReceptorIForTheFcRegionOfImmunoglobulinE(FceRI)

平滑肌肌動蛋白α2(ACTα2)檢測試劑盒 forActinAlpha2,SmoothMuscle(ACTa2)

惡性腦腫瘤缺失蛋白1(DMBT1)檢測試劑盒 forDeletedInMalignantBrainTumors1(DMBT1)

淀粉樣蛋白β1-42(Aβ1-42)檢測試劑盒 forAmyloidBetaPeptide1-42(Ab1-42)

基質(zhì)金屬蛋白mei3(MMP3)檢測試劑盒 forMatrixMetalloproteinase3(MMP3)

己糖激mei2(HK2)檢測試劑盒 forHexokinase2(HK2)

層粘連蛋白β4(LAMβ4)檢測試劑盒 forLamininBeta4(LAMb4)
臺盼藍染色法細胞活力檢測試劑盒克拉曲濱相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:20mg 英文名稱：Cladribine Related Compound A

克林霉su磷suan酯標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:250mg 英文名稱：Clindamycin Phosphate

西替利嗪相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:20mg 英文名稱：

美昔康相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:25mg 英文名稱：

山梨suan鉀標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:1g 英文名稱：Potassium Sorbate (AS)

羅布考相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:25mg 英文名稱：

周效磺an標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:200mg 英文名稱：Sulfadoxine

jia酚曲zuo標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:25mg 英文名稱：Drometrizole

鹽suan強力霉su標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:200mg 英文名稱：Doxycycline Hyclate

L-巖藻糖標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:200mg 英文名稱：L-Fucose (AS)

操作步驟：

1、貼壁細胞的消化

①吸除培養(yǎng)液，用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次，以去除殘余的血清。

②加入少量Trypsin-EDTA solution，略蓋過細胞即可，室溫放置 0.5～2min，不同的細胞消化時間有所不同。

③顯微鏡下觀察，細胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變

化；或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來，吸除細胞消化液。加入含血清的*細胞培養(yǎng)液，吹打下細胞，即可直接用于后續(xù)實驗。

④如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。

⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長，未及吹打細胞，細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落，直接用細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000～2000g 離心 1min，沉淀細胞，盡量去除細胞消化液后，加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞，即可用于后續(xù)實驗。

2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。