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當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞凋亡與增殖>> MTT(噻唑蘭)
活細(xì)胞染色液(Hoechst 33342)(100×)
細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒(WST-1法)
貨號(hào) | FS-X9654 |
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產(chǎn)品介紹:
噻唑蘭(Methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide, MTT),也稱作溴化噻唑藍(lán)四氮唑,是一種黃色染料,已經(jīng)普遍替代傳統(tǒng)的臺(tái)盼藍(lán)染色法或者放射性同位素插入法,用來檢測(cè)細(xì)胞的活力,細(xì)胞增殖以及細(xì)胞毒性分析。檢測(cè)原理在于:MTT是一種可接受氫離子的化合物染料,帶正電荷,具有細(xì)胞膜滲透性?;罴?xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能夠?qū)⑼庠催M(jìn)入的MTT還原成為水不溶性的深藍(lán)色MTT-甲臜結(jié)晶,而死細(xì)胞不具有此功能。甲臜結(jié)晶是不能穿透細(xì)胞膜,因此沉積在處于增殖且未受損傷的細(xì)胞內(nèi)。甲臜結(jié)晶可用DMSO或者酸化的異丙醇溶解出來,酶標(biāo)儀下測(cè)定570 nm的吸光度反映甲臜的生成量。而甲臜的生成量與活細(xì)胞數(shù)目成正比,用以評(píng)估細(xì)胞存活狀況。 MTT也可用作免疫組化/細(xì)胞化學(xué)染色試劑,也可用來檢測(cè)NAD。MTT被快速還原成甲臜后,能夠螯合鎳,銅和鈷。鈷螯合物可參與機(jī)體氧化系統(tǒng)。 :298-93-1 分子式:C18H16N5SBr 外觀:淡黃色至橙色粉末 分子量:414.3 純度:≥98% 熔點(diǎn):187℃ 溶解性:溶于水,甲醇 儲(chǔ)存條件:4℃ |
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品貨號(hào) |
MTT | 250mg | FS-X9654 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長,未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
5'-AMP活化蛋白激meiα-2催化亞基(PRKAA2)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱:PRKAA2 ELISA Kit,PRKAA2,
脂氧合mei同工mei1(LOX-1)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱:LOX-1 ELISA Kit,LOX-1,
巨嗜細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱:MCP-1/CCL2/MCAF ELISA Kit,MCP-1/CCL2/MCAF,
白細(xì)胞介su16(IL-16)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱:IL-16 ELISA Kit,IL-16,
組蛋白脫乙?;?/span>mei9(HDAC9)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱:HDAC9 ELISA Kit,HDAC9,
轉(zhuǎn)錄銜接因子1(TADA1)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱:TADA1 ELISA Kit,TADA1,
周期su依賴性激mei6(CDK6)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱:CDK6 ELISA Kit,CDK6,
脂質(zhì)運(yùn)載蛋白12(LCN12)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱:LCN12 ELISA Kit,LCN12,
鈣黏蛋白19(CDH19)檢測(cè)試劑盒 forCadherin19(CDH19)
多功能肽mei2(LMP2)檢測(cè)試劑盒 forLargeMultifunctionalPeptidase2(LMP2)
組蛋白H4(H4)檢測(cè)試劑盒 forHistoneH4(H4)
E選擇su(SELE)檢測(cè)試劑盒 forSelectin,Endothelium(SELE)
沉默調(diào)節(jié)蛋白5(SIRT5)檢測(cè)試劑盒 forSirtuin5(SIRT5)
肉毒棕櫚酰基轉(zhuǎn)移mei1A(CPT1A)檢測(cè)試劑盒 forCarnitinePalmitoyltransferase1A,Liver(CPT1A)
紅細(xì)胞生成su(EPO)檢測(cè)試劑盒 forErythropoietin(EPO)
肝腎骨性磷suanmei(ALPL)檢測(cè)試劑盒 forAlkalinePhosphatase,Liver/Bone/Kidney(ALPL)
脂聯(lián)su受體1(ADIPOR1)檢測(cè)試劑盒 forAdiponectinReceptor1(ADIPOR1)
MTT(噻唑蘭)對(duì)乙酰酚相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:15mg 英文名稱:
辛基三嗪tong相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:20mg 英文名稱:
普生鈉標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Naproxen Sodium
酒石suan莫侖太爾標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:100mg 英文名稱:Morantel Tartrate
zuo林鈉標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:400mg 英文名稱:Cefazolin
標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Gemfibrozil
鹽suan異丙腎上腺su標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:250mg 英文名稱:Isoetharine Hydrochloride
西平相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:50mg 英文名稱:
賽庚啶相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:40mg 英文名稱:
聚對(duì)ben二jiasuan乙二酯G標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:3 strips 英文名稱:
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