PK丙酮酸激酶檢測試劑盒微量法-上海撫生實業(yè)有限公司

貨號	FS-01S63489

商品介紹：

測定意義

PK（EC 2.7.1.40）廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中，催化糖酵解過程中的最后一步反應，是糖酵解過程中的主要限速酶之一，也是產(chǎn)生ATP的關(guān)鍵酶之一，因此測定PK活性具有重要意義。

測定原理

PK催化磷酸烯醇式丙酮酸和ADP生成ATP和丙酮酸，乳酸脫氫酶進一步催化NADH和丙酮酸生成乳酸和NAD+，在340nm下測定NADH下降速率，即可反映PK活性。

需自備的儀器和用品

紫外分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水

試劑的組成和配制：

提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存；

試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；

試劑二：液體 200μL×1 支，4℃保存；

試劑三：液體 4mL×1 瓶，4℃保存；

試劑四：粉劑×2 瓶，4℃保存。

公司產(chǎn)品僅用于科研提供的生化試劑盒，質(zhì)量信得過產(chǎn)品，售后完善。服務于高校及免疫學科研單位，竭誠為您提供更周到的服務更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品。

產(chǎn)品名稱：PK丙酮酸激酶檢測試劑盒微量法

規(guī)格：100管/96樣

檢測方法：微量法

貨號：FS-01S63489
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操作步驟:

實驗開始前，各試劑均應平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量，如樣品濃度過高時，應對樣品進行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應的稀釋倍數(shù)。

1. 加樣：分別設(shè)空白孔、標準孔、待測樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。

2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內(nèi)配制），酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。

3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4. 每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。

5. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應，此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。

8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后立即進行檢測。

粗酶液提?。?/span>

1、細胞或組織樣品的制備：

培養(yǎng)細胞：先收集細胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細胞數(shù)量（104個）：提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細胞加入1ml提取液），超聲波破碎細胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml提取液），進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

2、血清（漿）樣品：直接檢測。

綿羊組織多肽抗原(TPA)聯(lián)免疫試劑盒筑波擬酵母Mouse TRF (Transferrin) ELISA Kit

綿羊二氫硫辛轉(zhuǎn)乙酰(DLAT)聯(lián)免疫試劑盒膠孢Mouse TFR2 (Transferrin Receptor Protein 2) ELISA Kit

綿羊C型凝集結(jié)構(gòu)域家族2成員C(CLEC2C)聯(lián)免疫試劑盒弗雷德里克斯堡假單胞Mouse TFR (Transferrin Receptor) ELISA Kit

綿羊核孔蛋白35kda(NUP35)聯(lián)免疫試劑盒微小鏈霉Mouse TGFbI (Transforming Growth Factor Beta Induced) ELISA Kit

綿羊煙酰腺二核苷磷氧化5(NOX5)聯(lián)免疫試劑盒彩色豆馬勃Mouse TGF-α (Transforming Growth Factor α) ELISA Kit

綿羊T急性母白血病相關(guān)抗原(TALLA-1/CD231)聯(lián)免疫試劑盒擴展青霉Mouse TGFb2 (Transforming Growth Factor Beta 2) ELISA Kit

綿羊胰蛋白原II(Try2)聯(lián)免疫試劑盒巴斯德畢赤酵母Mouse TGF-β3 (Transforming Growth Factor β3) ELISA Kit

綿羊上皮型鈣粘蛋白 (E-Cad)聯(lián)免疫試劑盒蘇云金芽孢桿庫爾斯塔克亞種Mouse TGF-β4 (Transforming Growth Factor β4) ELISA Kit

綿羊谷脫羧1(GAD1)聯(lián)免疫試劑盒斑污擬盤多孔孢Mouse TG (Transglutaminase) ELISA Kit

綿羊促睡眠肽α(δSIP-α)聯(lián)免疫試劑盒灰平鏈霉Mouse TMED1 (Transmembrane Emp24 Domain Containing Protein 1) ELISA Kit

綿羊β淀粉樣前體蛋白(βAPP)聯(lián)免疫試劑盒釀酒酵母Mouse TNPO1 (Transportin 1) ELISA Kit

綿羊腦多巴神經(jīng)營養(yǎng)因子(CDNF)聯(lián)免疫試劑盒淡紫擬青霉Mouse TTR (Transthyretin) ELISA Kit

綿羊胰腺再生蛋白1α(REG1α)聯(lián)免疫試劑盒費比恩畢赤酵母Mouse TFF2 (Trefoil Factor 2) ELISA Kit

綿羊VIII型膠原α1(COL8α1)聯(lián)免疫試劑盒匍匐曲霉Mouse TFF3 (Trefoil Factor 3, Intestinal) ELISA Kit

綿羊踝蛋白(TLN)聯(lián)免疫試劑盒Rhodobacter vinaykumariiMouse TNNI3/cTn-I (Troponin I Type 3, Cardiac) ELISA Kit
PK丙酮酸激酶檢測試劑盒微量法錫 AR,99.5%甲中氯代類混合標樣氯代類:氯、1, 2－二氯、1, 4－二Anti-Bcl-10/CLAP/FITC 熒光標記兔抗人、大、小鼠Bcl-10抗體IgG

錫 AR,100目一氯二溴標準溶液分析標準品,溶劑:甲Anti-Bcl-10(phospho Ser218)/FITC 熒光標記兔抗人、大、小鼠磷化Bcl-10抗體IgG

錫 SP氯代類：氯、1,2－二氯、1,3－二氯、1,4－二氯、1,2,4Anti-Bcr/CD3D/FITC 熒光標記兔抗人、大、小鼠T受體抗體IgG

錫 99.99% metals basis鄰二甲二甲酯標準溶液 1000μg/ml，溶劑：甲Anti-Phospho-Bcr(p-Tyr177)/FITC 熒光標記兔抗人、大、小鼠磷化T受體抗體IgG

高純錫 99.999% metals basis，1-6mm，顆粒鄰二甲二甲酯標準溶液5000μg/ml，溶劑：甲Anti-BCRP/ABCG2/BXP-21 /FITC 熒光標記三磷腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運蛋白G超家族成員2抗體IgG

錫 99.9999%鄰二甲二丁酯標準溶液200μg/ml，溶劑：甲Anti-Bdkrb2/B2R/FITC 熒光標記緩激肽B2受體抗體IgG

錫 99.99999%2,6-二甲標準溶液 1000μg/ml，溶劑：甲Anti-BDNF/FITC 熒光標記BDNF蛋白抗體IgG

1,1,2-三氯乙烷 99%對二氯標準溶液 1000μg/ml,溶劑：甲Anti-BECN1/FITC 熒光標記一種抑癌基因抗體IgG