Caspase 8熒光法檢測試劑盒(AFC)-上海撫生實(shí)業(yè)有限公司

貨號	FS-X9575

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱	英文名稱	產(chǎn)品規(guī)格	產(chǎn)品貨號
Caspase 8熒光法檢測試劑盒(AFC)	Caspase-8 Fluorescence Metric Assay	20T\|50T\|100T	FS-X9575

產(chǎn)品介紹：

本試劑盒適用于培養(yǎng)細(xì)胞及新鮮組織Caspase-8 檢測。Caspase 家族在介導(dǎo)細(xì)胞凋亡的過程中起著非常重要的作用，其中Caspase-8 為關(guān)鍵的執(zhí)行分子，與DNA 斷裂、染色質(zhì)凝聚和凋亡小體形成有關(guān)。Caspase-8 在正常狀態(tài)下以酶原的形式存在于胞漿中，沒有活性；但在細(xì)胞發(fā)生凋亡階段，它被激活，活化的Caspase-8 由兩個(gè)大亞基和兩個(gè)小亞基組成，裂解相應(yīng)的胞漿胞核底物，終導(dǎo)致細(xì)胞凋亡。Caspase-8 熒光檢測試劑盒就是將Caspase-8 序列特異性的多肽偶聯(lián)至發(fā)色基團(tuán)。當(dāng)?shù)孜锉籆aspase-8 剪切后，發(fā)色基團(tuán)即游離出來，可通過熒光酶標(biāo)儀測定其熒光強(qiáng)度（激發(fā)波長=485nm,發(fā)射波長=535nm）。

注意事項(xiàng)

1. Caspase-8 Substrate 避光保存及使用。

2. 對某些凋亡誘導(dǎo)劑引起的細(xì)胞凋亡可能存在非依賴于Caspase-8 活化的機(jī)制，這種情況時(shí)利用本試劑盒檢測Caspase-8 活性無明顯改變，需要考慮凋亡機(jī)制中的其他信號通路。

3. 細(xì)胞數(shù)量需達(dá)到3~5×106 個(gè)或新鮮組織50~100mg，以便能達(dá)到測定需要的100~200μg 蛋白的要求，因?yàn)镃aspase-8 的活性與細(xì)胞裂解液的蛋白含量有關(guān)，如測定的RFU 值偏低，可以通過適當(dāng)延長反應(yīng)的時(shí)間，如果值還是不高，可通過增加細(xì)胞數(shù)量或組織量的方法來提高蛋白量。

注意事項(xiàng)：

1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用，不可用于診斷或治療。

2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，避免開蓋時(shí)試劑損失。

3、禁止與其他品牌的試劑混用，否則會(huì)影響使用效果。

4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。

5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。

6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

7、需長時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融，否則將會(huì)增加空白吸收，從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。

8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性，則測定不含細(xì)胞，僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小，則可以直接加入 MTS ，如果吸光度相對較大，則需要除去培養(yǎng)基，并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次，然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測。

9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。

10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定，對于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可，白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時(shí)間。

11、如果不是使用 96 孔板檢測，MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。

突觸融合蛋白7(STX7)檢測試劑盒 forSyntaxin7(STX7)

維生suD3(VD3)檢測試劑盒 forVitaminD3(VD3)

β-骨膠原交聯(lián)(βCTx)檢測試劑盒 forBeta-Crosslaps(bCTx)

間隙連接蛋白43(CX43)檢測試劑盒 forConnexin43(CX43)

波形蛋白(VIM)檢測試劑盒 forVimentin(VIM)

彈性蛋白mei3A(ELA3A)檢測試劑盒 forElastase3A(ELA3A)

地塞mi松誘導(dǎo)蛋白(DEXI)檢測試劑盒 forDexamethasoneInducedProtein(DEXI)

嗜suan性粒細(xì)胞過氧化物mei(EPX)檢測試劑盒 forEosinophilPeroxidase(EPX)

微管蛋白α8(TUBα8)檢測試劑盒 forTubulinAlpha8(TUBa8)

肌球蛋白重鏈8(MYH8)檢測試劑盒 forMyosinHeavyChain8,SkeletalMuscle,Perinatal(MYH8)

小乳表皮粘蛋白(SBEM)檢測試劑盒 forSmallBreastEpithelialMucin(SBEM)

奇異不良su(DYSF)檢測試劑盒 forDysferlin(DYSF)

胰島su樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP3)檢測試劑盒 forInsulinLikeGrowthFactorBindingProtein3(IGFBP3)

硬纖毛蛋白(STRC)檢測試劑盒 forStereocilin(STRC)

核連蛋白1(NUCB1)檢測試劑盒 forNucleobindin1(NUCB1)

Toll樣受體9(TLR9)檢測試劑盒 forTollLikeReceptor9(TLR9)

生長分化因子15(GDF15)檢測試劑盒 forGrowthDifferentiationFactor15(GDF15)
Caspase 8熒光法檢測試劑盒(AFC)舒巴坦suan標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:250mg 英文名稱：

磺an嘧啶標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:200mg 英文名稱：Sulfadiazine

zuo尼沙an標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:200mg 英文名稱：Zonisamide

炔諾tong標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:200mg 英文名稱：Norethindrone

ben妥英相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:50mg 英文名稱：

fu哌啶chun相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:10mg 英文名稱：Haloperidol Related Compound A

維生suD3標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:30mg×5ampules 英文名稱：Cholecalciferol (Vitamin D3)

雙氫速甾chun標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:30mg×4amplues 英文名稱：Dihydrotachysterol

鹽suan雙環(huán)維林標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:125mg 英文名稱：Dicyclomine Hydrochloride

曲康zuo標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:200mg 英文名稱：Terconazole

操作步驟：

1、貼壁細(xì)胞的消化

①吸除培養(yǎng)液，用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清。

②加入少量Trypsin-EDTA solution，略蓋過細(xì)胞即可，室溫放置 0.5～2min，不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。

③顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變

化；或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來，吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的*細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下細(xì)胞，即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

④如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。

⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長，未及吹打細(xì)胞，細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落，直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000～2000g 離心 1min，沉淀細(xì)胞，盡量去除細(xì)胞消化液后，加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞，即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。