當(dāng)前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>細胞生物學(xué)試劑>>細胞凋亡與增殖>> 吖啶橙-EB雙染色試劑盒
貨號 | FS-X9680 |
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產(chǎn)品介紹:
橙能透過胞膜完整的細胞,嵌入細胞核DNA,與雙鏈DNA結(jié)合后發(fā)出綠色熒光,溴化乙錠(EB)僅能透過胞膜受損的細胞,嵌入核DNA,發(fā)橘紅色熒光。凋亡的細胞呈現(xiàn)為染色增強,熒光更為明亮,均勻一致的圓狀或固縮狀、團塊狀結(jié)構(gòu)。非凋亡細胞核呈現(xiàn)熒光深淺不一的結(jié)構(gòu)樣特征。二者很容易判別。在熒光顯微鏡下觀察,可見四種細胞形態(tài):活細胞(VN),核染色質(zhì)著綠色并呈正常結(jié)構(gòu);早期凋亡細胞(VA),核染色質(zhì)著綠色呈固縮狀或圓珠狀;晚期凋亡細胞(NVA),核染色質(zhì)為橘紅色并呈固縮狀或圓珠狀;非凋亡的死亡細胞(NVN),核染色質(zhì)著橘紅色并呈正常結(jié)構(gòu)。本產(chǎn)品AO、EB溶液濃度分別為100ug/ml,所含穩(wěn)定劑不影響實驗效果。 使用方法:(僅供參考) 使用前先根據(jù)用量,將AO溶液和EB溶液按1:1混合成工作液,先用現(xiàn)配。 對于貼壁細胞或爬片,去掉培養(yǎng)基,用PBS洗兩遍去除殘余培養(yǎng)基和未貼壁細胞,加入新的PBS;如果需要觀察全部細胞特性,保留未貼壁細胞,可以直接在培養(yǎng)基中加入工作液。按照每毫升培養(yǎng)基或PBS中加入20ul工作液即可。室溫放置2-5min后于熒光顯微鏡下觀察。 對于懸浮細胞,可直接加入工作液或離心收集細胞后在PBS中加入工作液。按照每毫升培養(yǎng)基或PBS中加入20ul工作液即可。室溫放置2-5min后于熒光顯微鏡下觀察。 注意事項: 含酚紅培養(yǎng)基對觀察有輕微影響。建議使用無酚紅培養(yǎng)基。 染色液工作濃度和染色時間可根據(jù)具體實驗情況適當(dāng)調(diào)整,以期達到佳效果。 儲存條件:4℃避光密封保存,有效期一年 |
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品貨號 |
Acridine Orange(AO)/EB Double Stain Kit | 50ml*2|250ml*2 | FS-X9680 |
注意事項:
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進行檢測。
9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可,白細胞需要培養(yǎng)較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
血管生長(ANG)英文名:ANG AIMP2抗體包裝25g
血管生成樣蛋白4(ANGPTL4)英文名:ANGPTL4 乙??贵w包裝5g
血管生成Ⅱ(ANGⅡ)英文名:ANGⅡ 5-基乙酰合1抗體包裝10g
血管生成4(ANG-4)英文名:ANG-4 防御α1/3抗體包裝50g
血管生成2(ANG-2)英文名:ANG-2 ABC膜轉(zhuǎn)運蛋白抗體包裝1g
血管生成1(ANG-1)英文名:ANG-1 植物延長蛋白(擬南芥)包裝5g
血管內(nèi)皮細胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)英文名:VCAM-1/CD106 A-Raf抗體包裝1g
血管內(nèi)皮細胞生長因子受體-3(VEGFR-3/Flt-4)英文名:VEGFR-3/Flt-4 磷化A-Raf抗體包裝1g
血管內(nèi)皮細胞生長因子受體3(VEGFR-3/Flt-4)英文名:VEGFR-3/Flt-4 紅腺苷脫3抗體包裝5g
血管內(nèi)皮細胞生長因子受體2(VEGFR-2/Flk-1)英文名:VEGFR-2/Flk-1 雄激結(jié)合蛋白抗體包裝10g
血管內(nèi)皮細胞生長因子受體1(VEGFR-1/Flt1)英文名:VEGFR-1/Flt1 肝再生增強因子抗體包裝50g
血管內(nèi)皮細胞生長因子D(VEGF-D)英文名:VEGF-D APP/ABPP淀粉樣肽前體蛋白抗體包裝25g
血管內(nèi)皮細胞生長因子C(VEGF-C)英文名:VEGF-C 胎蛋白單克抗體(包被)包裝5g
血管內(nèi)皮細胞生長因子B(VEGF-B)英文名:VEGF-B 胎蛋白單克抗體(檢測)包裝1g
血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)英文名:VEGF ADP核糖基化因子結(jié)合蛋白1抗體包裝250mg
粘附分子IgG樣結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體白介4(IL4)KU-55933 (ATM Kinase Inhibitor) is a potent and specific ATM inhibitor with IC50
吖啶橙-EB雙染色試劑盒梨形卷枝霉 N-Boc-4-甲酸乙酯IκB激-α
假絲酵母屬 4-溴-2-氟三氟甲苯IκB激-β
鼠李糖小短桿 N,N,N-基乙二I型膠原蛋白
釀酒酵母 2-溴-4-氟甲苯I型膠原羥基端肽β降解產(chǎn)物
分枝桿 3,5-二叔丁基-4-羥基I型原膠原N端前肽
蒙古口蘑 2,5-二氟-4-硝苯Jo1抗體;抗組氨酰tRNA合成抗體
產(chǎn)氣莢膜梭 C型 3,6-二噠KIT Ligand
鏈霉 馬來酸二乙酯Klotho蛋白
凍土毛霉 丁二酸二丁酯Klotho蛋白
樟疫霉 1-甲基-4-氟-1,4-二氮雜雙環(huán)[2.2.2]辛烷二(四氟酸)鹽L1粘附分子
印度芽孢桿 對苯乙Laminin-5;Epiligrin
釀酒酵母 醋硝唑L-
斑玉蕈 乙酸-4-酚酯L-乳酸
木蹄層孔 乙酰酮氧鈦(IV)L選擇
枯草芽孢桿枯草亞種 4-氟-3-酸Mac-2結(jié)合蛋白
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