細(xì)胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V-FITC/PI)-上海撫生實業(yè)有限公司

貨號	FS-X9620

產(chǎn)品介紹：

Annexin V-FITC/PI細(xì)胞凋亡檢測試劑盒是用FITC標(biāo)記了的Annexin V作為探針，來檢測細(xì)胞早期凋亡的發(fā)生，可用熒光顯微鏡、流式細(xì)胞儀或其他熒光檢測設(shè)備進(jìn)行檢測。

其檢測原理為：在正常的活細(xì)胞中，磷脂酰絲氨suan（phosphotidylserine，PS）位于細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè)，但在早期凋亡的細(xì)胞中，PS 從細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè)翻轉(zhuǎn)到細(xì)胞膜的表面，暴露在細(xì)胞外環(huán)境中。Annexin-Ⅴ（膜聯(lián)蛋白-V）是一種分子量為35-36KD的Ca2+ 依賴性磷脂結(jié)合蛋白，能與PS高親和力結(jié)合。可通過細(xì)胞外側(cè)暴露的磷脂酰絲氨suan與凋亡早期細(xì)胞的胞膜結(jié)合。

另外，本試劑盒中還提供了碘化丙啶（Propidium Iodide，PI）用來區(qū)分存活的早期細(xì)胞和壞死或晚期凋亡細(xì)胞。PI是一種核酸染料，它不能透過正常細(xì)胞或早期凋亡細(xì)胞的完整的細(xì)胞膜，但可以透過凋亡晚期和壞死細(xì)胞的細(xì)胞膜而使細(xì)胞核染紅。因此，將Annexin V與PI聯(lián)合使用時，PI 則被排除在活細(xì)胞（Annexin V-/PI-）和早期凋亡細(xì)胞（Annexin V+/PI-）之外，而晚期凋亡細(xì)胞和壞死細(xì)胞同時被FITC 和PI 結(jié)合染色呈現(xiàn)雙陽性（Annexin V+/PI+）。

儲存條件：4℃，有效期一年。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱	英文名稱	產(chǎn)品規(guī)格	產(chǎn)品貨號
細(xì)胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V-FITC/PI)	Annexin V-FITC/PI Apoptosis Detection Kit	20 rxn	FS-X9620

注意事項：

1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用，不可用于診斷或治療。

2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，避免開蓋時試劑損失。

3、禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。

4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。

5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。

6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融，否則將會增加空白吸收，從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。

8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性，則測定不含細(xì)胞，僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小，則可以直接加入 MTS ，如果吸光度相對較大，則需要除去培養(yǎng)基，并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次，然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測。

9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。

10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實驗情況而定，對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可，白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時間。

11、如果不是使用 96 孔板檢測，MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。

操作步驟：

1、貼壁細(xì)胞的消化

①吸除培養(yǎng)液，用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清。

②加入少量Trypsin-EDTA solution，略蓋過細(xì)胞即可，室溫放置 0.5～2min，不同的細(xì)胞消化時間有所不同。

③顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變

化；或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來，吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下細(xì)胞，即可直接用于后續(xù)實驗。

④如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。

⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時間過長，未及吹打細(xì)胞，細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落，直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000～2000g 離心 1min，沉淀細(xì)胞，盡量去除細(xì)胞消化液后，加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞，即可用于后續(xù)實驗。

2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。

微粒體S轉(zhuǎn)移mei2(MGST2)檢測試劑盒 forMicrosomalGlutathioneSTransferase2(MGST2)

Slit同源物3(Slit3)檢測試劑盒 forSlitHomolog3(Slit3)

腱蛋白(CHRD)檢測試劑盒 forChordin(CHRD)

腱蛋白樣蛋白2(CHRDL2)檢測試劑盒 forChordinLikeProtein2(CHRDL2)

補體因子H相關(guān)蛋白3(CFHR3)檢測試劑盒 forComplementFactorHRelatedProtein3(CFHR3)

Intersectin1蛋白(ITSN1)檢測試劑盒 forIntersectin1(ITSN1)

周期su依賴性激mei8(CDK8)檢測試劑盒 forCyclinDependentKinase8(CDK8)

激肽釋放mei4(KLK4)檢測試劑盒 forKallikrein4(KLK4)

鈣/鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激meiⅡα(CAMK2α)檢測試劑盒 forCalcium/CalmodulinDependentProteinKinaseIIAlpha(CAMK2a)

心鈉肽(ANP)檢測試劑盒 forAtrialNatriureticPeptide(ANP)

孤兒su磷suanmei1(PHOSPHO1)檢測試劑盒 forPhosphatase,Orphan1(PHOSPHO1)

精氨?；D(zhuǎn)移mei1(ATE1)檢測試劑盒 forArginyltransferase1(ATE1)

纖溶mei原(Plg)檢測試劑盒 forPlasminogen(Plg)

基質(zhì)金屬蛋白mei8(MMP8)檢測試劑盒 forMatrixMetalloproteinase8(MMP8)

端粒重復(fù)結(jié)合因子2相互作用蛋白(TERF2IP)檢測試劑盒 forTelomericRepeatBindingFactor2InteractingProtein(TERF2IP)

熱休克轉(zhuǎn)錄因子4(HSF4)檢測試劑盒 forHeatShockTranscriptionFactor4(HSF4)

轉(zhuǎn)化生長因子β3(TGFβ3)檢測試劑盒 forTransformingGrowthFactorBeta3(TGFb3)
細(xì)胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V-FITC/PI)卡維地相關(guān)物質(zhì)D標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:15mg 英文名稱：

炔諾tong醋suan酯標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:100mg 英文名稱：Norethindrone Acetate

卡巴標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:200mg 英文名稱：Carbachol

鹽suan卡替爾標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:200mg 英文名稱：Carteolol Hydrochloride

鹽suanjiafu喹標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:100mg 英文名稱：Mefloquine Hydrochloride

番瀉標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:500mg 英文名稱：Sennosides

異翅果定標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:20mg 英文名稱：Isopteropodine

氫溴suan后馬托品標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:200mg 英文名稱：Homatropine Hydrobromide

丙基硫氧嘧啶標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:200mg 英文名稱：Propylthiouracil

左旋jia狀腺su標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:500mg 英文名稱：Levothyroxine