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當前位置：上海撫生實業(yè)有限公司>>細胞生物學試劑>>細胞凋亡與增殖>> Calcein-AM/PI活細胞/死細胞雙染試劑盒
| 貨號 | FS-X9650 |
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產(chǎn)品介紹：
Calcein-AM是一種對活細胞進行熒光標記的細胞染色試劑，發(fā)綠色熒光（Ex=490nm, Em=515nm）。因其在傳統(tǒng)的Calcein（鈣黃綠素）基礎上引入乙酰甲氧基甲酯（AM）基團，增加了疏水性，使其能夠輕易穿透活細胞膜。一旦進入細胞后，Calcein-AM（本身不發(fā)熒光）被細胞內(nèi)的酯酶剪切形成膜非滲透性的極性分子Calcein，從而被滯留在細胞內(nèi)并發(fā)出強綠色熒光。與其它同類試劑（如BCECF-AM和CFDA)相比，由于Calcein, AM細胞毒性極低，是適合用于活細胞染色的熒光探針，而且不會抑制任何的細胞功能，如增殖和淋巴球的趨化性。 由于死細胞缺乏酯酶，Calcein-AM僅用于對活細胞的細胞生存能力測試和短期標記。因此，Calcein-AM常常與死細胞熒光探針如碘化丙啶（PI）等聯(lián)合使用，同時進行活細胞和死細胞的熒光雙重染色。碘化丙啶（Propidium iodide，PI）不能穿過活細胞的細胞膜，僅能穿過死細胞膜的無序區(qū)域而到達細胞核，并嵌入細胞的DNA雙螺旋從而產(chǎn)生紅色熒光（Ex=535 nm, Em=617 nm），因此PI僅對死細胞染色。由于Calcein和PI-DNA都可被490 nm激發(fā)，因此可用熒光顯微鏡同時觀察活細胞和死細胞。而用545 nm激發(fā)，僅可觀察到死細胞。 本試劑盒的工作原理就在于Calcein-AM和PI的雙重染料，來進行活細胞和死細胞的雙重染色標記，從而進行活細胞和死細胞水平的分析。根據(jù)我司優(yōu)化的實驗體系，單次就200μl細胞懸液進行染色。 注意事項 1）由于Calcein-AM對濕度非常敏感，若是Calcein-AM溶液每次取完需要量后，必須緊緊密封蓋子。建議根據(jù)單次用量，分裝密封保存。Calcein-AM工作液必須現(xiàn)配現(xiàn)用。 2）碘化丙啶（PI）有一定的致癌性，操作時一定要注意防護。若接觸到皮膚，需要立即用自來水清洗。 3）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。 儲存條件：-20℃，有效期12個月 |
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品貨號 |
Calcein-AM/PI Double Stain Kit | 500T | FS-X9650 |
注意事項：
1、本試劑盒僅供科學研究使用，不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復凍融，否則將會增加空白吸收，從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性，則測定不含細胞，僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小，則可以直接加入 MTS ，如果吸光度相對較大，則需要除去培養(yǎng)基，并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細胞兩次，然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進行檢測。
9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定，對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可，白細胞需要培養(yǎng)較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測，MTS 溶液的用量相應等比例增加即可。
操作步驟：
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yǎng)液，用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次，以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution，略蓋過細胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化；或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來，吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養(yǎng)液，吹打下細胞，即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長，未及吹打細胞，細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落， 直接用細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000～2000g 離心 1min，沉淀細胞，盡量去除細胞消化液后，加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞，即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。
丙氨suan/絲氨suan/半胱氨suan/蘇氨suan轉(zhuǎn)運蛋白(ASCT1)elisa檢測試劑盒 英文名稱：ASCT1 ELISA Kit，ASCT1，
布皮質(zhì)su4(BEST4)elisa檢測試劑盒 英文名稱：BEST4 ELISA Kit，BEST4，
胞漿磷蛋白1(STMN1)elisa檢測試劑盒 英文名稱：STMN1 ELISA Kit，STMN1，
半胱氨suan蛋白mei抑制劑4(CST4)elisa檢測試劑盒 英文名稱：CST4 ELISA Kit，CST4，
白介su26(IL26)elisa檢測試劑盒 英文名稱：IL26 ELISA Kit，IL26，
白介su11(IL11)elisa檢測試劑盒 英文名稱：IL11 ELISA Kit，IL11，
γ-谷氨酰基轉(zhuǎn)氨mei5(γGT5)elisa檢測試劑盒 英文名稱：γGT5 ELISA Kit，γGT5，
X-轉(zhuǎn)運蛋白2(Xtrp2)elisa檢測試劑盒 英文名稱：Xtrp2 ELISA Kit，Xtrp2，
T-框蛋白3(TBX3)elisa檢測試劑盒 英文名稱：TBX3 ELISA Kit，TBX3，
S抗原(SAG)elisa檢測試劑盒 英文名稱：SAG ELISA Kit，SAG，
骨成型蛋白3(BMP3)elisa檢測試劑盒 英文名稱：BMP3 ELISA Kit，BMP3，
干擾suα5(IFNα5)elisa檢測試劑盒 英文名稱：IFNα5 ELISA Kit，IFNα5，
孤兒su磷suanmei1(PHOSPHO1)elisa檢測試劑盒 英文名稱：PHOSPHO1 ELISA Kit，PHOSPHO1，
甘露糖受體C2(MRC2)elisa檢測試劑盒 英文名稱：MRC2 ELISA Kit，MRC2，
鈣黏蛋白20(CDH20)elisa檢測試劑盒 英文名稱：CDH20 ELISA Kit，CDH20，
封閉蛋白3(CLDN3)elisa檢測試劑盒 英文名稱：CLDN3 ELISA Kit，CLDN3，
分層蛋白(SFN)elisa檢測試劑盒 英文名稱：SFN ELISA Kit，SFN，
Calcein-AM/PI活細胞/死細胞雙染試劑盒美侖孕tong醋suan酯標準品 規(guī)格:125mg 英文名稱：Melengestrol Acetate
美托爾相關物質(zhì)C標準品 規(guī)格:20mg 英文名稱：
阿替爾標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱：Atenolol
鹽suan胍法辛標準品 規(guī)格:125mg 英文名稱：Guanfacine Hydrochloride
標準品 規(guī)格:100mg 英文名稱：Guanine
美比達標準品 規(guī)格:125mg 英文名稱：Glipizide
葡庚糖suan鈣標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱：Calcium Gluceptate
阿普zuo侖標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱：Alprazolam CIV
貓爪草提取物標準品 規(guī)格:cards 英文名稱：Powdered Cat’s Claw Extract
阿普zuo侖相關物質(zhì)A標準品 規(guī)格:30mg 英文名稱：Alprazolam Related Compound A
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