當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞凋亡與增殖>> WST-1細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒
活細(xì)胞染色液(Hoechst 33342)(100×)
細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒(WST-1法)
貨號 | FS-X9708 |
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產(chǎn)品介紹:
WST-1 是廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑。WST-1 是一種類似于MTT的化合物,在電子耦合試劑存在的情況下,可以被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成橙黃色的formazan。細(xì)胞增殖越多越快,則顏色越深;細(xì)胞毒性越大,則顏色越淺。WST-1是MTT的一種升級替代產(chǎn)品,和MTT或其它MTT 類似產(chǎn)品如XTT、MTS等相比有明顯的優(yōu)點(diǎn)。 首先,MTT被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成的formazan 不是水溶性的,需要有特定的溶解液來溶解;而WST-1和XTT、MTS產(chǎn)生的formazan 都是水溶性的,可以省去后續(xù)的溶解步驟。其次,WST-1產(chǎn)生的formazan 比XTT和MTS產(chǎn)生的formazan 更易溶解。再次,WST-1比XTT和MTS 更加穩(wěn)定,使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更加穩(wěn)定。另外,WST-1和MTT、XTT等相比,線性范圍更寬,靈敏度更高??梢杂糜诩?xì)胞因子等誘導(dǎo)的細(xì)胞增殖檢測,也可以用于抗癌藥物等對細(xì)胞有毒試劑誘導(dǎo)的細(xì)胞毒性檢測,或一些藥物誘導(dǎo)的細(xì)胞生長抑制檢測等。WST-1 使用時無須同位素,所有的檢測步驟僅在同一塊96孔板內(nèi)完成。不必洗滌細(xì)胞,不必收集細(xì)胞,也不必采用額外步驟去溶解formazan。WST-1對細(xì)胞無明顯毒性。加入WST-1 顯色后,可以在不同時間反復(fù)用酶標(biāo)儀讀板,使檢測時間更加靈活,便于找到佳測定時間。 儲存條件:2-8℃避光保存。 注意: 1.WST-1短期存放于2-8℃,長期存放請分裝后-20℃避光保存。 2.避免反復(fù)凍融。 3.凍存后溶解時注意重新混勻。 有效期:一年。 |
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品貨號 |
250T|500T|1000T | FS-X9708 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時間過長,未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
極低密度脂蛋白受體(VLDLR)英文名:VLDLR 錨蛋白重復(fù)域5抗體包裝1g
極低密度脂蛋白(VLDL)英文名:VLDL 腦鈉通道蛋白2抗體包裝25g
基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)英文名:SDF-1β/CXCL12 腦鈉通道蛋白4抗體包裝5g
基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1α(SDF-1α/SDF1A)英文名:SDF-1α/SDF1A 小腸鈉通道蛋白5抗體包裝100g
基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)英文名:SDF-1a/CXCL12 APXL蛋白抗體包裝25g
基質(zhì)金屬蛋白抑制因子4(TIMP-4)英文名:TIMP-4 敏感離子通道蛋白3抗體包裝5g
基質(zhì)金屬蛋白抑制因子3(TIMP-3)英文名:TIMP-3 天門冬β羥化抗體包裝1g
基質(zhì)金屬蛋白抑制因子2(TIMP-2)英文名:TIMP-2 精加壓受體2抗體包裝250mg
基質(zhì)金屬蛋白抑制因子1(TIMP-1)英文名:TIMP-1 骨架肌動蛋白樣蛋白3抗體包裝5g
基質(zhì)金屬蛋白9/明膠B(MMP-9/Gelatinase B)英文名:MMP-9/Gelatinase B 膜粘連蛋白8抗體包裝100g
基質(zhì)金屬蛋白9(MMP-9)英文名:MMP-9 通道蛋白8抗體包裝25g
基質(zhì)金屬蛋白8/中性粒細(xì)胞膠原(MMP-8)英文名:MMP-8 錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白40抗體包裝500g
基質(zhì)金屬蛋白7(MMP-7)英文名:MMP-7 凋亡抑制因子5抗體包裝100g
基質(zhì)金屬蛋白5(MMP-5)英文名:MMP-5 通道蛋白-3抗體包裝25g
基質(zhì)金屬蛋白4(MMP-4)英文名:MMP-4 載脂蛋白D抗體包裝1g
磷化蛋白激B抗體抵抗(RETN)AMD 3465 hexahydrobromide (GENZ-644494 hexahydrobromide) 是一種有效的 CXCR4 拮抗劑,在 SupT
WST-1細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒黑曲霉 3,5-二噠肺耐藥蛋白
蘋果黑腐皮殼 2,3-二氟苯乙酮肺特異性X蛋白
茄鏈格孢 2,3-二氟苯甲酰分泌成分
根瘤 2,3-二氟甲酯分泌型卷曲相關(guān)蛋白5
三葉草根瘤 4--2-氟-5-硝苯分泌型磷脂A2
平菇 N-Boc-3-乙酸分泌型球蛋白A
大腸埃希氏 3,4-二(2-甲氧基乙氧基)酚氧化
雞傷寒沙門氏 2-氨基苯并噻唑-6-甲酸鹽酸鹽粉塵螨特異性IgE抗體
貝葉多孔 N-乙基烯封閉蛋白1
樟疫霉 N-Boc-3-氮雜環(huán)丁烷乙酸封閉蛋白2
鏈格孢 N-Boc-3-氮雜環(huán)丁烷乙酸封閉抗體
白色鏈霉白色亞種 2-氨基-4-溴-6-氟父系表達(dá)基因10
陰溝腸桿 5-(噻吩-2-基)-1H-吡唑-3-羧酸附睪蛋白4
小孢根霉少孢變種 3-溴咪唑并[1,2-b]噠附睪分泌蛋白4
碳纖維單胞 Fmoc-Asp(EDANS)-OtBu富含半胱蛋白61
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