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當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞凋亡與增殖>> AO-EB雙染色試劑盒
活細(xì)胞染色液(Hoechst 33342)(100×)
細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒(WST-1法)
貨號(hào) | FS-X9741 |
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操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長,未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品貨號(hào) |
Acridine Orange(AO)/EB Double Stain Kit | 50ml*2|250ml*2 | FS-X9741 |
產(chǎn)品介紹:
橙能透過胞膜完整的細(xì)胞,嵌入細(xì)胞核DNA,與雙鏈DNA結(jié)合后發(fā)出綠色熒光,溴化乙錠(EB)僅能透過胞膜受損的細(xì)胞,嵌入核DNA,發(fā)橘紅色熒光。二者很容易判別。在熒光顯微鏡下觀察,可見四種細(xì)胞形態(tài):活細(xì)胞(VN),核染色質(zhì)著綠色并呈正常結(jié)構(gòu);早期凋亡細(xì)胞(VA),核染色質(zhì)著綠色呈固縮狀或圓珠狀;晚期凋亡細(xì)胞(NVA),核染色質(zhì)為橘紅色并呈固縮狀或圓珠狀;非凋亡的死亡細(xì)胞(NVN),核染色質(zhì)著橘紅色并呈正常結(jié)構(gòu)。本產(chǎn)品AO、EB 溶液濃度分別為100ug/ml,所含穩(wěn)定劑不影響實(shí)驗(yàn)效果。 使用方法:(僅供參考) 1、使用前先根據(jù)用量,將AO溶液和EB溶液按1:1混合成工作液,現(xiàn)用現(xiàn)配。 2.1、對(duì)于貼壁細(xì)胞或爬片,去掉培養(yǎng)基,用 PBS 洗兩遍去除殘余培養(yǎng)基和未貼壁細(xì)胞,加入新的 PBS;如果需要觀察全部細(xì)胞特性,保留未貼壁細(xì)胞,可以直接在培養(yǎng)基中加入工作液。按照每毫升培養(yǎng)基或 PBS 中加入 20ul 工作液即可。室溫放置 2-5min 后,用 PBS 洗 2 次,除去殘余的熒光染料。加入新的 PBS 或培養(yǎng)基于熒光顯微鏡下觀察即可。 2.2、對(duì)于懸浮細(xì)胞,可直接加入工作液或離心收集細(xì)胞后在 PBS 中加入工作液。按照每毫升培養(yǎng)基或 PBS 中加入 20ul 工作液即可。室溫放置 2-5min 后,離心去除工作液,后用 PBS 洗 2 次,除去殘余的熒光染料。加入新的 PBS 或培養(yǎng)基于熒光顯微鏡下觀察即可。 3、建議用藍(lán)光激發(fā),視野下可以觀察到死細(xì)胞呈現(xiàn)紅色,活細(xì)胞呈現(xiàn)綠色。 保存:4℃避光密封保存,有效期一年。 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)英文名:GDNF Bcl-2結(jié)合抑凋亡蛋白2抗體包裝250mg
脂氧合同工1(LOX-1)英文名:LOX-1 β淀粉樣肽1-42抗體包裝1g
脂聯(lián)(human adiponectin)英文名:human adiponectin 磷化內(nèi)收蛋白抗體包裝5g
脂聯(lián)(Adiponectin/Acrp30)英文名:Adiponectin/Acrp30 程序性死亡配體1抗體包裝250mg
脂聯(lián)(Adiponectin,Acrp30)英文名:Adiponectin,Acrp30 程序性死亡配體1抗體包裝1g
脂聯(lián)(Adiponectin)英文名:Adiponectin β淀粉樣肽(1-42)抗體包裝5g
脂肪合成(FAS)英文名:FAS β淀粉樣肽(1-42)單克抗體包裝100g
胰島樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)英文名:IGFBP-3 膽汁鹽輸出泵/ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白11抗體包裝25g
血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子-1(PECAM-1/CD31)英文名:PECAM-1/CD31 BSPRY蛋白抗體包裝5g
血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(PECAM1)英文名:PECAM1 BAIAP2L2蛋白抗體包裝50mg
血小板/內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子-1(PECAM-1/CD31)英文名:PECAM-1/CD31 磷化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體包裝5MG
血小板/內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(PECAM1)英文名:PECAM1 磷化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體包裝25g
胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子(TARC/CCL17)英文名:TARC/CCL17 人β亞基人絨毛膜促性腺激(β HCG)抗體包裝5g
胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子(TAFA/CCL17)英文名:TAFA/CCL17 鈣激活通道蛋白 α 1抗體包裝5ml
纖維連接蛋白(FN)英文名:FN 鈣激活通道蛋白 α 1抗體包裝25g
凋亡增強(qiáng)核抗體干擾α4(IFNα4)Entospletinib (GS-9973) is an orally bioavailable, selective Syk inhibitor with
AO-EB雙染色試劑盒金黃殼囊孢 2,7-二溴-9,9-二癸基芴球蛋白G2a
斑玉蕈 N-芴甲氧羰基-D-2-氨基丁酸球蛋白G2b
金針菇(毛柄、冬菇) 4'--2'-氟苯乙酮球蛋白G3
大腸埃希 2,5-二甲球蛋白G4
藍(lán)色犁頭霉 2-溴-1-(2-吡啶基)-1-乙酮 氫球蛋白M
葡萄座腔 4--2,6-二氟苯甲球蛋白κ自由輕鏈
金耳、 黃木耳 氮雜環(huán)丁烷-3-酮鹽酸鹽球蛋白λ自由輕鏈
皮特遜畢赤酵母 3-氟-4-球蛋白結(jié)合蛋白
黃單胞 1-溴-3,5-二氟-2-苯球蛋白輕鏈kappa抗體
假絲酵母屬 1-(二氟甲基)-2-氟苯球蛋白輕鏈lambda
大腸埃希 酮縮氨基硫脲抑制性糖蛋白
突孢毛殼 1H-吲唑-6-羧酸甲酯繆勒管抑制物質(zhì);抗繆勒管
棲葡萄青霉 4--7-甲基噻吩并[3,2-D]嘧啶膜聯(lián)蛋白-A1
沙福芽胞桿 4-環(huán)戊酮-1,2-二甲酸膜聯(lián)蛋白-A2
東方伊薩酵母 3--4-氟苯肼鹽酸鹽末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9
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