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當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞凋亡與增殖>> 活細(xì)胞/膜損傷細(xì)胞雙染試劑盒
活細(xì)胞染色液(Hoechst 33342)(100×)
細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒(WST-1法)
貨號(hào) | FS-X9701 |
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產(chǎn)品介紹:
正常細(xì)胞/膜損傷細(xì)胞染色試劑盒是采用Calcein-AM/7-AAD 雙染細(xì)胞的方法染色活細(xì)胞和膜損傷細(xì)胞(死細(xì)胞)。 Calcein-AM 是一種可對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行熒光標(biāo)記的細(xì)胞染色試劑,Calcein-AM 由于在Calcein的基礎(chǔ)上加強(qiáng)了疏水性,因此能夠輕易穿透活細(xì)胞膜。當(dāng)其進(jìn)入到細(xì)胞質(zhì)后,酯酶會(huì)將其水解為Calcein 留在細(xì)胞內(nèi),發(fā)出強(qiáng)綠色熒光。與其它同類試劑(如BCECF-AM和Carboxy-fluorescein diacetate)相比,Calcein-AM 是適合作為熒光探針去染活細(xì)胞的,因?yàn)樗募?xì)胞毒性很低。Calcein的激發(fā)和發(fā)射波長分別為490 nm和515 nm。Calcein -AM僅對(duì)活細(xì)胞染色。 7-AAD 是一種非滲透性熒光染料,作為核染色染料的7-AAD 不能穿過正常活細(xì)胞的細(xì)胞膜,但可穿透膜損傷細(xì)胞如晚期凋亡細(xì)胞或者壞死細(xì)胞的細(xì)胞膜,它穿過死細(xì)胞膜的無序區(qū)域而到達(dá)細(xì)胞核,并嵌入細(xì)胞的DNA 上,形成具有高熒光性的加成物,從而產(chǎn)生紅色熒光(激發(fā):488,545nm,發(fā)射:647 nm),因此7-AAD僅對(duì)膜損傷的死細(xì)胞染色。可以用來檢測膜損傷的無活性的細(xì)胞。 由于Calcein和7-AAD-DNA都可被490 nm激發(fā),因此可用熒光顯微鏡同時(shí)觀察活細(xì)胞和膜損傷細(xì)胞。用545 nm 激發(fā),僅可觀察到膜損傷細(xì)胞。 儲(chǔ)存條件:染料-20℃避光保存;避免反復(fù)凍融;稀釋液2-8℃保存。 有效期:六個(gè)月 |
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品貨號(hào) |
500T|1000T | FS-X9701 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長,未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
酪羥化(TH)英文名:TH 過氧化物?;趸?抗體包裝25g
跨膜蛋白97(TMEM97/MAC30)英文名:TMEM97/MAC30 膽固酰基轉(zhuǎn)移1抗體包裝5g
克拉拉細(xì)胞蛋白(CC16)英文名:CC16 磷化間變型淋巴瘤激抗體包裝1g
可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(sTRAIL)英文名:sTRAIL 磷化ADP核糖基化因子結(jié)合蛋白2抗體包裝5g
可溶性血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)英文名:sPECAM-1/sCD31 磷化有絲分裂激B/C抗體包裝1g
可溶性血栓調(diào)節(jié)蛋白(sTM)英文名:sTM 磷化腺泡Acinus蛋白抗體包裝25g
可溶性血凝樣氧化低密度脂蛋白受體1(sLOX-1)英文名:sLOX-1 磷化腎上腺能受體β2抗體包裝5g
可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)英文名:sEPCR APS抗體包裝25g
可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體1(sVEGF R1/sFlt1)英文名:sVEGF R1/sFlt1 激活受體樣激1抗體包裝5g
可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)英文名:sICAM-1 激活A(yù)受體1B抗體包裝100ml
可溶性髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1(sTREM-1)英文名:sTREM-1 磷化雄激受體抗體包裝25ml
可溶性瘦受體(sLR)英文名:sLR 磷化A-Raf抗體包裝5ml
可溶性凝集樣氧化低密度脂蛋白受體1(sLOX-1)英文名:sLOX-1 ?;拭擋?抗體包裝100ml
可溶性肌球蛋白重鏈2(sMHC-2)英文名:sMHC-2 脂肪特異性粘附分子抗體包裝1g
可溶性肌球蛋白重鏈1(sMHC-1)英文名:sMHC-1 腺相關(guān)病5抗體包裝5g
雙調(diào)蛋白(結(jié)腸直腸源性生長因子)抗體C反應(yīng)蛋白(CRP)Pictilisib (GDC-0941) is a potent inhibitor of PI3Kα/δ with IC50 of 3 nM in cell
活細(xì)胞/膜損傷細(xì)胞雙染試劑盒小叢殼屬 N-叔丁氧羰基-S-(4-)-D-青霉二環(huán)己基促性腺平抑因子
類谷糠乳桿 2,6-二苯甲促胰液
大豆慢生根瘤 2,3-二茴香催產(chǎn)
產(chǎn)氣莢膜梭 C型 2-氨基-3-甲基吡催乳
土生類諾卡氏 5-硝基吡唑-3-羧酸大內(nèi)皮
樟疫霉 3′-溴苯酮單氧化
黃色長孢鏈霉 1,14-十四烷二單純皰疹病抗原2
果生鏈核盤 6-喹唑啉-4-單核趨化蛋白1
地衣芽孢桿 4-(3-溴苯基)嗎啉單核趨化蛋白3
白金針菇 4-(3-溴苯基)嗎啉單核趨化蛋白5
大腸埃希氏 3-氟-N-單抗MG7相關(guān)抗原
白黃側(cè)耳 2-氟-6-甲酸甲酯單鏈DNA結(jié)合蛋白
微小桿 1,6-萘啶-2-羧酸膽固
蘇云金芽孢桿 3-氨基-4-羧基乙氧基吡唑膽固酯
藤黃類諾卡氏 2,5-二吡乙酰轉(zhuǎn)移
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