當前位置:上海邦景實業(yè)有限公司>>核酸檢測試劑盒>>PCR-熒光探法>> 48T 0.1PCR管Cry1A(b/c)基因核酸檢測試劑盒
特點:
1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準確快速。
2. 引物經過優(yōu)化,特異性強。預期的 PCR 產物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對照,便于分析試驗結果。
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參數規(guī)格:
產品名稱:Cry1A(b/c)基因核酸檢測試劑盒
產品規(guī)格:48T 0.1PCR管
產品貨號:BJP64876
產品運輸:低溫運輸
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
產品特點:
本產品就是根據保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
需要自備的器材:
1.儀器:分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調移液器(2 µL、20µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:熒光 PCR 反應管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經焦碳酸二乙酯(DEPC)水
處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。
定量PCR方法:
a、競爭法
選擇由突變克隆產生的含有一個新內切位點的外源競爭性模板。在同一反應管中,待測樣品與競爭模板用同一對引物同時擴增(其中一個引物為熒光標記)。擴增后用內切酶消化PCR產物,競爭性模板的產物被酶解為兩個片段,而待測模板不被酶切,可通過電泳或高效液相將兩種產物分開,分別測定熒光強度,根據已知模板推測未知模板的起始拷貝數。
b、內參照法
在不同的PCR反應管中加入已定量的內標和引物,內標用基因工程方法合成。上游引物用熒光標記,下游引物不標記。在模板擴增的同時,內標也被擴增。在PCR產物中,由于內標與靶模板的長度不同,二者的擴增產物可用電泳或高效液相分離開來,分別測定其熒光強度,以內標為對照定量待檢測模板。
c、PCR-ELISA法
利用di高辛或生物素等標記引物,擴增產物被固相板上特異的探針所結合,再加入抗di高辛或生物素酶標抗體-辣根過氧化物酶結合物,最終酶使底物顯色。常規(guī)的PCR-ELISA法只是定性實驗,若加入內標,作出標準曲線,也可實現定量檢測目的。
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
北豆根(標準品)英文名稱: (S)-Amlodipine產品別名: 1,3-環(huán)己二
北美芹素英文名稱: (S)-Amlodipine產品別名: 5-苯甲基D-谷氨酸
北美芹素(標準品)英文名稱: Tranilast產品別名: 1-甲基-5-甲基吡唑-4-甲
北五加皮苷M;杠柳苷M英文名稱: Tranilast產品別名: 2,3-二氟-4-甲氧基苯甲
北五加皮苷N;杠柳苷N英文名稱: CEFADROXIL產品別名: 1-BOC-4-基哌啶
貝萼皂苷元英文名稱: CEFADROXIL產品別名: 4-苯肼-N-磺酰
貝萼皂苷元-3- O-β-D-吡喃葡萄糖苷英文名稱: Sodium D-pantothenate 產品別名: N-芐基-2-氯乙酰
貝母花(標準品)英文名稱: Edoxaban產品別名: 5-氯-3-羥基異噻唑
貝母素甲(標準品)英文名稱: Sphondin產品別名: 3-氟苯乙炔
貝母素乙(標準品)英文名稱: 6-Hydroxycoumarin產品別名: 二氟拉松
貝母辛(標準品)英文名稱: 6-Hydroxycoumarin產品別名: (4-甲氧基苯基)(4-哌啶)甲酮鹽酸鹽
苯甲酰次烏頭原堿(標準品)英文名稱: Lithocholylglycine產品別名: [1,3-二氫-1,3-雙(2,4,6-三基)-2H-咪唑-2-亞基](3-苯基-1H-茚-1
富含絲氨酸/精氨酸重復結構蛋白抗體 Geniposidic acid 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
巖藻糖基轉移酶6抗體 3,4-Dihydroxybenzoic acid 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
巖藻糖基轉移酶7抗體 3,4-Dihydroxybenzaldehyde 質量規(guī)格:≥98%
眼睛和頭發(fā)顏色相關蛋白FUZ抗體 3,4-Dihydroxybenzaldehyde 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
濾泡型轉運蛋白1/II型慢性淋巴性白血病抗體 Thiamphenicol glycinate HCl 質量規(guī)格:>98%,BR
磷酸化堿性成纖維生長因子受體1抗體 Ethyl 2,4-dihydroxy-6-methylnicotinate 質量規(guī)格:>98%
FAM65B蛋白抗體 Enduracidin 質量規(guī)格:BR,含量8%以上
胞外分泌型絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶FAM20C抗體 (+)-Catechin hydrate 質量規(guī)格:HPLC>98%,進分
凝血因子8/第八凝血因子/第八因子相關抗原抗體 (+)-Catechin hydrate 質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
Cry1A(b/c)基因核酸檢測試劑盒裂褶菌Anti-COX8A Antibody拉丁屬名: Schizophyllum commune Fr.
木拉克酵母屬Anti-COPS5 Antibody拉丁屬名: Mrakia blollopis
雞痘病Anti-COPS5 Antibody(原貨號PB0521)拉丁屬名: Fowlpox virus
茶葉枯炭疽盤孢菌*Anti-CPA1 Antibody拉丁屬名: Colletotrichum coccodes
立枯絲核菌Anti-CP Antibody(原貨號PB0896)僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
環(huán)帶青霉Anti-CPAMD8 Antibody拉丁屬名: Penicillium zonatum
灰平鏈霉菌Anti-CP Antibody(原貨號PB0897)僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
文昌小單孢菌Anti-CPB2 Antibody拉丁屬名: Micromonospora wenchangensis
產腸素大腸埃希氏菌Anti-CPT2 Antibody拉丁屬名: Escherichia coli ETEC O126:K71
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