當前位置:上海邦景實業(yè)有限公司>>核酸檢測試劑盒>>PCR-熒光探法>> 48T 0.1PCR管GOX基因核酸檢測試劑盒
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:GOX基因核酸檢測試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:48T 0.1PCR管
產(chǎn)品貨號:BJP64874
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
產(chǎn)品特點:
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
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需要自備的器材:
1.儀器:分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水
處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。
特點:
1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對照,便于分析試驗結(jié)果。
定量PCR方法:
a、競爭法
選擇由突變克隆產(chǎn)生的含有一個新內(nèi)切位點的外源競爭性模板。在同一反應(yīng)管中,待測樣品與競爭模板用同一對引物同時擴增(其中一個引物為熒光標記)。擴增后用內(nèi)切酶消化PCR產(chǎn)物,競爭性模板的產(chǎn)物被酶解為兩個片段,而待測模板不被酶切,可通過電泳或高效液相將兩種產(chǎn)物分開,分別測定熒光強度,根據(jù)已知模板推測未知模板的起始拷貝數(shù)。
b、內(nèi)參照法
在不同的PCR反應(yīng)管中加入已定量的內(nèi)標和引物,內(nèi)標用基因工程方法合成。上游引物用熒光標記,下游引物不標記。在模板擴增的同時,內(nèi)標也被擴增。在PCR產(chǎn)物中,由于內(nèi)標與靶模板的長度不同,二者的擴增產(chǎn)物可用電泳或高效液相分離開來,分別測定其熒光強度,以內(nèi)標為對照定量待檢測模板。
c、PCR-ELISA法
利用di高辛或生物素等標記引物,擴增產(chǎn)物被固相板上特異的探針所結(jié)合,再加入抗di高辛或生物素酶標抗體-辣根過氧化物酶結(jié)合物,最終酶使底物顯色。常規(guī)的PCR-ELISA法只是定性實驗,若加入內(nèi)標,作出標準曲線,也可實現(xiàn)定量檢測目的。
白楊素-7-O-龍膽二糖苷英文名稱: 5-Nitro-1,10-phenanthroline產(chǎn)品別名: 9-氧雜-1-氮雜-蒽
白英(標準品)英文名稱: Rotundic acid產(chǎn)品別名: (R)-3-氨基-氮雜庚烷-2-酮鹽酸鹽
白芷(標準品)英文名稱: Bromophenol blue sodium salt產(chǎn)品別名: 2-氯-6-甲氧基苯并噻唑
百部(對葉百部)(標準品)英文名稱: Thymol blue sodium salt產(chǎn)品別名: 5-溴-2--1,3-二
百部(直立百部)(標準品)英文名稱: Sodium tetraphenylboron產(chǎn)品別名: 2-羥基-5-氯吡
百合(標準品)英文名稱: Sodium sulfosalicylate產(chǎn)品別名: 2-氯-5-三氟甲苯
百兩金素A(標準品)英文名稱: Nitroso R Salt產(chǎn)品別名: 氯鉑酸水合物
百秋李(標準品)英文名稱: Rhodizonic acid sodium salt產(chǎn)品別名: 2,3,6,7-四氯喹喔啉
百蕊草(標準品)英文名稱: Indigo carmine產(chǎn)品別名: 4-基-3-甲酸甲酯
百蕊草素I/山柰酚-3-葡萄糖鼠李糖苷/阿福豆苷(標準...英文名稱: Chromotropic acid disodium salt dihydrate產(chǎn)品別名: 2-氨基-3-溴-5-氟苯甲酸
柏子仁(標準品)英文名稱: Bromothymol blue sodium salt產(chǎn)品別名: 2-(N-Boc-3-哌啶基)乙
敗醬草(標準品)英文名稱: Tedizolid free base產(chǎn)品別名: 3-氨基環(huán)己甲酸(順反異構(gòu)體混合物)
人纖維蛋白原單克隆抗體 INSULIN 質(zhì)量規(guī)格:BR,27U/mg,進分
FANCD2抗體 L-Aspartate Potassium 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
磷酸化FANCD2抗體 Coenzyme Q10,Ubiquinone 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
外基質(zhì)蛋白FREM2抗體 Coenzyme Q10 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
面肩肱型肌營養(yǎng)不良癥相關(guān)蛋白FRG1抗體 vitamin A acetate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99%,標準品
CD350抗體 Humic acid 質(zhì)量規(guī)格:>90%,BR
CD344抗體 Usaramine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
卷曲蛋白6抗體 L-Aspartic acid sodium salt 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
卷曲蛋白8抗體 Taxifolin 質(zhì)量規(guī)格:>98%
GOX基因核酸檢測試劑盒谷氨酸棒桿菌Anti-COL1A1 Antibody拉丁屬名: Corynebacterium glutamicum
冠突曲霉Anti-COL3A1 Antibody拉丁屬名: Aspergillus cristatus
Mucilaginibacter mallensisAnti-COL3A1 Antibody拉丁屬名: Mucilaginibacter mallensis
釀酒酵母Anti-COL2A1 Antibody拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
孟氏假單胞菌Anti-COL3A1 Antibody拉丁屬名: Pseudomonas mandelii
透孢犁頭霉Anti-COL4A1 Antibody拉丁屬名: Absidia hyalospora
黑腐皮殼菌Anti-COL4A2 Antibody僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
衛(wèi)矛擬盤多毛孢Anti-COMT Antibody僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
細鏈格孢Anti-COMP Antibody僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
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