【儀表網(wǎng) 行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)】 由國(guó)家糧食和物資儲(chǔ)備局組織起草的《糧油檢驗(yàn) 谷物中黃曲霉毒素 B1測(cè)定 超導(dǎo)量點(diǎn)免疫熒光快速定量法》標(biāo)準(zhǔn)已形成征求意見(jiàn)稿，現(xiàn)向社會(huì)公開(kāi)征求意見(jiàn)，截止日期為2023年7月19日。意見(jiàn)反饋郵箱：tc270sc1@ags.ac.cn。
 

　　黃曲霉毒素 B1是已知的化學(xué)物質(zhì)中致癌性最強(qiáng)的一種。黃曲霉毒素 B1對(duì)人和動(dòng)物具有強(qiáng)烈的毒性，其毒性作用主要是對(duì)肝臟的損害。在天然食物中以黃曲霉毒素 B1最為多見(jiàn)，危害性也最強(qiáng)，是大部分食品的必檢項(xiàng)目之一。
 

　　糧食作為我國(guó)飲食結(jié)構(gòu)金字塔最底端，在我國(guó)居民飲食結(jié)構(gòu)中所占比例最高，其質(zhì)量安全更是不容小覷。然而，糧食真菌毒素污染事件時(shí)有發(fā)生，據(jù)聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織估計(jì)，全世界谷物供應(yīng) 25%受真菌毒素污染而不能食用，其中又以黃曲霉毒素污染最為嚴(yán)重。因此，大力發(fā)展準(zhǔn)確、高效的黃曲霉毒素快速檢測(cè)技術(shù)，提高糧食黃曲霉毒素的監(jiān)管時(shí)效性，對(duì)把好糧食市場(chǎng)準(zhǔn)入關(guān)，確保糧食流通安全具有重要現(xiàn)實(shí)意義。
 

　　在當(dāng)前綠色、安全的糧食發(fā)展背景下，糧食污染物快速檢測(cè)技術(shù)是糧食行業(yè)的發(fā)展重點(diǎn)，各種快速檢測(cè)方法紛紛涌現(xiàn)，為糧食安全的保駕護(hù)航發(fā)揮了重要作用。為確保方法使用的合法性，將這些快速檢測(cè)方法進(jìn)行嚴(yán)謹(jǐn)?shù)尿?yàn)證并形成方法標(biāo)準(zhǔn)符合當(dāng)前政策和形勢(shì)，也符合社會(huì)需求。目前，已形成標(biāo)準(zhǔn)的真菌毒素快速檢測(cè)方法主要是酶聯(lián)免疫法和膠體金快速定量法，尚不足以完全滿(mǎn)足當(dāng)前行業(yè)對(duì)真菌毒素快速檢測(cè)技術(shù)的需求。本項(xiàng)目以超導(dǎo)量點(diǎn)免疫熒光技術(shù)為基礎(chǔ)，利用超導(dǎo)量點(diǎn)的增敏作用，有效提高了黃曲霉毒素 B1的檢測(cè)靈敏度和準(zhǔn)確性。同時(shí)，該方法對(duì)樣品前處理方法進(jìn)行優(yōu)化，結(jié)合該方法測(cè)定樣品時(shí)較短的上機(jī)時(shí)間，大大縮短了樣品的檢測(cè)時(shí)間，提高了樣品的檢測(cè)效率。該方法形成標(biāo)準(zhǔn)將為糧食黃曲霉素 B1的監(jiān)管準(zhǔn)確性和時(shí)效性發(fā)揮重要作用。
 

　　本文件按照 GB/T 1.1-2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則 第 1 部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。
 

　　本文件規(guī)定了谷物中黃曲霉毒素B1的超導(dǎo)量點(diǎn)免疫熒光快速定量檢測(cè)方法的原理、試劑、儀器設(shè)備及材料、樣品制備、樣品測(cè)定、結(jié)果表述、重復(fù)性。本文件適用于小麥、稻谷、玉米等谷物及其制品中黃曲霉毒素B1的快速定量檢測(cè)。方法檢出限為0.5μg/kg，定量限為1.5μg/kg。
 

　　原理：
 

　　本方法基于超導(dǎo)量點(diǎn)標(biāo)記的抗原抗體反應(yīng)，采用熒光側(cè)向免疫層析(Fluorescent Lateral Flow，F(xiàn)LF)方法學(xué)原理。試樣中的黃曲霉毒素B1抗原和固定在檢測(cè)線(xiàn)T線(xiàn)上的黃曲霉毒素B1抗原與超導(dǎo)量點(diǎn)標(biāo)記黃曲霉毒素B1抗體競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)，熒光分析儀讀取的熒光信號(hào)與試樣中黃曲霉毒素B1含量呈反比，根據(jù)儀器內(nèi)置曲線(xiàn)自動(dòng)計(jì)算樣品中黃曲霉毒素B1的含量。
 

　　儀器設(shè)備及材料：
 

　　除實(shí)驗(yàn)室常規(guī)儀器、設(shè)備外，需用到下列儀器設(shè)備。
 

　　1.天平：分度值 0.01g。
 

　　2.粉碎機(jī)：可使試樣粉碎后全部通過(guò)20目篩。
 

　　3.離心機(jī)：轉(zhuǎn)速不低于4000r/min。
 

　　4.渦旋振蕩器。
 

　　5.免疫熒光分析儀：可測(cè)定并顯示超導(dǎo)量點(diǎn)免疫熒光定量檢測(cè)卡的測(cè)定結(jié)果。
 

　　6.QD-Infinity 黃曲霉毒素 B1超導(dǎo)量點(diǎn)免疫熒光定量檢測(cè)卡1：常溫避光儲(chǔ)存，具體儲(chǔ)存條件參照使用說(shuō)明；技術(shù)要求見(jiàn)附錄 A。
 

　　7.濾紙：中速定量濾紙。
 

　　8.計(jì)時(shí)器。
 

　　樣品測(cè)定：
 

　　1.開(kāi)啟免疫熒光分析儀(5.5)。
 

　　2.將超導(dǎo)量點(diǎn)免疫熒光定量檢測(cè)卡(5.6)從冷藏狀態(tài)取出放置至室溫，加樣孔朝上平放。
 

　　3.準(zhǔn)確移取 75 μL 待測(cè)液(6.2.2)，加入檢測(cè)卡加樣孔中。
 

　　4.檢測(cè)卡加樣后，水平靜置反應(yīng)15min，然后在3min 內(nèi)將檢測(cè)卡插入免疫熒光分析儀(5.5)，儀器將自動(dòng)進(jìn)行檢測(cè)。
 

　　5.免疫熒光分析儀(5.5)自動(dòng)完成數(shù)據(jù)讀取、分析、顯示并保存檢測(cè)結(jié)果。
 

　　若顯示值>50μg/kg，則移取100μL6.2.2 中濾液或上清液，加入300μL 試樣提取液(4.2)，充分混勻后取100μL 至一潔凈的離心管中，加入400μL 稀釋緩沖液(4.1)，充分混勻，按照8.2～8.5進(jìn)行測(cè)定。
 

　　結(jié)果表述：
 

　　試樣中黃曲霉毒素B1的含量由免疫熒光分析儀自動(dòng)計(jì)算并顯示，單位為微克每千克(μg/kg)。
 

　　重復(fù)性：
 

　　在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不超過(guò)算術(shù)平均值的20%。
 

　　更多詳情請(qǐng)見(jiàn)附件。