【儀表網(wǎng) 行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)】由國(guó)家糧食和物資儲(chǔ)備局組織起草的《糧油檢驗(yàn) 糧食及其制品中維生素B快速檢測(cè)》標(biāo)準(zhǔn)已形成征求意見(jiàn)稿，現(xiàn)向社會(huì)公開(kāi)征求意見(jiàn)，截止日期為2023年7月19日。意見(jiàn)反饋郵箱：tc270sc1@ags.ac.cn。
 

　　維生素 B 是維持人體正常機(jī)能與代謝活動(dòng)不可或缺的水溶性維生素，可以促進(jìn)生長(zhǎng)發(fā)育幫助維持心臟、神經(jīng)系統(tǒng)功能，維持消化系統(tǒng)及皮膚的健康，缺乏B 族維生素，會(huì)導(dǎo)致代謝障礙，人體易出現(xiàn)怠滯和血壓升高等問(wèn)題。維生素 B3(煙酸)、維生素 B5(泛酸)、維生素 B7(生物素)、維生素 B9(葉酸)存在于糧食及其制品中，而植物性食品中幾乎不含維生素 B12。為達(dá)到理想的平衡膳食模式，營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化米粉、營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化小麥粉作為天然食品的補(bǔ)充滿足了不同人群的需要。我國(guó)相繼出臺(tái)了 GB 14880-2012《食品營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化劑使用標(biāo)準(zhǔn)》、GB 31601-2015《孕婦及乳母營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充食品》等對(duì)糧食及其制品營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化允許添加量進(jìn)行了限制；GB 28050-2011《預(yù)包裝食品營(yíng)養(yǎng)標(biāo)簽通則》、GB 13432-2013《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 預(yù)包裝特殊膳食用食品標(biāo)簽》等標(biāo)準(zhǔn)對(duì)含量標(biāo)示量等進(jìn)行了規(guī)定。
 

　　維生素 B3、B5、B7、B9、B12 含量檢測(cè)經(jīng)典方法為微生物法，也可采用液相色譜或液質(zhì)聯(lián)用等。微生物測(cè)定活性維生素 B 結(jié)果準(zhǔn)確度高，但操作步驟繁雜，檢測(cè)實(shí)驗(yàn)需要進(jìn)行菌株的活化、轉(zhuǎn)種、培養(yǎng)、測(cè)試菌液制備和培養(yǎng)基配制等人工操作步驟，復(fù)雜繁瑣并對(duì)檢測(cè)技術(shù)人員的專業(yè)技能要求較高，這也造成了在實(shí)際操作中，使用傳統(tǒng)微生物法檢測(cè)維生素 B 族結(jié)果不穩(wěn)定，實(shí)驗(yàn)室間結(jié)果可比性較差。液相色譜法測(cè)定水溶性維生素具有特異性強(qiáng)的優(yōu)勢(shì)，但需要昂貴的檢測(cè)儀器設(shè)備和耗材，樣品中基質(zhì)對(duì)結(jié)果會(huì)產(chǎn)生干擾，且樣品處理復(fù)雜，只能根據(jù)結(jié)構(gòu)檢測(cè)維生素的含量，不能準(zhǔn)確檢測(cè)活性維生素的含量。與此同時(shí)，食品行業(yè)日常生產(chǎn)質(zhì)控、食品安全監(jiān)管部門開(kāi)展食品安全監(jiān)督檢驗(yàn)、第三方檢測(cè)機(jī)構(gòu)為社會(huì)提供食品檢驗(yàn)技術(shù)服務(wù)，均需要更加操作簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì)高效、結(jié)果準(zhǔn)確、適用性廣的檢測(cè)方法，現(xiàn)有標(biāo)準(zhǔn)方法尚不能完全滿足。
 

　　本標(biāo)準(zhǔn)在微生物法的基礎(chǔ)上，為改善微生物培養(yǎng)過(guò)程中一系列影響檢測(cè)技術(shù)性能的問(wèn)題，針對(duì)現(xiàn)有的維生素 B3、B5、B7、B9、B12 快速定量方法進(jìn)行研究，規(guī)范檢測(cè)方法標(biāo)準(zhǔn)，提高檢測(cè)效率和檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性制定本行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，旨在建立科學(xué)規(guī)范的快速檢測(cè)定量方法，為準(zhǔn)確評(píng)價(jià)糧食及其制品維生素 B 族含量和標(biāo)簽標(biāo)注成分的準(zhǔn)確性，鼓勵(lì)糧食營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化制品的生產(chǎn)和推廣，加強(qiáng)政府監(jiān)管能力，保障人民群眾的身體健康。
 

　　本文件按照GB/T 1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則 第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。
 

　　本文件規(guī)定了糧食及其制品中維生素 B3(煙酸)、維生素 B5(泛酸)、維生素 B7(生物素)、維生素 B9(葉酸)、維生素 B12的快速檢測(cè)方法。
 

　　本文件第一法適用于糧食及其制品中維生素 B3(煙酸)的快速檢測(cè)。本文件第二法適用于糧食及其制品中維生素 B5(泛酸)的快速檢測(cè)。本文件第三法適用于糧食及其制品中維生素 B7(生物素)的快速檢測(cè)。本文件第四法適用于糧食及其制品中維生素 B9(葉酸)的快速檢測(cè)。本文件第五法適用于糧食及其制品中強(qiáng)化維生素 B12的快速檢測(cè)，不適用于維生素 B12總量的快速檢測(cè)。
 

　　原理：
 

　　樣品經(jīng)過(guò)提取和稀釋后與維生素B3檢測(cè)培養(yǎng)基一同加入包埋有植物乳植桿菌(Lactiplantibacillus plantarum)(ATCC 8014)的微孔中。植物乳植桿菌生長(zhǎng)狀況取決于維生素B3的含量，直至培養(yǎng)液中的維生素B3被完全消耗。植物乳植桿菌的生長(zhǎng)狀況(濁度)與維生素B3含量呈現(xiàn)對(duì)應(yīng)關(guān)系，經(jīng)酶標(biāo)儀進(jìn)行吸光度值測(cè)定并擬合標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，計(jì)算出試樣中維生素B3含量。
 

　　儀器和設(shè)備：
 

　　1.天平：感量0.01g、0.0001g。
 

　　2.高壓滅菌鍋。
 

　　3.無(wú)菌操作臺(tái)。
 

　　4.酶標(biāo)儀：540nm 或630nm。
 

　　5.恒溫培養(yǎng)箱：帶暗室，36 ℃±1 ℃。
 

　　6.水浴鍋：95 ℃±1 ℃。
 

　　7.粉碎機(jī)：錘式旋風(fēng)磨，具有風(fēng)門可調(diào)和自清理功能，以避免樣品殘留和出樣管堵塞。在粉碎樣品時(shí)，應(yīng)避免磨膛發(fā)熱。
 

　　8.渦旋混合器。
 

　　9.離心機(jī)：轉(zhuǎn)速≥8000 r/min。
 

　　10.pH 計(jì)：精度±0.01。
 

　　11.微量可調(diào)單通道移液器及配套無(wú)菌吸頭：100µL～1000µL、20µL～200µL。
 

　　12.無(wú)菌離心管：帶刻度，帶螺帽，50mL。
 

　　13.無(wú)菌離心管：2.0mL。
 

　　14.無(wú)菌注射器：10mL。
 

　　15.無(wú)菌聚醚砜濾膜(PES)：0.22µm。
 

　　16.容量瓶：1000mL、100mL。
 

　　17.燒杯：1000mL、100mL。
 

　　質(zhì)量控制：
 

　　1.標(biāo)準(zhǔn)濃度 0.0 µg/100 mL 測(cè)定吸光值應(yīng)小于標(biāo)準(zhǔn)濃度 0.4 µg/100 mL 測(cè)定吸光值，標(biāo)準(zhǔn)濃度 4.0 µg/100 mL 測(cè)定吸光值應(yīng)大于 0.6，否則表明實(shí)驗(yàn)失敗。
 

　　2.標(biāo)準(zhǔn)曲線的相關(guān)系數(shù)不得低于 0.99。
 

　　3.標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度點(diǎn)和待測(cè)樣品稀釋液兩個(gè)微孔間測(cè)定的吸光度相對(duì)偏差不應(yīng)大于 5%，舍去的標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度點(diǎn)數(shù)量不得超過(guò) 1 個(gè)。
 

　　4.當(dāng)待測(cè)樣品液的吸光值小于標(biāo)準(zhǔn)濃度 0.4 µg/100 mL 測(cè)定吸光值或大于標(biāo)準(zhǔn)濃度 4.0 µg/100 mL測(cè)定吸光值時(shí)，需調(diào)整稀釋倍數(shù)重新檢測(cè)，使待測(cè)樣品液的吸光值落在標(biāo)準(zhǔn)曲線的定量范圍內(nèi)。
 

　　5.每個(gè)批號(hào)試劑盒應(yīng)進(jìn)行驗(yàn)收試驗(yàn)，選取帶標(biāo)物證書(shū)的質(zhì)控樣品測(cè)定值需在質(zhì)控樣品賦值范圍內(nèi)的批次產(chǎn)品方可使用；或考察添加濃度水平為 0.3 mg/100 g 時(shí)，回收率在 90%～110%容許范圍內(nèi)的批次產(chǎn)品方可使用。
 

　　精密度：
 

　　在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不得超過(guò)算術(shù)平均值的15%。
 

　　其他：
 

　　本方法定量限為0.1 mg/100g。
 

　　更多詳情請(qǐng)見(jiàn)附件。