小鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原30配體(sCD30L)Elisa試劑盒 ,ELISA的基本原理是:
①使抗原(或抗體)結(jié)合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性;
②使抗原(或抗體)與某種酶聯(lián)結(jié)成酶標(biāo)抗原(或抗體),而且此酶標(biāo)抗原(或抗體)既保留其免疫活性,又保留其酶活性;
③測定時將受檢標(biāo)本(抗體或抗原)和酶標(biāo)抗原(或抗體)按不同步驟與固相載體表面的抗原或抗體進(jìn)行反應(yīng),再用洗滌方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與其它物質(zhì)分開,zui后結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢的抗體或抗原量成一定比例;再加入酶反應(yīng)底物后,底物被酶催化后變?yōu)橛猩a(chǎn)物,根據(jù)其顏色反應(yīng)的深淺進(jìn)行定性或定量分析,以了解被測標(biāo)本中抗體或抗原含量。
小鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原30配體(sCD30L)Elisa試劑盒 ,ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在臨床檢驗中除正常反應(yīng)外,有時常可見到一些錯誤結(jié)果(即假陽性或假陰性結(jié)果)。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。
,ELISA測定的影響做如下討論。
血清是zui常用的ELISA標(biāo)本,血漿一般可視為與血清同等的標(biāo)本,標(biāo)本引起的假陽性和假陰性結(jié)果主要是干擾性物質(zhì)所致,分為內(nèi)源性物質(zhì)和外源性物質(zhì)兩種:
1. 內(nèi)源性物質(zhì) 有人認(rèn)為大約40%的人血清標(biāo)本中含有非特異性干擾物質(zhì),可以不同程度影響檢測結(jié)果。常見的干擾物質(zhì)有:類風(fēng)濕因子、補體、嗜異性抗體、嗜靶抗原自身抗體、醫(yī)源性誘導(dǎo)的抗鼠Ig (s)抗體、交叉反應(yīng)物質(zhì)和其它物質(zhì)等。
外源性物質(zhì)
2. 外源性物質(zhì)常常是由于用于ELISA測定的血標(biāo)本的采集、貯存等不當(dāng)所致。如標(biāo)本溶血、標(biāo)本被細(xì)菌污染、標(biāo)本貯存過久、標(biāo)本凝集不全和*中添加物等影響。
(1)標(biāo)本溶血 由于各種人為原因引起的標(biāo)本溶血,均可因紅細(xì)胞破壞溶解時釋放出大量具有過氧化物酶活性的血紅蛋白,在以辣根過氧化物酶為標(biāo)記的ELISA測定中,會導(dǎo)致非特異性顯色,干擾測定結(jié)果。為克服上述干擾作用,標(biāo)本采集時必須注意避免溶血。
(2)標(biāo)本受細(xì)菌污染 因菌體中可能含有內(nèi)源性辣根過氧化物酶,因此,被細(xì)菌污染的標(biāo)本同溶血標(biāo)本一樣,亦可產(chǎn)生非特異性顯色而干擾測定結(jié)果。
(3)標(biāo)本保存不當(dāng) 在冰箱中保存過久的標(biāo)本,血清中IgG可聚合成多聚體、AFP可形成二聚體,在間接法ELISA測定中會導(dǎo)致本底過深、甚至造成假陽性;標(biāo)本放置時間過長(如一天以上),有時抗原或抗體免疫活性減弱,亦可出現(xiàn)假陰性。為克服上述干擾,ELISA測定的血清標(biāo)本宜為新鮮采集;如不能立即測定,5天內(nèi)測定的血清標(biāo)本可存放于4℃,1周后測定的血清標(biāo)本應(yīng)低溫凍存;凍存后融解的標(biāo)本,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應(yīng)充分混合后再測定,但混勻時應(yīng)輕柔,不可強烈振蕩。
(4)標(biāo)本凝集不全 在沒有促凝劑和抗凝劑存在的情況下,正常血液采集后1/2~2h開始凝固,18~24h*凝固。臨床檢驗工作中,有時為了爭取時間快速檢測,常在血液還未開始凝固時即強行離心分離血清,此時的血清中仍殘留部分纖維蛋白原,在ELISA測定過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊,易造成假陽性結(jié)果;這類情況于次日復(fù)查時因血凝已*,血清中不再有纖維蛋白原存在,故復(fù)查結(jié)果變?yōu)殛幮?。為避免上述干擾作用,解決的辦法是血液標(biāo)本采集后必須使其充分凝固后再分離血清,或標(biāo)本采集時用帶分離膠的*或于*中加入適當(dāng)?shù)拇倌齽?br />(5)標(biāo)本管中添加物質(zhì)的影響 抗凝劑(如肝素,EDTA)、酶抑制劑(如NaN3可抑制ELISA系統(tǒng)中辣根過氧化物酶活性)及快速分離血清的分離膠等均對ELISA測定有一定干擾作用。 綜上所述,對臨床檢驗ELISA測定中出現(xiàn)的假陽性或假陰性結(jié)果,在考慮試劑因素和操作因素之外,更多的應(yīng)從標(biāo)本因素方面進(jìn)行分析,并應(yīng)采取相應(yīng)措施排除干擾作用,從而為臨床提供正確可靠的檢測結(jié)果。
YS03329B 小鼠苯*(LPA)Elisa試劑盒 Mouse L-phenylalanine,LPA Elisa試劑盒
YS03330B 小鼠半乳糖6硫酸酯酶(Gal-6S)Elisa試劑盒 Mouse galactose-6-sulphate sulphatase,Gal-6S Elisa試劑盒
YS03331B 小鼠β葡萄糖醛酸苷酶(βGD)Elisa試劑盒 Mouse β-glucuronidase,βGD Elisa試劑盒
YS03332B 小鼠β葡糖苷酶(β-glucosidase)Elisa試劑盒 Mouse β-glucosidase Elisa試劑盒
YS03333B 小鼠β萘酚(β-naphthol)Elisa試劑盒 Mouse Beta-naphthol Elisa試劑盒
YS03334B 小鼠β內(nèi)酰胺酶抑制劑(BLI)Elisa試劑盒 Mouse β-Lactamase inhibitors,BLI Elisa試劑盒
YS03335B 小鼠β甘露糖苷酶(β Manase)Elisa試劑盒 Mouse β mannosidase,β Manase Elisa試劑盒
YS03336B 小鼠β半乳糖苷酶(βGAL)Elisa試劑盒 Mouse β-galactosidase,βGAL Elisa試劑盒
YS03337B 小鼠β氨基己糖苷酶A(β-hexosaminidase A)Elisa試劑盒 Mouse β-hexosaminidase A Elisa試劑盒
YS03338B 小鼠α半乳糖基抗體(Gal)Elisa試劑盒 Mouse α-galactoyl,Gal Elisa試劑盒
YS03339B 小鼠中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)Elisa試劑盒 Mouse neutrophil elastase,NE Elisa試劑盒
YS03340B 小鼠α羥基丁酸脫氫酶(αHBDH)Elisa試劑盒 Mouse α-Hydroxybutyrate Dehydrogenase,αHBDH Elisa試劑盒
YS03341B 小鼠α甘露糖苷酶(α Manase)Elisa試劑盒 Mouse α mannosidase,α Manase Elisa試劑盒
YS03342B 小鼠αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)Elisa試劑盒 Mouse αN-acetylglucosaminidase,αNAG Elisa試劑盒
YS03343B 小鼠αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)Elisa試劑盒 Mouse α-L-iduronidase,IDUA Elisa試劑盒
YS03344B 小鼠泛素蛋白(Ub)Elisa試劑盒 Mouse Ubiquitin,Ub Elisa試劑盒
YS03345B 小鼠α2纖溶酶抑制物(α2-PI)Elisa試劑盒 Mouse α2-plasmin inhititor,α2-PI Elisa試劑盒
YS03346B 小鼠α2抗纖溶酶(α2-AP)Elisa試劑盒 Mouse α2-Antiplasmin,α2-AP Elisa試劑盒
YS03347B Mouse Soluble Cluster of differentiation 30 ligand,sCD30L Elisa試劑盒
YS03348B 小鼠L苯*解氨酶(PAL)Elisa試劑盒 Mouse L-Phenylalanine ammonla-lyase,PAL Elisa試劑盒
YS03349B 小鼠*腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)Elisa試劑盒 Mouse nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH Elisa試劑盒