小鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)Elisa試劑盒 ,ELISA的基本原理是:
①使抗原(或抗體)結(jié)合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性;
②使抗原(或抗體)與某種酶聯(lián)結(jié)成酶標(biāo)抗原(或抗體),而且此酶標(biāo)抗原(或抗體)既保留其免疫活性,又保留其酶活性;
③測定時將受檢標(biāo)本(抗體或抗原)和酶標(biāo)抗原(或抗體)按不同步驟與固相載體表面的抗原或抗體進行反應(yīng),再用洗滌方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與其它物質(zhì)分開,zui后結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢的抗體或抗原量成一定比例;再加入酶反應(yīng)底物后,底物被酶催化后變?yōu)橛猩a(chǎn)物,根據(jù)其顏色反應(yīng)的深淺進行定性或定量分析,以了解被測標(biāo)本中抗體或抗原含量。
小鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)Elisa試劑盒 ,ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在臨床檢驗中除正常反應(yīng)外,有時??梢姷揭恍╁e誤結(jié)果(即假陽性或假陰性結(jié)果)。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。
,ELISA測定的影響做如下討論。
血清是zui常用的ELISA標(biāo)本,血漿一般可視為與血清同等的標(biāo)本,標(biāo)本引起的假陽性和假陰性結(jié)果主要是干擾性物質(zhì)所致,分為內(nèi)源性物質(zhì)和外源性物質(zhì)兩種:
1. 內(nèi)源性物質(zhì) 有人認(rèn)為大約40%的人血清標(biāo)本中含有非特異性干擾物質(zhì),可以不同程度影響檢測結(jié)果。常見的干擾物質(zhì)有:類風(fēng)濕因子、補體、嗜異性抗體、嗜靶抗原自身抗體、醫(yī)源性誘導(dǎo)的抗鼠Ig (s)抗體、交叉反應(yīng)物質(zhì)和其它物質(zhì)等。
外源性物質(zhì)
2. 外源性物質(zhì)常常是由于用于ELISA測定的血標(biāo)本的采集、貯存等不當(dāng)所致。如標(biāo)本溶血、標(biāo)本被細(xì)菌污染、標(biāo)本貯存過久、標(biāo)本凝集不全和*中添加物等影響。
(1)標(biāo)本溶血 由于各種人為原因引起的標(biāo)本溶血,均可因紅細(xì)胞破壞溶解時釋放出大量具有過氧化物酶活性的血紅蛋白,在以辣根過氧化物酶為標(biāo)記的ELISA測定中,會導(dǎo)致非特異性顯色,干擾測定結(jié)果。為克服上述干擾作用,標(biāo)本采集時必須注意避免溶血。
(2)標(biāo)本受細(xì)菌污染 因菌體中可能含有內(nèi)源性辣根過氧化物酶,因此,被細(xì)菌污染的標(biāo)本同溶血標(biāo)本一樣,亦可產(chǎn)生非特異性顯色而干擾測定結(jié)果。
(3)標(biāo)本保存不當(dāng) 在冰箱中保存過久的標(biāo)本,血清中IgG可聚合成多聚體、AFP可形成二聚體,在間接法ELISA測定中會導(dǎo)致本底過深、甚至造成假陽性;標(biāo)本放置時間過長(如一天以上),有時抗原或抗體免疫活性減弱,亦可出現(xiàn)假陰性。為克服上述干擾,ELISA測定的血清標(biāo)本宜為新鮮采集;如不能立即測定,5天內(nèi)測定的血清標(biāo)本可存放于4℃,1周后測定的血清標(biāo)本應(yīng)低溫凍存;凍存后融解的標(biāo)本,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應(yīng)充分混合后再測定,但混勻時應(yīng)輕柔,不可強烈振蕩。
(4)標(biāo)本凝集不全 在沒有促凝劑和抗凝劑存在的情況下,正常血液采集后1/2~2h開始凝固,18~24h*凝固。臨床檢驗工作中,有時為了爭取時間快速檢測,常在血液還未開始凝固時即強行離心分離血清,此時的血清中仍殘留部分纖維蛋白原,在ELISA測定過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊,易造成假陽性結(jié)果;這類情況于次日復(fù)查時因血凝已*,血清中不再有纖維蛋白原存在,故復(fù)查結(jié)果變?yōu)殛幮?。為避免上述干擾作用,解決的辦法是血液標(biāo)本采集后必須使其充分凝固后再分離血清,或標(biāo)本采集時用帶分離膠的*或于*中加入適當(dāng)?shù)拇倌齽?br />(5)標(biāo)本管中添加物質(zhì)的影響 抗凝劑(如肝素,EDTA)、酶抑制劑(如NaN3可抑制ELISA系統(tǒng)中辣根過氧化物酶活性)及快速分離血清的分離膠等均對ELISA測定有一定干擾作用。 綜上所述,對臨床檢驗ELISA測定中出現(xiàn)的假陽性或假陰性結(jié)果,在考慮試劑因素和操作因素之外,更多的應(yīng)從標(biāo)本因素方面進行分析,并應(yīng)采取相應(yīng)措施排除干擾作用,從而為臨床提供正確可靠的檢測結(jié)果。
YS03245B Mouse corticotropin releasing hormone,CRH Elisa試劑盒
YS03246B 小鼠胰島素受體β(ISR-β)Elisa試劑盒 Mouse Insulin Receptor β,ISR-β Elisa試劑盒
YS03247B 小鼠糖化血紅蛋白A1c(GHbA1c)Elisa試劑盒 Mouse Glycated hemoglobin A1c,GHbA1c Elisa試劑盒
YS03248B 小鼠淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)Elisa試劑盒 Mouse lymphocyte function associated antigen 3,LFA-3 Elisa試劑盒
YS03249B 小鼠骨成型蛋白7(BMP-7)Elisa試劑盒 Mouse Bone morphogenetic protein 7,BMP-7 Elisa試劑盒
YS03250B 小鼠透明質(zhì)酸(HA)Elisa試劑盒 Mouse Hyaluronic acid,HA Elisa試劑盒
YS03251B 小鼠25羥基*3(25(OH)D3/25 HVD3)Elisa試劑盒 Mouse 25-Dihydroxy vitamin D3,HVD3 Elisa試劑盒
YS03252B 小鼠*(VC)Elisa試劑盒 Mouse Vitamin C,VC Elisa試劑盒
YS03253B 小鼠*6(VB6)Elisa試劑盒 Mouse Vitamin B6,VB6 Elisa試劑盒
YS03254B 小鼠肌紅蛋白(MYO/MB)Elisa試劑盒 Mouse Myoglobin,MYO/MB Elisa試劑盒
YS03255B 小鼠血栓素B2(TXB2)Elisa試劑盒 Mouse Thromboxane B2,TXB2 Elisa試劑盒
YS03256B 小鼠乙酰*(ACH)Elisa試劑盒 Mouse acetylcholine,ACH Elisa試劑盒
YS03257B 小鼠組織多肽抗原(TPA)Elisa試劑盒 Mouse Tissue Polypeptide Antigen,TPA Elisa試劑盒
YS03258B 小鼠組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)Elisa試劑盒 Mouse Tissue-type Plasiminogen Actilyse,t-PA Elisa試劑盒
YS03259B 小鼠*(VD)Elisa試劑盒 Mouse Vitamin D,VD Elisa試劑盒
YS03260B 小鼠*1(VK1)Elisa試劑盒 Mouse Vitamin K1,VK1 Elisa試劑盒
YS03261B 小鼠*12(VB12)Elisa試劑盒 Mouse Vitamin B12,VB12 Elisa試劑盒
YS03262B 小鼠*3(VD3)Elisa試劑盒 Mouse Vitamin D3,VD3 Elisa試劑盒
YS03263B 小鼠*2(VD2)Elisa試劑盒 Mouse Vitamin D2,VD2 Elisa試劑盒
YS03264B 小鼠*(VE)Elisa試劑盒 Mouse Vitamin E,VE Elisa試劑盒
YS03265B 小鼠*(VA)Elisa試劑盒 Mouse Vitamin A,VA Elisa試劑盒
YS03266B 小鼠β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)Elisa試劑盒 Mouse β-Thromboglobulin,β-TG Elisa試劑盒
YS03267B 小鼠雙氫睪酮(DHT)Elisa試劑盒 Mouse Dihydrotestosterone,DHT Elisa試劑盒