小鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)Elisa試劑盒 ,ELISA的基本原理是:
①使抗原(或抗體)結(jié)合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性;
②使抗原(或抗體)與某種酶聯(lián)結(jié)成酶標(biāo)抗原(或抗體),而且此酶標(biāo)抗原(或抗體)既保留其免疫活性,又保留其酶活性;
③測(cè)定時(shí)將受檢標(biāo)本(抗體或抗原)和酶標(biāo)抗原(或抗體)按不同步驟與固相載體表面的抗原或抗體進(jìn)行反應(yīng),再用洗滌方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與其它物質(zhì)分開,zui后結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢的抗體或抗原量成一定比例;再加入酶反應(yīng)底物后,底物被酶催化后變?yōu)橛猩a(chǎn)物,根據(jù)其顏色反應(yīng)的深淺進(jìn)行定性或定量分析,以了解被測(cè)標(biāo)本中抗體或抗原含量。
小鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)Elisa試劑盒 ,ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。但ELISA測(cè)定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在臨床檢驗(yàn)中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常可見到一些錯(cuò)誤結(jié)果(即假陽性或假陰性結(jié)果)。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。
,ELISA測(cè)定的影響做如下討論。
血清是zui常用的ELISA標(biāo)本,血漿一般可視為與血清同等的標(biāo)本,標(biāo)本引起的假陽性和假陰性結(jié)果主要是干擾性物質(zhì)所致,分為內(nèi)源性物質(zhì)和外源性物質(zhì)兩種:
1. 內(nèi)源性物質(zhì) 有人認(rèn)為大約40%的人血清標(biāo)本中含有非特異性干擾物質(zhì),可以不同程度影響檢測(cè)結(jié)果。常見的干擾物質(zhì)有:類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、嗜異性抗體、嗜靶抗原自身抗體、醫(yī)源性誘導(dǎo)的抗鼠Ig (s)抗體、交叉反應(yīng)物質(zhì)和其它物質(zhì)等。
外源性物質(zhì)
2. 外源性物質(zhì)常常是由于用于ELISA測(cè)定的血標(biāo)本的采集、貯存等不當(dāng)所致。如標(biāo)本溶血、標(biāo)本被細(xì)菌污染、標(biāo)本貯存過久、標(biāo)本凝集不全和*中添加物等影響。
(1)標(biāo)本溶血 由于各種人為原因引起的標(biāo)本溶血,均可因紅細(xì)胞破壞溶解時(shí)釋放出大量具有過氧化物酶活性的血紅蛋白,在以辣根過氧化物酶為標(biāo)記的ELISA測(cè)定中,會(huì)導(dǎo)致非特異性顯色,干擾測(cè)定結(jié)果。為克服上述干擾作用,標(biāo)本采集時(shí)必須注意避免溶血。
(2)標(biāo)本受細(xì)菌污染 因菌體中可能含有內(nèi)源性辣根過氧化物酶,因此,被細(xì)菌污染的標(biāo)本同溶血標(biāo)本一樣,亦可產(chǎn)生非特異性顯色而干擾測(cè)定結(jié)果。
(3)標(biāo)本保存不當(dāng) 在冰箱中保存過久的標(biāo)本,血清中IgG可聚合成多聚體、AFP可形成二聚體,在間接法ELISA測(cè)定中會(huì)導(dǎo)致本底過深、甚至造成假陽性;標(biāo)本放置時(shí)間過長(如一天以上),有時(shí)抗原或抗體免疫活性減弱,亦可出現(xiàn)假陰性。為克服上述干擾,ELISA測(cè)定的血清標(biāo)本宜為新鮮采集;如不能立即測(cè)定,5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可存放于4℃,1周后測(cè)定的血清標(biāo)本應(yīng)低溫凍存;凍存后融解的標(biāo)本,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應(yīng)充分混合后再測(cè)定,但混勻時(shí)應(yīng)輕柔,不可強(qiáng)烈振蕩。
(4)標(biāo)本凝集不全 在沒有促凝劑和抗凝劑存在的情況下,正常血液采集后1/2~2h開始凝固,18~24h*凝固。臨床檢驗(yàn)工作中,有時(shí)為了爭(zhēng)取時(shí)間快速檢測(cè),常在血液還未開始凝固時(shí)即強(qiáng)行離心分離血清,此時(shí)的血清中仍殘留部分纖維蛋白原,在ELISA測(cè)定過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊,易造成假陽性結(jié)果;這類情況于次日復(fù)查時(shí)因血凝已*,血清中不再有纖維蛋白原存在,故復(fù)查結(jié)果變?yōu)殛幮浴楸苊馍鲜龈蓴_作用,解決的辦法是血液標(biāo)本采集后必須使其充分凝固后再分離血清,或標(biāo)本采集時(shí)用帶分離膠的*或于*中加入適當(dāng)?shù)拇倌齽?br />(5)標(biāo)本管中添加物質(zhì)的影響 抗凝劑(如肝素,EDTA)、酶抑制劑(如NaN3可抑制ELISA系統(tǒng)中辣根過氧化物酶活性)及快速分離血清的分離膠等均對(duì)ELISA測(cè)定有一定干擾作用。 綜上所述,對(duì)臨床檢驗(yàn)ELISA測(cè)定中出現(xiàn)的假陽性或假陰性結(jié)果,在考慮試劑因素和操作因素之外,更多的應(yīng)從標(biāo)本因素方面進(jìn)行分析,并應(yīng)采取相應(yīng)措施排除干擾作用,從而為臨床提供正確可靠的檢測(cè)結(jié)果。
YS03191B Mouse Endothelial nitric oxide synthase,eNOS Elisa試劑盒
YS03192B 小鼠脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2(Lp-PL-A2)Elisa試劑盒 Mouse lipoprotein-associated phospholipase A2,Lp-PL-A2 Elisa試劑盒
YS03193B 小鼠熱休克蛋白90(HSP-90)Elisa試劑盒 Mouse Heat Shock Protein 90,Hsp-90 Elisa試劑盒
YS03194B 小鼠熱休克蛋白70(HSP-70)Elisa試劑盒 Mouse Heat Shock Protein 70,Hsp-70 Elisa試劑盒
YS03195B 小鼠熱休克蛋白40(Hsp-40)Elisa試劑盒 Mouse Heat Shock Protein 40,Hsp-40 Elisa試劑盒
YS03196B 小鼠熱休克蛋白20(Hsp-20)Elisa試劑盒 Mouse Heat Shock Protein 20,Hsp-20 Elisa試劑盒
YS03197B 小鼠β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)Elisa試劑盒 Mouse amyloid beta peptide 1-40,Aβ1-40 Elisa試劑盒
YS03198B 小鼠細(xì)胞周期素D3(Cyclin-D3)Elisa試劑盒 Mouse Cyclin-D3 Elisa試劑盒
YS03199B 小鼠細(xì)胞周期素D2(Cyclin-D2)Elisa試劑盒 Mouse Cyclin-D2 Elisa試劑盒
YS03200B 小鼠細(xì)胞周期素D1(Cyclin-D1)Elisa試劑盒 Mouse Cyclin-D1 Elisa試劑盒
YS03201B 小鼠髓磷脂堿性蛋白(MBP)Elisa試劑盒 Mouse myelin basic protein,MBP Elisa試劑盒
YS03202B 小鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)Elisa試劑盒 Mouse Alpha-fetoprotein,AFP Elisa試劑盒
YS03203B 小鼠前列腺酸性磷酸酶(PAP)Elisa試劑盒 Mouse Prostatic Acid Phosphatase,PAP Elisa試劑盒
YS03204B 小鼠游離前列腺特異性抗原(fPSA)Elisa試劑盒 Mouse Free Prostate Specific Antigen,fPSA Elisa試劑盒
YS03205B 小鼠前列腺特異性抗原(PSA)Elisa試劑盒 Mouse prostate specific antigen,PSA Elisa試劑盒
YS03206B 小鼠卵巢癌標(biāo)志物CA125Elisa試劑盒 Mouse ovarian cancer marker-CA125 Elisa試劑盒
YS03207B 小鼠乳腺癌標(biāo)志物-CA153Elisa試劑盒 Mouse mammary carcinoma Marker-CA153 Elisa試劑盒
YS03208B 小鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199Elisa試劑盒 Mouse Gastrointestinalcancer Marker-CA199 Elisa試劑盒
YS03209B 小鼠血紅素氧合酶1(HO-1)Elisa試劑盒 Mouse heme oxygenase 1,HO-1 Elisa試劑盒
YS03210B 小鼠磷脂酶A2(PL-A2)Elisa試劑盒 Mouse Phospholipidase A2,PL-A2 Elisa試劑盒