*(SCT)Elisa試劑盒 ,ELISA的基本原理是:
①使抗原(或抗體)結(jié)合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性;
②使抗原(或抗體)與某種酶聯(lián)結(jié)成酶標(biāo)抗原(或抗體),而且此酶標(biāo)抗原(或抗體)既保留其免疫活性,又保留其酶活性;
③測定時(shí)將受檢標(biāo)本(抗體或抗原)和酶標(biāo)抗原(或抗體)按不同步驟與固相載體表面的抗原或抗體進(jìn)行反應(yīng),再用洗滌方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與其它物質(zhì)分開,zui后結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢的抗體或抗原量成一定比例;再加入酶反應(yīng)底物后,底物被酶催化后變?yōu)橛猩a(chǎn)物,根據(jù)其顏色反應(yīng)的深淺進(jìn)行定性或定量分析,以了解被測標(biāo)本中抗體或抗原含量。
*(SCT)Elisa試劑盒 ,ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在臨床檢驗(yàn)中除正常反應(yīng)外,有時(shí)??梢姷揭恍╁e(cuò)誤結(jié)果(即假陽性或假陰性結(jié)果)。
引起ELISA測定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。
,ELISA測定的影響做如下討論。
血清是zui常用的ELISA標(biāo)本,血漿一般可視為與血清同等的標(biāo)本,標(biāo)本引起的假陽性和假陰性結(jié)果主要是干擾性物質(zhì)所致,分為內(nèi)源性物質(zhì)和外源性物質(zhì)兩種:
1. 內(nèi)源性物質(zhì) 有人認(rèn)為大約40%的人血清標(biāo)本中含有非特異性干擾物質(zhì),可以不同程度影響檢測結(jié)果。常見的干擾物質(zhì)有:類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、嗜異性抗體、嗜靶抗原自身抗體、醫(yī)源性誘導(dǎo)的抗鼠Ig (s)抗體、交叉反應(yīng)物質(zhì)和其它物質(zhì)等。
外源性物質(zhì)
2. 外源性物質(zhì)常常是由于用于ELISA測定的血標(biāo)本的采集、貯存等不當(dāng)所致。如標(biāo)本溶血、標(biāo)本被細(xì)菌污染、標(biāo)本貯存過久、標(biāo)本凝集不全和*中添加物等影響。
(1)標(biāo)本溶血 由于各種人為原因引起的標(biāo)本溶血,均可因紅細(xì)胞破壞溶解時(shí)釋放出大量具有過氧化物酶活性的血紅蛋白,在以辣根過氧化物酶為標(biāo)記的ELISA測定中,會(huì)導(dǎo)致非特異性顯色,干擾測定結(jié)果。為克服上述干擾作用,標(biāo)本采集時(shí)必須注意避免溶血。
(2)標(biāo)本受細(xì)菌污染 因菌體中可能含有內(nèi)源性辣根過氧化物酶,因此,被細(xì)菌污染的標(biāo)本同溶血標(biāo)本一樣,亦可產(chǎn)生非特異性顯色而干擾測定結(jié)果。
(3)標(biāo)本保存不當(dāng) 在冰箱中保存過久的標(biāo)本,血清中IgG可聚合成多聚體、AFP可形成二聚體,在間接法ELISA測定中會(huì)導(dǎo)致本底過深、甚至造成假陽性;標(biāo)本放置時(shí)間過長(如一天以上),有時(shí)抗原或抗體免疫活性減弱,亦可出現(xiàn)假陰性。為克服上述干擾,ELISA測定的血清標(biāo)本宜為新鮮采集;如不能立即測定,5天內(nèi)測定的血清標(biāo)本可存放于4℃,1周后測定的血清標(biāo)本應(yīng)低溫凍存;凍存后融解的標(biāo)本,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應(yīng)充分混合后再測定,但混勻時(shí)應(yīng)輕柔,不可強(qiáng)烈振蕩。
(4)標(biāo)本凝集不全 在沒有促凝劑和抗凝劑存在的情況下,正常血液采集后1/2~2h開始凝固,18~24h*凝固。臨床檢驗(yàn)工作中,有時(shí)為了爭取時(shí)間快速檢測,常在血液還未開始凝固時(shí)即強(qiáng)行離心分離血清,此時(shí)的血清中仍殘留部分纖維蛋白原,在ELISA測定過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊,易造成假陽性結(jié)果;這類情況于次日復(fù)查時(shí)因血凝已*,血清中不再有纖維蛋白原存在,故復(fù)查結(jié)果變?yōu)殛幮?。為避免上述干擾作用,解決的辦法是血液標(biāo)本采集后必須使其充分凝固后再分離血清,或標(biāo)本采集時(shí)用帶分離膠的*或于*中加入適當(dāng)?shù)拇倌齽?br />(5)標(biāo)本管中添加物質(zhì)的影響 抗凝劑(如肝素,EDTA)、酶抑制劑(如NaN3可抑制ELISA系統(tǒng)中辣根過氧化物酶活性)及快速分離血清的分離膠等均對ELISA測定有一定干擾作用。 綜上所述,對臨床檢驗(yàn)ELISA測定中出現(xiàn)的假陽性或假陰性結(jié)果,在考慮試劑因素和操作因素之外,更多的應(yīng)從標(biāo)本因素方面進(jìn)行分析,并應(yīng)采取相應(yīng)措施排除干擾作用,從而為臨床提供正確可靠的檢測結(jié)果。
YS02217B 鴨γ干擾素(IFN-γ)Elisa試劑盒 Duck Interferon γ ,IFN-γ Elisa試劑盒,進(jìn)口原裝
YS02218B 鴨白介素8(IL-8/CXCL8)Elisa試劑盒 Duck Interleukin-8,IL-8 Elisa試劑盒,進(jìn)口原裝
YS02219B 鴨白介素4(IL-4)Elisa試劑盒 Duck Interleukin-4,IL-4 Elisa試劑盒,進(jìn)口原裝
YS02220B 鴨白介素2(IL-2)Elisa試劑盒 Duck Interleukin 2,IL-2 Elisa試劑盒,進(jìn)口原裝
YS02221B 鴨子碳酸酐酶(CA)Elisa試劑盒 Duck carbonic anhydrase,CA Elisa試劑盒,進(jìn)口原裝
YS02222B 鴨抗凝血素抗體(aPT1/aPT2)Elisa試劑盒 Duck anti-prothrombins antibodies,aPT1/aPT2 Elisa試劑盒,進(jìn)口原裝
YS02223B 魚類主要組織相容性復(fù)合體(MHC)Elisa試劑盒 Fish major histocompatibility complex,MHC Elisa試劑盒,進(jìn)口原裝
YS02224B 鮭魚補(bǔ)體蛋白3(C3)Elisa試劑盒 Salmon Complement 3,C3 Elisa試劑盒,進(jìn)口原裝
YS02225B 鮭魚補(bǔ)體蛋白4(C4)Elisa試劑盒 Salmon Complement 4,C4 Elisa試劑盒,進(jìn)口原裝
YS02226B 魚類白介素1α(IL-1α)Elisa試劑盒 Fish Interleukin 1α ,IL-1α Elisa試劑盒,進(jìn)口原裝
YS02227B 魚類白介素1β (IL-1β)Elisa試劑盒 Fish Interleukin 1β,IL-1β Elisa試劑盒,進(jìn)口原裝
YS02228B 鯉魚卵黃蛋白原(VTG)Elisa試劑盒 Carp Vilogenin,VTG Elisa試劑盒,進(jìn)口原裝
YS02229B 魚類*釋放激素(GnRH)Elisa試劑盒 Fish gonadotropin-releasing hormone,GnRH Elisa試劑盒,進(jìn)口原裝
YS02230B Salmon calcitonin,SCT Elisa試劑盒,進(jìn)口原裝
YS02231B 魚類甲狀腺素(T4)Elisa試劑盒 Fish Thyroxine,T4 Elisa試劑盒,進(jìn)口原裝
YS02232B 魚類三碘甲狀腺原氨酸(T3)Elisa試劑盒 Fish Tri-iodothyronine,T3 Elisa試劑盒,進(jìn)口原裝
YS02233B 魚類*(Cortisol)Elisa試劑盒 Fish Cortisol Elisa試劑盒,進(jìn)口原裝
YS02234B 魚類超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)Elisa試劑盒 Fish high sensitivity C-Reactive Protein,hs-CRP Elisa試劑盒,進(jìn)口原裝
YS02235B 魚骨鈣素/骨*蛋白(OT/BGP)Elisa試劑盒 Fish Oste ocalcin/Bone gla protein,OT/BGP Elisa試劑盒,進(jìn)口原裝
YS02236B 山羊主要組織相容性復(fù)合體(MHC/OLA)Elisa試劑盒 Goat major histocompatibility complex,MHC/OLA Elisa試劑盒,進(jìn)口原裝
YS02237B 山羊白介素2受體(IL-2R)Elisa試劑盒 Goat Interleukin-2 receptor,IL-2R Elisa試劑盒,進(jìn)口原裝
YS02238B 山羊丙酮檢測(acetone)Elisa試劑盒 Goat acetone Elisa試劑盒,進(jìn)口原裝
YS02239B 山羊γ干擾素(IFN-γ)Elisa試劑盒 Goat Interferon γ ,IFN-γ Elisa試劑盒,進(jìn)口原裝
YS02240B 山羊腫瘤壞死因子α(TNF-α)Elisa試劑盒 Goat Tumor necrosis factor α,TNF-α Elisa試劑盒,進(jìn)口原裝
YS02241B 山羊白介素2(IL-2)Elisa試劑盒 Goat Interleukin 2,IL-2 Elisa試劑盒,進(jìn)口原裝