人表面活性蛋白D(SP-D)Elisa試劑盒 ,ELISA的基本原理是:
①使抗原(或抗體)結(jié)合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性;
②使抗原(或抗體)與某種酶聯(lián)結(jié)成酶標(biāo)抗原(或抗體),而且此酶標(biāo)抗原(或抗體)既保留其免疫活性,又保留其酶活性;
③測(cè)定時(shí)將受檢標(biāo)本(抗體或抗原)和酶標(biāo)抗原(或抗體)按不同步驟與固相載體表面的抗原或抗體進(jìn)行反應(yīng),再用洗滌方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與其它物質(zhì)分開(kāi),zui后結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢的抗體或抗原量成一定比例;再加入酶反應(yīng)底物后,底物被酶催化后變?yōu)橛猩a(chǎn)物,根據(jù)其顏色反應(yīng)的深淺進(jìn)行定性或定量分析,以了解被測(cè)標(biāo)本中抗體或抗原含量。
人表面活性蛋白D(SP-D)Elisa試劑盒 ,ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。但ELISA測(cè)定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在臨床檢驗(yàn)中除正常反應(yīng)外,有時(shí)??梢?jiàn)到一些錯(cuò)誤結(jié)果(即假陽(yáng)性或假陰性結(jié)果)。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。
,ELISA測(cè)定的影響做如下討論。
血清是zui常用的ELISA標(biāo)本,血漿一般可視為與血清同等的標(biāo)本,標(biāo)本引起的假陽(yáng)性和假陰性結(jié)果主要是干擾性物質(zhì)所致,分為內(nèi)源性物質(zhì)和外源性物質(zhì)兩種:
1. 內(nèi)源性物質(zhì) 有人認(rèn)為大約40%的人血清標(biāo)本中含有非特異性干擾物質(zhì),可以不同程度影響檢測(cè)結(jié)果。常見(jiàn)的干擾物質(zhì)有:類(lèi)風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、嗜異性抗體、嗜靶抗原自身抗體、醫(yī)源性誘導(dǎo)的抗鼠Ig (s)抗體、交叉反應(yīng)物質(zhì)和其它物質(zhì)等。
外源性物質(zhì)
2. 外源性物質(zhì)常常是由于用于ELISA測(cè)定的血標(biāo)本的采集、貯存等不當(dāng)所致。如標(biāo)本溶血、標(biāo)本被細(xì)菌污染、標(biāo)本貯存過(guò)久、標(biāo)本凝集不全和*中添加物等影響。
(1)標(biāo)本溶血 由于各種人為原因引起的標(biāo)本溶血,均可因紅細(xì)胞破壞溶解時(shí)釋放出大量具有過(guò)氧化物酶活性的血紅蛋白,在以辣根過(guò)氧化物酶為標(biāo)記的ELISA測(cè)定中,會(huì)導(dǎo)致非特異性顯色,干擾測(cè)定結(jié)果。為克服上述干擾作用,標(biāo)本采集時(shí)必須注意避免溶血。
(2)標(biāo)本受細(xì)菌污染 因菌體中可能含有內(nèi)源性辣根過(guò)氧化物酶,因此,被細(xì)菌污染的標(biāo)本同溶血標(biāo)本一樣,亦可產(chǎn)生非特異性顯色而干擾測(cè)定結(jié)果。
(3)標(biāo)本保存不當(dāng) 在冰箱中保存過(guò)久的標(biāo)本,血清中IgG可聚合成多聚體、AFP可形成二聚體,在間接法ELISA測(cè)定中會(huì)導(dǎo)致本底過(guò)深、甚至造成假陽(yáng)性;標(biāo)本放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(如一天以上),有時(shí)抗原或抗體免疫活性減弱,亦可出現(xiàn)假陰性。為克服上述干擾,ELISA測(cè)定的血清標(biāo)本宜為新鮮采集;如不能立即測(cè)定,5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可存放于4℃,1周后測(cè)定的血清標(biāo)本應(yīng)低溫凍存;凍存后融解的標(biāo)本,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應(yīng)充分混合后再測(cè)定,但混勻時(shí)應(yīng)輕柔,不可強(qiáng)烈振蕩。
(4)標(biāo)本凝集不全 在沒(méi)有促凝劑和抗凝劑存在的情況下,正常血液采集后1/2~2h開(kāi)始凝固,18~24h*凝固。臨床檢驗(yàn)工作中,有時(shí)為了爭(zhēng)取時(shí)間快速檢測(cè),常在血液還未開(kāi)始凝固時(shí)即強(qiáng)行離心分離血清,此時(shí)的血清中仍殘留部分纖維蛋白原,在ELISA測(cè)定過(guò)程中可以形成肉眼可見(jiàn)的纖維蛋白塊,易造成假陽(yáng)性結(jié)果;這類(lèi)情況于次日復(fù)查時(shí)因血凝已*,血清中不再有纖維蛋白原存在,故復(fù)查結(jié)果變?yōu)殛幮浴楸苊馍鲜龈蓴_作用,解決的辦法是血液標(biāo)本采集后必須使其充分凝固后再分離血清,或標(biāo)本采集時(shí)用帶分離膠的*或于*中加入適當(dāng)?shù)拇倌齽?br />(5)標(biāo)本管中添加物質(zhì)的影響 抗凝劑(如肝素,EDTA)、酶抑制劑(如NaN3可抑制ELISA系統(tǒng)中辣根過(guò)氧化物酶活性)及快速分離血清的分離膠等均對(duì)ELISA測(cè)定有一定干擾作用。 綜上所述,對(duì)臨床檢驗(yàn)ELISA測(cè)定中出現(xiàn)的假陽(yáng)性或假陰性結(jié)果,在考慮試劑因素和操作因素之外,更多的應(yīng)從標(biāo)本因素方面進(jìn)行分析,并應(yīng)采取相應(yīng)措施排除干擾作用,從而為臨床提供正確可靠的檢測(cè)結(jié)果。
YS01230B Human Surfactant Protein D,SP-D Elisa試劑盒,進(jìn)口原裝
YS01231B 人廣譜細(xì)胞角蛋白(P-CK)Elisa試劑盒 Human pan-cytokeratin,P-CK Elisa試劑盒,進(jìn)口原裝
YS01232B 人血清白蛋白(HSA)Elisa試劑盒 Human sreum albumin,HSA Elisa試劑盒,進(jìn)口原裝
YS01233B 人阿拉伯半乳糖蛋白(AGPs)Elisa試劑盒 Human arabinogalactan proteins,AGPs Elisa試劑盒,進(jìn)口原裝
YS01234B 人β乳糖蛋白抗體IgG Elisa試劑盒 Human β anti-galactan proteins IgG Elisa試劑盒,進(jìn)口原裝
YS01235B 人β乳球蛋白(β-Lg)Elisa試劑盒 Human β Lactoglobulin,β-Lg Elisa試劑盒,進(jìn)口原裝
YS01236B 人β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白(β-Cat)Elisa試劑盒 Human β catenin,β-Cat Elisa試劑盒,進(jìn)口原裝
YS01237B 人淀粉樣前體蛋白(βAPP)Elisa試劑盒 Human β amyloid precursor protein,βAPP Elisa試劑盒,進(jìn)口原裝
YS01238B 人β2糖蛋白(β2-GP)Elisa試劑盒 Human beta2 glycoprotein,β2-GP Elisa試劑盒,進(jìn)口原裝
YS01239B 人α乳清蛋白(α-La)Elisa試劑盒 Human α Lactalbumin,α-La Elisa試劑盒,進(jìn)口原裝
YS01240B 人α2巨球蛋白(α2-MG)Elisa試劑盒 Human α2 macroglobulin,α2 MG Elisa試劑盒,進(jìn)口原裝
YS01241B 人γ肽(Pγ)Elisa試劑盒 Human Peptide γ,Pγ Elisa試劑盒,進(jìn)口原裝
YS01242B 人α1抗胰*(AACT)Elisa試劑盒 Human Alpha1 Antichymotrypsin,AACT Elisa試劑盒,進(jìn)口原裝
YS01243B 人P鈣黏蛋白/胎盤(pán)鈣黏蛋白(P-cad)Elisa試劑盒 Human Placenta Cadherin,P-cad Elisa試劑盒,進(jìn)口原裝
YS01244B 人高密度脂蛋白*(HDL-C)Elisa試劑盒 Human High density lipoprotein cholesterol,HDL-C Elisa試劑盒,進(jìn)口原裝
YS01245B 人低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白6(LRP-6)Elisa試劑盒 Human low-density lipoprotein-receptor-related protein,LRP-6 Elisa試劑盒,進(jìn)口原裝
YS01246B 人N-乙?;?絲氨酰-天門(mén)冬酰-賴氨酰-*(AcSDKP)Elisa試劑盒 Human N-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro,AcSDKP Elisa試劑盒,進(jìn)口原裝
YS01247B 人高密度脂蛋白(HDL)Elisa試劑盒 Human High density lipoprotein,HDL Elisa試劑盒,進(jìn)口原裝
YS01248B 人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)Elisa試劑盒 Human Lactoferrin,LTF/LF Elisa試劑盒,進(jìn)口原裝
YS01249B 人碳酸酐酶2(CA-2)Elisa試劑盒 Human carbonic anhydrase 2,CA-2 Elisa試劑盒,進(jìn)口原裝
YS01250B 人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)Elisa試劑盒 Human Pulmonary surfatcant-associated protein A,SP-A Elisa試劑盒,進(jìn)口原裝