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  • 基礎(chǔ)型DNA恒溫快速擴(kuò)增試劑盒

基礎(chǔ)型DNA恒溫快速擴(kuò)增試劑盒

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  • 型號(hào)
  • 品牌
  • 所在地北京市
  • 更新時(shí)間2023-08-13
  • 廠商性質(zhì)其他
  • 入駐年限1
  • 實(shí)名認(rèn)證已認(rèn)證
  • 產(chǎn)品數(shù)量92
  • 人氣值153
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北京立博泰業(yè)科技有限公司位于北京市海淀區(qū)中國(guó)農(nóng)大國(guó)際創(chuàng)業(yè)園,是集研發(fā)和科研儀器研發(fā)銷(xiāo)售為-體的高科技專(zhuān)業(yè)公司,由具有多年研發(fā)和企業(yè)運(yùn)營(yíng)經(jīng)驗(yàn)的專(zhuān)業(yè)人士創(chuàng)辦。公司于201 6年被認(rèn)定為企業(yè)和中關(guān)村企業(yè),公司以研發(fā)為己任,多位相教授、博士和碩土組成研發(fā)團(tuán)隊(duì),依托多家國(guó)內(nèi)高校及科研院所,圍繞生命科學(xué)、化工新材料、生物質(zhì)能源、光伏風(fēng)電新能源和環(huán)保技術(shù)以及傳統(tǒng)化工產(chǎn)業(yè)技術(shù)及裝備革新方面開(kāi)展了大量的研發(fā)和推廣工作, 獲得多項(xiàng)國(guó)家, 部分項(xiàng)目已經(jīng)實(shí)現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化。"工欲善其事,必先利其器”,公司秉承服務(wù)科研的經(jīng)營(yíng)理念,與眾多國(guó)內(nèi)外優(yōu)秀儀器設(shè)備制造廠商建立了良好的合作關(guān)系,全力協(xié)助國(guó)內(nèi)高校和科研院所量身購(gòu)置所需科學(xué)儀器和試劑耗材,不斷弓|進(jìn)和推薦各領(lǐng)域*儀器和試劑
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(貨號(hào):WLB8201KIT)產(chǎn)品名稱(chēng)DNA恒溫快速擴(kuò)增試劑盒(基礎(chǔ)型)、基礎(chǔ)型DNA恒溫快速擴(kuò)增試劑盒原理概述:本試劑盒基于一種常溫恒溫核酸快速擴(kuò)增技術(shù):在常溫恒溫下,重組酶和引物形成蛋白/單鏈核苷酸的復(fù)合體Rec/ssDNA,在輔助蛋白和單鏈結(jié)合蛋白SSB的幫助下,侵入雙鏈DNA模板
基礎(chǔ)型DNA恒溫快速擴(kuò)增試劑盒 產(chǎn)品詳情

(貨號(hào):WLB8201KIT

產(chǎn)品名稱(chēng)

DNA恒溫快速擴(kuò)增試劑盒(基礎(chǔ)型)、基礎(chǔ)型DNA恒溫快速擴(kuò)增試劑盒

原理概述:

本試劑盒基于一種常溫恒溫核酸快速擴(kuò)增技術(shù):在常溫恒溫下,重組酶和引物形成蛋白/單鏈核苷酸的復(fù)合體Rec/ssDNA,在輔助蛋白和單鏈結(jié)合蛋白SSB的幫助下,侵入雙鏈DNA模板;在侵入位點(diǎn)形成D-loop區(qū)域,并開(kāi)始對(duì)DNA雙鏈進(jìn)行掃描;待找到與引物互補(bǔ)的目的區(qū)域后,復(fù)合體Rec/ssDNA解體的同時(shí),聚合酶也結(jié)合到引物的3’末端,開(kāi)始鏈的延伸。

產(chǎn)品特點(diǎn):

本試劑盒具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、反應(yīng)時(shí)間短(僅需30 mins)等優(yōu)點(diǎn),反應(yīng)組分為干粉狀態(tài),操作簡(jiǎn)便,易于保存。使用金屬浴、水浴鍋等即可進(jìn)行反應(yīng)操作,無(wú)需購(gòu)買(mǎi)PCR儀等價(jià)格高昂的設(shè)備。

引物設(shè)計(jì):

建議使用長(zhǎng)度在30-35 bp的引物,引物過(guò)短會(huì)影響擴(kuò)增速度和檢測(cè)靈敏度;引物設(shè)計(jì)避免形成二級(jí)結(jié)構(gòu)而影響擴(kuò)增;擴(kuò)增子長(zhǎng)度建議在150-300 bp,通常不超過(guò)500 bp。

試劑盒組成:

組成 含量
A buffer 1.6 mL×1管
B buffer 150 μL×1管
正對(duì)照模板 30 μL×1管
正對(duì)照引物Mix 60 μL×1管
試劑 48份
使用說(shuō)明書(shū) 1份

試劑盒儲(chǔ)存:

運(yùn)輸條件:低溫運(yùn)輸;

儲(chǔ)存條件:儲(chǔ)存溫度 ≤ -20 oC,避光保存,避免重壓和反復(fù)凍融;

產(chǎn)品有效期:12個(gè)月。

 

操作步驟:提前30分鐘將試劑盒所需組分取出,室溫融化,震蕩混勻。

1) 每個(gè)干粉反應(yīng)管加入29.4 μL A buffer(注意:A buffer需融化混勻,否則會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)效果產(chǎn)生影響);

2) 每個(gè)反應(yīng)管分別加入2 μL上游引物和2 μL下游引物(引物濃度10 μM,對(duì)于多個(gè)反應(yīng)、步驟1和步驟2可以混合后再分裝至反應(yīng)管中);

3) 向反應(yīng)管中依次加入12.1 μL ddH2O和2 μL核酸模板(可根據(jù)核酸濃度調(diào)整加入的核酸模板體積,并相應(yīng)調(diào)整加入的ddH2O體積,至模板與ddH2O總體積為14.1 μL);

4) 最后向反應(yīng)管中加入2.5 μL B buffer并充分混合(請(qǐng)務(wù)必上下顛倒甩動(dòng)反應(yīng)管8-10次進(jìn)行混勻;對(duì)于多個(gè)反應(yīng),建議將B buffer加至反應(yīng)管的蓋子內(nèi)側(cè)上下顛倒后混勻);

5) 混勻后,將反應(yīng)液甩(或快速離心)至管子底部,然后立即將反應(yīng)管放入恒溫設(shè)備中37-39 oC孵育30 mins;

6) 反應(yīng)結(jié)束后,加入50 μL酚/氯仿,1:1抽提反應(yīng)液,12000 rpm離心5 mins,取5 μL上清進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)。

體系配制

組分 體積(μL)
A buffer 29.4
上游引物(10 μM)* 2
下游引物(10 μM)* 2
ddH2O和DNA模板 14.1
B buffer 2.5
總體積 50

*正對(duì)照反應(yīng)單元體系配制:正對(duì)照模板加入2μL,加入4 μL正對(duì)照引物Mix(包含上/下游引物),其他組分參照體系配制。

注意事項(xiàng):

1. 由于試劑盒靈敏度非常高,在進(jìn)行反應(yīng)時(shí)請(qǐng)注意避免核酸污染,并設(shè)置空白對(duì)照;

2. 使用時(shí)請(qǐng)取出實(shí)驗(yàn)所需的MIRA反應(yīng)單元的數(shù)量,剩余部分請(qǐng)置于存儲(chǔ)條件下。

關(guān)鍵詞:水浴鍋
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