輔酶ⅠNAD(H)含量測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法公司正在出售的產(chǎn)品：芳香乙酰胺脫乙?；笜拥鞍?抗體ACN9蛋白抗體
雙鏈RNA腺苷酸脫氨基酶抗體腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2抗體腺苷酸激酶抗體α2巨球蛋白樣蛋白1抗體 α2ML1細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白3抗體肌動(dòng)蛋白α/α-SMA/α Actin抗體
特別提醒：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測(cè)。
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 檢測(cè)方法 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| 輔酶ⅠNAD(H)含量測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法 | 可見(jiàn)分光光度法 | 50管/24樣 | BJ-016111-2 |
商品介紹:
| 測(cè)定意義 輔酶ⅠNAD(H)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，NAD+是糖酵解（EMP）和三羧酸循環(huán)（TCA）的主要?dú)涫荏w，生成的NADH經(jīng)呼吸電子鏈（ETC）傳遞把電子交給氧，在合成ATP的同時(shí)，形成大量的ROS，同時(shí)NADH再生為NAD+。糖、脂、蛋白質(zhì)三大代謝物質(zhì)分解中的氧化反應(yīng)絕大部分通過(guò)這一體系完成。NAD(H)含量和NADH/NAD+比值的高低可用于評(píng)價(jià)糖酵解和TCA循環(huán)的強(qiáng)弱。較高的NAD(H)及NADH/NAD+比值說(shuō)明細(xì)胞呼吸耗氧量較高，處于過(guò)氧化狀態(tài)。此外，NADH/NAD+比值升高也可抑制糖酵解和TCA循環(huán)。另外，NAD+降解產(chǎn)物對(duì)細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)、代謝和基因表達(dá)等具有重要的調(diào)控作用。 測(cè)定原理 分別用酸性和堿性提取液提取樣品中NAD+和NADH，NADH通過(guò)PMS的遞氫作用，還原氧化型噻唑藍(lán)（MTT）為甲瓚，在570nm下檢測(cè)吸光值；而NAD+可被乙醇脫氫酶還原為NADH，進(jìn)一步采用MTT還原法檢測(cè)。 需自備的儀器和用品 可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
優(yōu)點(diǎn)如下：
1、快速簡(jiǎn)便：全程約50分鐘，可測(cè)100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測(cè)紅細(xì)胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測(cè)白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測(cè)組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測(cè)線(xiàn)粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放6個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗(yàn)： X =103.3%。
7、受外界影響因素小：干擾因素少，重復(fù)性強(qiáng)。
8、測(cè)試面廣：可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等，效果均佳。
測(cè)定步驟：
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm。
2、 試劑三的稀釋?zhuān)簩⒃噭┤谜麴s水稀釋50倍，用多少配多少。（試劑三和蒸餾水1：49稀釋。
3、 工作液配制：在試劑一加入100μl試劑二，充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。（若一次性測(cè)定樣本較少，可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml：0.1ml的比例混勻配制）
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解（溶解后一周內(nèi)用完）。
5、 樣本測(cè)定（在96孔板中依次加入下列試劑）充分混勻，室溫靜置30min后，450nm處測(cè)定各管吸光值A(chǔ)。
注意事項(xiàng)：
待測(cè)樣品-70℃可保存1個(gè)月。需注意反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致SOD部分失活。
一個(gè)試劑盒如果不能在3次內(nèi)使用完畢，其中的WST-8需要在使用時(shí)適當(dāng)分裝，以避免反復(fù)凍融導(dǎo)致的檢測(cè)效果下降。
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋時(shí)所用的稀釋液應(yīng)盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時(shí)，標(biāo)準(zhǔn)品也宜使用SOD樣品制備液進(jìn)行稀釋?zhuān)划?dāng)樣品為血液等無(wú)需處理的樣品時(shí)，宜使用試劑盒提供的SOD檢測(cè)緩沖液稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。
抗氧化物會(huì)對(duì)本試劑盒的檢測(cè)產(chǎn)生干擾，例如0.1mM ascorbic acid，5mM GSH都會(huì)使測(cè)定出來(lái)的吸光度顯著升高。此時(shí)盡管樣品沒(méi)有顏色，如果設(shè)置了使用說(shuō)明中的空白對(duì)照3，就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。
輔酶ⅡNADP(H)含量測(cè)試盒 輔酶Ⅱ系列 50管/24樣 可見(jiàn)分光光度法
NAD激酶（NADK）測(cè)試盒 輔酶Ⅱ系列 100管/48樣 微量法
NAD激酶（NADK）測(cè)試盒 輔酶Ⅱ系列 50管/24樣 可見(jiàn)分光光度法
NADP磷酸酶（NADPase）測(cè)試盒 輔酶Ⅱ系列 100管/96樣 微量法
NADP磷酸酶（NADPase）測(cè)試盒 輔酶Ⅱ系列 50管/48樣 可見(jiàn)分光光度法
6磷酸葡萄糖脫氫酶（G6PDH）/葡萄糖6磷酸脫氫酶測(cè)試盒 輔酶Ⅱ系列 100管/96樣 微量法
6磷酸葡萄糖脫氫酶（G6PDH）/葡萄糖6磷酸脫氫酶測(cè)試盒 輔酶Ⅱ系列 50管/48樣 紫外分光光度法
胞漿異檸檬酸脫氫酶（ICDHc）測(cè)試盒 輔酶Ⅱ系列 100管/96樣 微量法
胞漿異檸檬酸脫氫酶（ICDHc）測(cè)試盒 輔酶Ⅱ系列 50管/48樣 紫外分光光度法
NADP蘋(píng)果酸酶（NADPME）測(cè)試盒 輔酶Ⅱ系列 100管/96樣 微量法
NADP蘋(píng)果酸酶（NADPME）測(cè)試盒 輔酶Ⅱ系列 50管/48樣 紫外分光光度法
NAD蘋(píng)果酸酶（NADME）測(cè)試盒 輔酶Ⅱ系列 100管/96樣 微量法
NAD蘋(píng)果酸酶（NADME）測(cè)試盒 輔酶Ⅱ系列 50管/48樣 紫外分光光度法
6磷酸葡萄糖酸脫氫酶（6PGDH）測(cè)試盒 輔酶Ⅱ系列 100管/96樣 微量法
6磷酸葡萄糖酸脫氫酶（6PGDH）測(cè)試盒 輔酶Ⅱ系列 50管/48樣 紫外分光光度法
肌酸激酶(CK)測(cè)試盒 輔酶Ⅱ系列 100管/96樣 微量法
肌酸激酶(CK)測(cè)試盒 輔酶Ⅱ系列 50管/48樣 紫外分光光度法
脂肪酸合成酶（FAS）測(cè)試盒 輔酶Ⅱ系列 100管/96樣 微量法
脂肪酸合成酶（FAS）測(cè)試盒 輔酶Ⅱ系列 10管/9樣 紫外分光光度法
脂肪酸合成酶（FAS）測(cè)試盒 輔酶Ⅱ系列 25管/24樣 紫外分光光度法
脂肪酸合成酶（FAS）測(cè)試盒 輔酶Ⅱ系列 50管/48樣 紫外分光光度法
AIMP2抗體
乙酰酶抗體
5-氨基乙酰丙酸合酶1抗體
防御素α1/3抗體
ABC膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體
植物延長(zhǎng)蛋白
A-Raf抗體
磷酸化A-Raf抗體
紅細(xì)胞腺苷脫氨酶3抗體
雄激素結(jié)合蛋白抗體
肝再生增強(qiáng)因子抗體
APP/ABPP淀粉樣肽前體蛋白抗體
甲胎蛋白單克隆抗體
甲胎蛋白單克隆抗體
ADP核糖基化因子結(jié)合蛋白1抗體
芳香烴受體抗體
吸引素抗體
腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1抗體
蛋白激酶B2
輔酶ⅠNAD(H)含量測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法血管生成素2抗體
芳香化酶/細(xì)胞色素P450/雌激素合成酶抗體
腺苷A2A受體抗體
蛋白激酶A錨定蛋白95抗體
頂膜鈉依賴(lài)性膽鹽轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白抗體
實(shí)驗(yàn)方法學(xué)：
一、肝素的配制：
市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱(chēng)取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤(rùn)管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些?？梢匀?.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。
肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤(rùn)管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉(zhuǎn)動(dòng)，每隔5～10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集：
全血根據(jù)收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí)，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱(chēng)之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱(chēng)之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時(shí)，直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。
選擇抗凝的注意點(diǎn)：
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后
