特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。
產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
果膠甲酯化程度測試盒可見分光光度法 | 可見分光光度法 | 50管/48樣 | BJ-01611399-2 |
商品介紹:
測定意義 植物細(xì)胞壁中的果膠是植物初生細(xì)胞壁的主要成分,除了起結(jié)構(gòu)支撐、物質(zhì)運輸?shù)茸饔猛?,還具有抵抗逆境的作用。果膠甲酯化程度影響了細(xì)胞壁的堅韌程度及其抗性。 測定原理 果膠甲酯鍵經(jīng)皂化處理后釋放出甲醇,甲醇與2,4-戊二酮反應(yīng)顯色,在412nm下測定吸光值;同時半乳糖醛酸在70℃下與濃硫酸反應(yīng)生成5-甲?;?2-呋喃甲酸,5-甲?;?2-呋喃甲酸與3,5-二甲jiben酚反應(yīng)產(chǎn)生有色物質(zhì),在450nm下有最大吸光值。以甲醇生成量與半乳糖醛酸含量的比值代表果膠甲酯化程度。 自備實驗用品及儀器 天平、低溫離心機、分光光度計、1mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋、蒸餾水、硫酸。 |
優(yōu)點如下:
1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細(xì)胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗: X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復(fù)性強。
8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
測定步驟:
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)充分混勻,室溫靜置30min后,450nm處測定各管吸光值A(chǔ)。
注意事項:
待測樣品-70℃可保存1個月。需注意反復(fù)凍融會導(dǎo)致SOD部分失活。
一個試劑盒如果不能在3次內(nèi)使用完畢,其中的WST-8需要在使用時適當(dāng)分裝,以避免反復(fù)凍融導(dǎo)致的檢測效果下降。
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋時所用的稀釋液應(yīng)盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時,標(biāo)準(zhǔn)品也宜使用SOD樣品制備液進行稀釋;當(dāng)樣品為血液等無需處理的樣品時,宜使用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。
抗氧化物會對本試劑盒的檢測產(chǎn)生干擾,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都會使測定出來的吸光度顯著升高。此時盡管樣品沒有顏色,如果設(shè)置了使用說明中的空白對照3,就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。
磷suan化Ras信號轉(zhuǎn)導(dǎo)KSR1蛋白抗體黃赭色鏈霉菌地瓜藤
氯酮抗體大腸桿菌
7抗體橢圓釀酒酵母
9抗體(舒血管su9)空泡鹽紅菌血小板源性生長因子-A抗體流式免疫組化
14抗體黑曲霉CBZ-L-焦谷ansuan
電壓閥門通道混合器相關(guān)亞家族成員7抗體大腸埃希菌Na-對甲苯磺酰-L-苯丙ansuan氯甲基酮
ATP敏感性通道亞基kir6.2抗體側(cè)孢短芽胞桿菌肌酐
TIP60抗體淡紫擬青霉D-天冬ansuan二甲酯鹽suan鹽
組蛋白賴ansuan特異性脫甲基酶1抗體小平菇(秀珍菇)膠原酶
轉(zhuǎn)錄因子GATA3結(jié)合蛋白G3B抗體根瘤菌核糖核suan酶T1
磷suan化周期蛋白依賴激酶抑制因子1C抗體豌豆根瘤菌人纖溶酶
磷suan化通道蛋白DRK1抗體大腸桿菌2′-脫氧胞苷-5′-二磷suan三鈉鹽
離子通道蛋白Kv3.4抗體吸水鏈霉菌花寶2號
離子通道蛋白Kv3.3抗體熱帶假絲酵母瓊脂糖
組蛋白去甲基化酶JMJD2B抗體頂孢霉微晶纖維su板
果膠甲酯化程度測試盒可見分光光度法白介su10(IL-10)試劑盒Anti-CPN1 Antibody白介su12抗原(人)
血清樣蛋白A(SAA)試劑盒Anti-CPA5 Antibody白介su-12受體β2抗原
磷suan化腺苷suan活化蛋白激酶(AMPK)試劑盒Anti-CPNE8 Antibody白介su13抗原
γ干擾su(IFN-γ)試劑盒Anti-CPNE8 Antibody白介su14抗原
白介su2(IL-2)試劑盒Anti-CR2 Antibody白介su-15抗原
白介su1β(IL-1β)試劑盒Anti-CPN2 Antibody白介su16抗原
半胱ansuan蛋白mei抑制劑(CSTA)試劑盒 Anti-CR1 Antibody白介su-16抗原
實驗方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后