商品屬性:
產品名稱 | |
規(guī)格 | 50管/24樣 |
檢測方法 | 可見分光光度法 |
貨號 | GOY-01S6326 |
商品介紹:
測定意義
LDH(EC 1.1.1.27)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,是糖酵解途徑的末端酶,催化丙酮酸與乳酸之間的可逆反應,伴隨著NAD+/NADH之間互變。
測定原理:
LDH催化NAD+氧化乳酸生成丙酮酸,丙酮酸進一步與2, 4 - 二硝基苯肼作用生成丙酮酸二硝基苯腙,在堿性溶液中顯棕紅色,顏色深淺與丙酮酸濃度成正比。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計、恒溫水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
實驗方法學:
一、肝素的配制: 市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?/span>0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉動,每隔5~10分鐘轉動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液樣本的收集: 全血根據收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。 1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。 2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA。 |
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
化中心粒蛋白Nudel抗體Human P3(Caspase-3) ELISA Kit犬骨橋素elisa檢測試劑盒多少錢
類固脫氫樣蛋白NSDHL抗體Human CYCS(Cytochrome c) ELISA Kit犬甲狀腺素elisa檢測試劑盒多少錢
化核因子p50/k基因結合核因子抗體Human APOA1(Apolipoprotein A-I) ELISA Kit犬雌二醇elisa檢測試劑盒多少錢
化1型神經纖維瘤抗體Human NOS1/nNOS(Nitric oxide synthase, brain) ELISA Kit犬組elisa檢測試劑盒多少錢
化谷受體2B抗體Human APOC1(Apolipoprotein C-I) ELISA Kitα1微球蛋白elisa檢測試劑盒多少錢
化核因子p50/k基因結合核因子抗體Human PDGFB(Plaet-derived growth factor subunit B) ELISA Kit鮭魚補體蛋白4elisa檢測試劑盒哪里有買
化核因子p50/k基因結合核因子抗體Human APCS(Serum amyloid P-component) ELISA Kit鴨白介素1elisa檢測試劑盒品牌
化核因子p50/k基因結合核因子抗體Human P1(Caspase-1) ELISA Kit猴白介素6elisa檢測試劑盒哪里有買
乳酸脫氫酶(LDH)可見分光光度法檢測試劑盒聚烯酰 非離子型,分子量:200萬-1400萬Anti-OVA/FITC 熒光素標記兔抗雞卵白蛋白/卵清蛋白抗體IgG雞τ-蛋白激1(τPK1)聯免疫吸附測定試劑盒
N-鄰 99%Anti-ox-LDL/FITC 熒光素標記抗氧化低密度脂蛋白抗體IgG雞膀胱腫瘤抗原(BTA)聯免疫吸附測定試劑盒
蘿卜硫素 90%Anti-OXR /FITC 熒光素標記整合素樣金屬蛋白與1型-7抗體IgG雞抗環(huán)胍氨肽抗體(ACCPA)聯免疫吸附測定試劑盒
異龍腦酯 95%Anti-Oxytetracycline/FITC 熒光素標記抗體IgG雞α1(Ta1)聯免疫吸附測定試劑盒
亞鈉 80%Anti-P2P-R/RBBP6 /FITC 熒光素標記增殖潛能相關蛋白抗體IgG雞早老素1(PS1)聯免疫吸附測定試劑盒
N,N-二乙-2--1,4- 99%Anti-P2Y1 receptor/FITC 熒光素標記P2Y1受體抗體IgG雞垂體腺苷環(huán)化激活肽38(PACAP-38)聯免疫吸附測定試劑盒
超細球形銅粉 99.9%,D50(0.2~0.55μm) Anti-P2Y4 receptor/P2ry4 /FITC 熒光素標記P2Y4受體抗體IgG雞垂體腺苷環(huán)化激活肽27(PACAP-27)聯免疫吸附測定試劑盒
2,4-二-3,5-二硝三氟 97%Anti-P14ARF/FITC 熒光素標記抑癌因p14抗體IgG
2,4,5-三嘧 98%Anti-P16/FITC 熒光素標記兔抗抑癌因p16抗體IgG綿羊抵抗素(RETN)聯免疫吸附測定試劑盒
2-酰酯 98%Anti-P19ARF/FITC 熒光素標記p19ARF抑癌因抗體IgG綿羊S100鈣結合蛋白B (S100B)聯免疫吸附測定試劑盒
氨乙縮二 97%Anti-P21/WAF1/CIP1 /FITC 熒光素標記p21抗體IgG綿羊P選擇素(SELP)聯免疫吸附測定試劑盒
4-乙烯 98% Anti-P27/kip1 /FITC 熒光素標記P27抗體/周期素依賴激抑制劑IgG綿羊β內啡肽(β-EP)聯免疫吸附測定試劑盒
納米氮化鋁 99.9% metals basis,50nmAnti-P27/kip1/Cy3 熒光素Cy3標記P27抗體/周期素依賴激抑制劑IgG綿羊白介素10(IL-10)聯免疫吸附測定試劑盒
六方氮化 99.9% metals basis,1~2μmAnti-P38 MAPK/FITC 熒光素標記絲裂原活化蛋白激p38抗體IgG綿羊血清淀粉樣蛋白A(SAA)聯免疫吸附測定試劑盒
碳化 1-10 μm,98%Anti-P38 MAPK/RBITC 紅色熒光素羅丹明(RBITC)標記絲裂原活化蛋白激p38抗體IgG綿羊化腺苷活化蛋白激(AMPK)聯免疫吸附測定試劑盒
操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數。
1. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。
4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。
8. 用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。