我公司提供原代細胞、細胞系、細胞株和菌種,細胞庫管理規(guī)范,提供的細胞株背景清楚,提供參考文獻和*培養(yǎng)條件。純度可達 90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
293FT:胚腎細胞廠家 | T25m2 | CS-963211 |
描述:(1)公司可提供新鮮或凍存細胞株;(2)細胞株數(shù)量約 5×105/瓶;(3)不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細胞密度。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、售后服務(wù)標準。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮細胞株,客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復(fù)蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
細胞處理:
1) 復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細胞處理方法:
以下細胞處理方法及細胞說明書僅供參考,具體操作還需要根據(jù)到貨時細胞密度,細胞生長狀態(tài)等具體情況,酌情處理,如需要更詳細技術(shù)指導(dǎo),請及時電話或郵件聯(lián)系。
一.貼壁細胞
客戶接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
顯微鏡觀察細胞,當(dāng)細胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理。如未達到細胞傳代密度,培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細胞,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
1000rpm,5min離心,重懸細胞。換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2 培養(yǎng)。
二.懸浮細胞
1. 接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
3. 嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒)。
5. 1000rpm,5min離心,重懸細胞。 換新的細胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基,37℃,5%CO2 培養(yǎng)細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。懸浮細胞凍存時,應(yīng)將細胞收集,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,吹打均勻后,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進行凍存。
Anti- KGF/FGF-7 角質(zhì)形成細胞生長因子受體/纖維母細胞生長因子-7抗體 0.1ml
Anti-FGF-8/HBGF-8 成纖維細胞生長因子-8/纖維母細胞生長因子-8抗體 0.1ml
anti-FGF-10 成纖維細胞生長因子-10/纖維母細胞生長因子-10抗體 0.2ml
Anti-KGFR 角質(zhì)形成細胞生長因子受體抗體 0.2ml
Anti-FGFR1 纖維母細胞生長因子受體1抗體 0.1ml
Anti-FGFR2 成纖維細胞生長因子受體2抗體 0.1ml
Anti-FGFR3 成纖維細胞生長因子受體3抗體 0.1ml
Anti-FGFR4 成纖維細胞生長因子受體4抗體 0.1ml
Anti-fgl2 凝血酶原酶抗體/纖維介素蛋白/前凝血素抗體 0.1ml
anti-Fibulin 1 抗“衰老關(guān)鍵蛋白”抗體 0.1ml
Anti-FLIP S/L 凋亡調(diào)節(jié)基因之一抗體 0.1ml
Anti-FN 纖維連結(jié)蛋白抗體 0.1ml
Anti-FOSB FosB抗體 0.2ml
Anti-FOSL1 FOSL1抗體 1ml
Anti-FOSL2 FOSL2抗體 0.1ml
anti-FoxP1 FoxP1抗體 0.1ml
Anti-FoxP3 叉頭蛋白3-T細胞轉(zhuǎn)錄因子 0.1ml
anti-Measles virus of fusion protein 抗麻疹病毒抗體 0.1ml
Anti-FSH 鼠抗人促卵泡生成素單克隆抗體 0.1ml
anti-FSH-R 促卵泡刺激素受體抗體 0.2ml
Anti-G Protein G蛋白/鳥苷酸結(jié)合蛋白抗體 0.1ml
Anti-GABA-ARα1 γ1氨基丁酸受體α1抗體 0.1ml
anti-GABAB1 抗g-氨基丁酸B1受體抗體 0.2ml
anti-GABAB2 抗g-氨基丁酸B2受體抗體 0.1ml
Anti-GAD-65 谷氨酸脫羧酶-65抗體 0.1ml
Anti-GAD-67 谷氨酸脫羧酶-67抗體 0.1ml
Anti-Galanin 神經(jīng)節(jié)肽抗體“甘丙肽” 0.2ml
Anti-Galectin-3 半乳糖凝集素-3抗體 0.1ml
Anti-GAP-43 神經(jīng)生長相關(guān)蛋白-43 0.1ml
Anti-GAPDH 3-磷酸甘油醛脫氫酶 0.1ml
Anti-GASR G蛋白偶聯(lián)受體-2抗體 0.1ml
Anti-Gastrin 胃泌素/蛙皮素抗體 0.1ml
Anti-Gax 生長終止特異性同源盒基因抗體 0.2ml
Anti-GCS 谷氨酸半胱氨酸γ合成酶抗體 0.1ml
HMGCS1(Human 3-hydroxy-3-methylglutaryl-Coenzyme A synthase 1) ELISA Kit 人3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A合酶1 96T
EAR12(Human eosinophil-associated ribonuclease A family member 12) ELISA KIT 人嗜酸性白血球相關(guān)之RNA水解酵素家族成員12 96T
EAR3(Human eosinophil-associated ribonuclease A family member 3)ELISA Kit 人嗜酸性白血球相關(guān)之RNA水解酵素家族成員3 96T
EAR2(Human eosinophil-associated ribonuclease A family member 2)ELISA Kit 人嗜酸性白血球相關(guān)之RNA水解酵素家族成員2 96T
DPYSL3(Human dihydropyrimidinase-like 3) ELISA Kit 人二氫嘧啶酶樣3 96T
WARS(Human tryptophanyl-tRNA synthetase) ELISA Kit 人色氨酰tRNA合成酶 96T
WARS(Human tryptophanyl-tRNA synthetase) ELISA Kit 人色氨酰tRNA合成酶 96T
HK3(Human hexokinase 3) ELISA Kit 人己糖激酶3 96T
PFKP(Human phosphofructokinase-platelet) ELISA Kit 人血小板型磷酸果糖激酶 96T
UGCG(Human UDP-glucose ceramide glucosyltransferase) ELISA Kit 人尿苷二磷酸葡萄糖神經(jīng)酰胺葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶 96T
Casp4(Human caspase 4-apoptosis-related cysteine peptidase) ELISA Kit 人凋亡相關(guān)半胱氨酸肽酶4 96T
PDXK(Human caspase 4-apoptosis-related cysteine peptidase) ELISA Kit 人吡哆醛/吡哆醇維生素B6激酶 96T
DPYSL2(human dihydropyrimidinase-like 2) ELISA Kit 人二氫嘧啶酶樣2 96T
SGK2(Human serum/glucocorticoid regulated kinase 2) ELISA KIT 人血清/糖皮質(zhì)激素調(diào)節(jié)激酶2 96T
MKK6(Human mitogen activated protein kinase kinase 6) ELISA Kit 人絲裂原活化蛋白激酶激酶6 96T
PDXP(Human pyridoxal/pyridoxine vitamin B6-phosphatase) ELISA Kit 人吡哆醛/吡哆醇維生素B6磷酸酶 96T
Tgtp(Human T-cell specific GTPase) ELISA Kit 人T細胞特異性鳥苷三磷酸酶 96T
FDFT1(Human farnesyl-diphosphate farnesyltransferase 1) ELISA Kit 人法尼基二磷酸法尼基轉(zhuǎn)移酶1 96T
D-LDH(Human D-Lactate Dehydrogenase) ELISA Kit 人D-乳酸脫氫酶 96T
Alpha1-AT(Human Alpha1-Antitrypsin) ELISA Kit 人α1抗胰蛋白酶 96T
KLK 1(Human Kallikrein 1) ELISA Kit 人激肽釋放酶1 96T
KLK 6(Human Kallikrein 6) ELISA Kit 人激肽釋放酶6 96T
PaCoA(Human Phosphorylated acetyl CoA) ELISA Kit 人磷酸化乙酰輔酶A 96T
PGAM2(Human phosphoglycerate mutase 2) ELISA Kit 人磷酸甘油酸變位酶2 96T
PTGDS(Human Prostaglandin D synthase) ELISA Kit 人前列腺素D合成酶 96T
293FT:胚腎細胞廠家PPIL1(Human peptidylprolyl isomerase(cyclophilin)-like 1) ELISA Kit 人肽酰脯氨酰異構(gòu)酶(親環(huán)蛋白)樣1 96T
MAPKAPK3(Human mitogen-activated protein kinase-activated protein kinase 3) ELISA Kit 人促分裂素原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶3 96T
ACE I (Human Angiotensin I Converting Enzyme) ELISA Kit 人血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶 96T
AP(Human Aprotinin) ELISA Kit 人抑肽酶 96T
Casp-12(Human Caspase 12) ELISA Kit 人胱天蛋白酶12 96T